基于HPLC-Q-TOF/MS的代谢组学方法用于解毒祛瘀滋阴方对系统性红斑狼疮干预作用的研究

该文建立了基于高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(HPLC-Q-TOF/MS)的代谢组学方法,研究系统性红斑狼疮(SLE)小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后血清代谢物的变化,探讨SLE发病及药物作用机制。利用正交偏最小二乘法(orthogonal partial least squares, OPLS)对实验数据进行模式识别,发现对照组、SLE模型组、解毒祛瘀滋阴方治疗组和醋酸泼尼松治疗组的代谢图谱存在较明显的差异。根据OPLS载荷图,利用精确质量数结合二级质谱鉴定出traumatic acid,PAF,12(S)-HETE,15(S)-HETrE,Hepoxilin B3等12种差异代谢物。SLE小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后,有效调节PAF,12(S)-HETE等差异代谢物的相对含量接近于对照组水平。代谢通路分析表明,SLE发病会导致体内不饱和脂肪酸和氨基酸代谢通路显著变化,而解毒祛瘀滋阴方对SLE紊乱的不饱和脂肪酸代谢通路具有一定修复调节作用。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白的提取和鉴定表征

该研究通过限制性胃蛋白酶酶解法提取蕲蛇中Ⅱ型胶原蛋白(type Ⅱ collagen,CⅡ),并采用离子交换色谱法对其进行纯化,所得蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法、红外吸收光谱法和质谱法进行表征鉴定,结果显示,蕲蛇CⅡ相对分子质量约为130 kDa,其紫外吸收峰约为223 nm;红外图谱中在1 200~1 450 cm^-1具有特征吸收,表明蕲蛇CⅡ中有特征序列Gly-X-Y肽段,存在三股螺旋结构。通过对蕲蛇CⅡ与牛CⅡ进行蛋白质肽段质谱图分析对照后发现,两者具有相似肽段和CⅡ结构特征。以上鉴定表征结果证明采用酶解法提取蛋白为蕲蛇CⅡ,可为蕲蛇药材CⅡ的进一步药理研究提供实验基础。     

乌梢蛇的抗炎镇痛作用

目的:研究乌梢蛇提取液各部位的抗炎及镇痛作用,为乌梢蛇临床应用提供科学依据。方法:采用热板法、冰醋酸刺激致痛法研究乌梢蛇提取液各部位对小鼠痛阈的影响,利用二甲苯致小鼠耳廓炎症模型和腹腔染料渗出法测定乌梢蛇提取物的抗炎作用。结果:乌梢蛇提取物水溶性部位250mg/kg、375mg/kg能明显延长小鼠热板痛阈时间,减少醋酸致小鼠扭体次数,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致腹腔毛细血管通透性增高均有明显的抑制作用。结论:乌梢蛇提取物水溶性部位有一定的抗炎及镇痛作用。     

范永升教授运用黄芪桂枝五物法治疗风湿病学术经验

[目的]总结全国名中医范永升教授运用黄芪桂枝五物法治疗风湿病学术经验。[方法]通过跟诊学习、整理和分析范永升教授应用黄芪桂枝五物汤为基本方的临床医案总结范永升教授运用黄芪桂枝五物法治疗风湿病学术经验。[结果]范永升教授运用黄芪桂枝五物法治疗多种风湿病(系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、硬皮病、干燥综合征等),取黄芪桂枝五物汤益气温经通阳法,临床又根据实际情况灵活变通应用桂枝与白芍的用量及比例,桂枝用量多在6-12g之间,芍药用量多为30g,桂枝与芍药的比例为2:5~1:5,白芍用量多倍于桂枝。[结论]范永升教授运用黄芪桂枝五物法治疗风湿病首先体现了益气温阳、扶正固本的学术思想;同时将仲景“观其脉证,知犯何逆,随证治之”的原则灵活应用于风湿病的临床,体现了圆机活法的学术思想;再次衷中参西,将现代医学的研究成果为我所用,体现了博采众长、与时俱进的学术胸襟。     

