携带泛素-HBcAg融合基因的慢病毒表达载体构建及其体外诱导小鼠髓源性树突状细胞成熟

目的构建携带泛素-HBcAg融合基因的慢病毒表达载体,包装成重组慢病毒并观察其体外诱导小鼠髓源性树突状细胞（DC）成熟。方法 PCR扩增Ub-HBcAg融合基因,插入到慢病毒骨架质粒pWPXLd中,构建重组质粒pW-Ub-HBcAg。将构建的重组慢病毒质粒pW-Ub-HBcAg和包装质粒psPAX2、包膜质粒PMD2.G用脂质体共同转染293T细胞,获得携带Ub-HBcAg基因的重组慢病毒LV-Ub-HBcAg,并检测其在293T细胞中的表达。体外分离培养小鼠髓源性DC,加入重组慢病毒,流式细胞仪测定DC表面分子表达,ELISA测定DC培养上清中IL-12分泌水平。结果强制泛素化HBcAg融合基因的慢病毒表达载体经测序证实目的基因序列及插入方向均正确,W estern b lot能检测到目的蛋白在293T细胞中的表达。LV-Ub-HBcAg能上调DC表面分子的表达（CD86、CD80、MHC-Ⅱ类分子）,并且能促进DC分泌IL-12（139.2±10.75）pg/mL,明显高于LV-HBcAg组分泌的量（P〈0.01）。结论成功构建了携带强制泛素化HBcAg融合基因的慢病毒,转染293T细胞后能够稳定表达目的基因,并且能诱导DC分化、成熟,上调表面共刺激分子的表达,促进IL-12因子的分泌。     

中枢神经系统感染160例临床分析

目的探讨各类中枢神经系统感染的临床特点及治疗方法。方法对我院收治的中枢神经系统感染160例的临床资料进行回顾性分析。结果本组诊断为病毒性脑炎(病脑)80例,化脓性脑膜炎(化脑)37例,结核性脑膜炎(结脑)35例,隐球菌性脑膜炎(隐脑)8例。全部予甘露醇、甘油果糖脱水降颅压及对症治疗,其中148例治疗有效,复查脑脊液示化脑、病脑患者脑脊液均恢复正常;结脑患者脑脊液明显好转,糖基本恢复正常;隐脑患者脑脊液3次墨汁涂片检查(-),糖、氯化物基本正常,脑脊液真菌培养(-),乳胶凝集试验效价明显下降(1∶8~1∶320)。148例病情好转出院,其中10例遗留颅神经损害和脑积水;12例死亡,病死率7.5%。结论中枢神经系统感染需结合临床表现、脑脊液检查和治疗效果综合进行诊断,对疑似中枢神经系统感染但不能确诊者,可予诊断性治疗,以免延误最佳治疗时机。     

耐氯喹脑型恶性疟一例

患者 ,男 ,因发热 5d ,乏力、腹泻 4d伴尿黄于 2 0 0 3年8月 31日入院。患者于入院前 5d无明显诱因下发热 ,最高达 39.6°C ,伴畏寒 ,无寒战 ,无盛汗热退。发热同时伴乏力 ,纳差 ,尿黄 ,腹泻 ,每日 3～ 4次 ,稀水样便 ,无脓血或黏液 ,无里急后重感。有中上腹疼痛及腰背部放射痛。急诊查血常规、胸片、血及尿淀粉酶正常 ,丙氨酸转氨酶 (ALT)133U/L ,总胆红素 (SB T) 16 7μmol/L ,直接胆红素 (SB D)未查。B超示脂肪肝、脾肿大。门诊拟“病毒性肝炎”收入院。患者入院前 1月至非洲出差 ,回沪后 18d出现发热。入院体检 :神清 ,巩膜中度黄…     

肿瘤坏死因子受体相关死亡域蛋白在暴发型肝衰竭肝组织中的表达

目的研究肿瘤坏死因子受体相关死亡域蛋白(TRADD)在暴发性肝衰竭小鼠动物模型肝组织中的表达、分布及在发病机制中的作用.方法尾静脉注射肿瘤坏死因子α(TNFα)于D-氨基半乳糖(GalN)致敏的BALB/c小鼠,造成暴发性肝衰竭模型,用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口原位末端标记(ISEL)技术、琼脂糖凝胶电泳检测肝组织DNA梯带观察肝细胞凋亡,Envision两步免疫组织化学方法检测TRADD蛋白在肝组织中的表达及分布.结果对照组、GalN组和TNFα组肝细胞各时点基本没有或有少量TRADD蛋白表达,而GalN+TNFα组在3.5h时点就有明显表达,此时肝细胞凋亡不明显,6h时点TRADD蛋白表达最为明显,9h时点,肝细胞凋亡和坏死非常明显,而TRADD蛋白表达虽然很明显,但低于6h时点.TRADD蛋白阳性率分别为1.3%(1.5h)、3.0%(3.5h)、23.4%(6h)和18.6%(9h).结论TNFα介导的小鼠暴发性肝衰竭动物模型中,TRADD蛋白表达增加,TRADD蛋白表达先于肝细胞凋亡,TRADD蛋白表达和肝细胞凋亡在一定程度上呈正相关,提示TNFα通过上调TRADD蛋白表达介导肝细胞凋亡和坏死进而诱发暴发性肝衰竭.     

新型隐球菌脑膜炎21例分析

目的了解新型隐球菌脑膜炎(CM)的临床特点,探讨其治疗进展。方法对21例CM患者的临床资料进行回顾性总结分析。结果 21例患者均有头痛,发热,脑脊液乳胶凝集试验阳性。应用两性霉素B联合氟康唑、5-氟胞嘧啶(5-Fc)治疗,治愈好转率71.42%(15/11)。结论 CM误诊率高,脑脊液乳胶凝集试验有利于早期确诊,减少误诊率;两性霉素B、氟康唑、5-氟胞嘧啶(5-Fc)是有效的治疗药物,新型抗真菌药物机制有待研究。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎致HBV变异并病情加重一例

患者男性 ,30岁 ,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ阳性 4年。 1999年 10月因乏力、纳差、肝区不适住院。入院体检 :一般情况良好 ,肝脾不肿大 ,无肝掌、蜘蛛痣。除ＡＬＴ 10 3Ｕ/Ｌ外 ,ＴＢｉｌ、白/球蛋白比例、ＰＴ、ＨＡ、胆汁酸和ＬＮ均正常 ,肝组织活检显示为 :Ｇ1、Ｓ1。免疫荧光双标记法血液定量检测ＨＢＶＤＮＡ为3 .0 4× 10 -9ｇ/ｍｌ(阈值 <4× 10 -14 ｇ/ｍｌ)。服用拉米夫定10 0ｍｇ/ｄ ,2周后复查ＨＢＶＤＮＡ为 4× 10 -14 ｇ/ｍｌ ,4周后ＡＬＴ正常。用药 7个月时ＨＢＶＤＮＡ为 1.8× 10 -13ｇ/ｍｌ,肝功能正常。但用…     

严防“虫”从口入

“虫”从口入，说的是食源性寄生虫病。这一般是人们吃了生鲜（或未经彻底加热）的含有寄生虫虫卵或幼虫的食品而感染的一类疾病总称。     

IL-21在急性乙型肝炎中的表达与临床意义

目的 探讨急性乙型肝炎(AHB)血清IL-21水平变化与肝功能各项参数、HBV血清标志物及HBV-DNA的关系,研究IL-21在AHB发病中的作用.方法 双抗体夹心ELISA法检测44例AHB患者和20例正常对照者血清中IL-21的水平,动态随访AHB患者血清IL-21变化,分析血清IL-21与HBV-DNA、HBV血清标志物、肝功能各项参数等指标的相关性.结果 AHB患者血清IL-21水平显著高于正常对照组(P＜0.01);AHB患者血清IL-21水平随着转氨酶的下降而下降;AHB患者血清IL-21水平与HBsAg转阴所需时间呈负相关(r=-0.616,P＜0.01);AHB患者血清IL-21水平与HBV-DNA水平无相关性(r=0.128,P＞0.05).结论 IL-21与急性HBV感染导致的肝脏炎症密切相关,并可能参与急性HBV感染的免疫应答,促进机体对HBV的清除.     

利奈唑胺治疗耐青霉素葡萄球菌感染

目的 探讨利奈唑胺对耐青霉素葡萄球菌感染的临床治疗效果.方法 对4例耐青霉素葡萄球菌感染患者应用利奈唑胺治疗10～21 d,观察临床症状、体征和实验室检查的变化,以及相应的副反应情况.结果 4例患者在应用利奈唑胺后,不同时问症状、体征和实验室检查均出现明显改善,无明显不良反应发生.结论 利奈唑胺用于治疗葡萄球菌感染具有较好的疗效、耐受性和安全性.