高等中医药院校办学规模与特色的思考

<正>国内院校式中医药教育至今已经走过半个多世纪的历程。高等中医药院校教育取得了长足的发展,办学规模进一步扩大,人才培养层次不断提高,     

系统性红斑狼疮患者血清Ⅳ型胶原和层粘蛋白与疾病活动程度的相关分析

目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清中Ⅳ型胶原(Ⅳ.C)和层粘蛋白(LN)水平与疾病活动程度的相关性。方法 采用放射免疫法对42例SLE患者及20名正常对照组血清Ⅳ.C及LN含量进行了测定 ,并与作为疾病活动性指标的SLEDAI评分进行相关性分析。结果 SLE患者血清Ⅳ.C、LN水平明显高于正常对照组(P<0.01),血清Ⅳ.C、LN水平与SLEDAI评分呈显著正相关(P<0.05)。结论 Ⅳ.C、LN可能参与SLE的发病过程 ,并可作为SLE疾病活动程度的一个参考指标。     

氧化应激与实热“上火”的相关性研究

目的:通过检测观察组血液中过氧化指标(MDA、ROS)和抗氧化指标(GSH、T-AOC、SOD)的变化,探讨氧化应激与实热"上火"的相关性。方法:分别收集临床实热"上火"和正常人群的样本,检测其血浆中MDA、GSH、SOD、T-AOC水平和外周血白细胞中ROS含量,进行比较。结果:与对照组比较,观察组血浆中MDA、GSH、SOD、T-AOC浓度水平均升高,差异有统计学意义(P0.05),而白细胞内的ROS含量显著下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:观察组过氧化指标与抗氧化指标均有显著变化,说明实热"上火"与氧化应激密切相关,观察组机体处于过氧化与抗氧化相互交争状态,但氧化与抗氧化水平尚且处于平衡阶段。     

基于iTRAQ技术的中医实热“上火”血清蛋白质组学特征分析

目的:筛选实热"上火"血清差异表达蛋白,为实热"上火"机制的深入研究提供科学依据。方法:采用相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)对血清蛋白质进行检测,结合生物信息学分析(GO、STRING)筛选实热"上火"与正常非"上火"人群差异显著的蛋白质。结果:与正常对照组比较,实热上火组血清筛选出49个差异蛋白质,其中上调的22个,下调的27个。载脂蛋白C3(Apo C3)、乳酸脱氢酶(LDH)和维生素K依赖蛋白S(PROS1)等显著上调,而载脂蛋白A4(Apo A4)、超氧化物歧化酶3(SOD3)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)等显著下调。结论:观察组脂质代谢、糖酵解异常与氧化应激、炎性反应的发生密切相关,且凝血功能下降,易造成出血,筛选的差异蛋白可为实热"上火"的生物学基础研究提供依据。     

自制白及涂擦剂对上火模型——豚鼠口腔溃疡模型的影响

目的:观察自制白及涂擦剂对豚鼠口腔溃疡上火模型的影响。方法:采用30%冰醋酸溶液灼烧豚鼠右面颊黏膜建立口腔溃疡上火模型~([1]),将建模成功后的25只豚鼠分为对照组和西药观察组、中药观察组(中药A组、中药B组、中药C组),每组5只豚鼠,共5组,自制白及涂擦剂由白及粉、白蔹粉和丝瓜络浓煎剂组成。将涂擦剂涂在豚鼠口腔溃疡处,中药A组涂药1次/d、中药B组涂药2次/d、中药C组涂药3次/d;西药组涂金霉素眼膏2次/d,连续涂药5 d,对照组不给药;另设空白对照组豚鼠5只,涂自制白及涂擦剂,1次/d。观察不同剂量自制白及涂擦剂外用对豚鼠口腔溃疡模型溃疡面积变化、溃疡程度及溃疡局部病理组织学变化的影响。结果:用30%冰醋酸溶液造豚鼠口腔溃疡上火模型成功,与空白对照组比较,对照组口腔溃疡明显,且面积大,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,自制白及涂擦剂可显著减小口腔溃疡面积,差异有统计学意义(P0.01),显著减轻局部病理变化和口腔溃疡水肿程度,差异有统计学意义(P0.01,P0.05),且随着涂擦次数增多而依次减少。结论:自制白及涂擦剂对豚鼠口腔溃疡上火模型有较好的治疗作用。