柱切换HPLC法测定豚鼠体内诺氟沙星银解离物诺氟沙星的浓度

用柱切换HPLC法建立了豚鼠血浆和皮下组织液中诺氟沙星银体内主要解离物诺氟沙星的测定方法。预处理柱为μ-BondapakC₁₈,37～50μm,50mm×5mmID;分析柱为YWG-C₁₈,10μm,150mm×5mmID。预处理流动相为0.008mo1/L磷酸缓冲液,流速为3ml/min;分析流动相为甲醇—0.008mol/L磷酸缓冲液—0.05mol/L四丁基溴化铵(25:75:4)。紫外检测波长为280nm。皮下组织液及血浆中的线性范围分别为100～3200ng/ml(r=0.9999)和2～128μg/ml(r=0.9999);最低检测浓度分别为10ng/ml和0.25μg/ml,方法的平均回收率为102%,日内及日间偏差均小于7%。     

胆龙定喘胶囊的镇咳、化痰、平喘及对慢支模型病理作用的药效学研究

胆龙定喘胶囊的镇咳、化痰、平喘及对慢支模型病理作用的药效学研究徐立然，程民，张金楠，袁效涵河南省中医药研究院（４５０００４）蒋士卿，苗明三，谢有良河南中医学院（４５０００３）主题词胆龙定喘胶囊／药效学，动物，小鼠，大鼠慢性支气管炎是一种常见的疾病，其...     

尿液巯基化合物检测在筛查子宫颈癌及癌前病变中的临床价值

目的探讨尿液巯基化合物检测作为子宫颈癌早期筛查手段的可行性。方法收集144例就诊者尿液作为对照组,其中包括健康体检结果正常人员104例、阴道炎患者20例、人乳头瘤病毒(HPV)感染者20例;确诊子宫颈癌等妇科肿瘤患者的尿液标本107例作为研究组。取1 m L新鲜尿液作为标本,使用化学显色法对标本进行巯基化合物含量检测,并以宫颈活检的组织病理学为金标准,评价尿液中巯基含量检测在子宫颈癌筛查中的临床价值。结果在研究组中阳性反应有98例,阳性率为91.6%;健康对照组中人员无阳性反应;阴道炎患者阳性反应有5例,阳性率为25%;HPV感染者阳性反应有12例,阳性率为60%;研究组与健康对照组之间尿液巯基检测阳性率差异有统计学意义(P0.01)。结论尿液中巯基化合物检测对子宫颈癌及癌前病变筛查具有较高的敏感度,该方法简便、快速,适用于子宫颈癌的早期筛查。     

共生菌对荷瘤小鼠肺泡巨噬细胞基因表达的调控作用

目的探讨共生菌群对荷瘤小鼠肺泡巨噬细胞(AM)基因表达的调控作用。方法分离纯化共生菌缺失的荷瘤小鼠及共生菌正常的荷瘤小鼠AM,利用基因芯片技术筛选差异表达的基因并进行生物信息学分析。结果分选后的AM细胞纯度可达98%,共生菌缺失荷瘤小鼠与正常荷瘤小鼠相比较,AM细胞中差异性表达基因共有353个(变化倍数≥2),上调基因171个,下调基因182个;差异表达基因的基因分类(GO)主要为细胞凋亡、细胞增殖、细胞分化、信号传导、血管生成等;KEGG通路主要为氮素代谢、趋化因子信号、TGF-β信号及肿瘤通路等;M2型巨噬细胞特异性基因CCL24、Arg1、Retnla及IL-13等在共生菌缺失荷瘤小鼠AM细胞中表达上调。结论共生菌可以调控荷瘤小鼠AM细胞的基因表达,包括CCL24、Arg1、Retnla及IL-13等基因,差异表达基因与多个GO分类和KEGG通路密切相关。     

细胞因子诱导的杀伤细胞基本特性及抗肿瘤效应研究

目的建立培养细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞方法,并评价其基本特点、体内外抗肿瘤活性及安全性。方法使用抗CD3单克隆抗体、rhIL-2及rhIFN-γ刺激PBMC细胞,使其在体外大量扩增,利用流式细胞术、体外杀伤实验及荷人卵巢癌小鼠模型检测CIK细胞的特点及抗肿瘤活性;并检测CIK细胞中外源性因子污染情况及其急性毒性作用。结果体外培养21 d后,CIK细胞总数可达1010以上,其主要成分为CD3+CD8+T细胞及CD3+CD56+NKT细胞,CIK细胞在体外对Ho8910、A549、K562及HepG2细胞均有较高的杀伤活性,并对荷瘤小鼠具有治疗作用。同时在CIK细胞中未检测到外源性病原体污染。结论 CIK细胞在体内外均具有较高的抗肿瘤活性且无毒性作用。     

HPLC法测定酚酞含片的含量

目的建立高效液相色谱测定酚酞含片中酚酞含量的方法。方法色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(60∶40)为流动相;检测波长为275 nm。结果线性关系为Y=47.5392X-21.5621,r=0.9999,线性范围在10.03~401.2μg,平均回收率100.1%(n=6),RSD=0.43%。结论本法操作简便准确,可作为酚酞含片中酚酞含量的质量控制方法。     

羟丙基β-环糊精对伏立康唑增溶作用的研究

目的 研究羟丙基β-环糊精对伏立康唑增溶作用,为注射用伏立康唑的制剂加工提供依据.方法 采用相溶解度法研究羟丙基β-环糊精对伏立康唑的包合作用,依据相溶解曲线考察羟丙基β-环糊精对伏立康唑增溶作用,进而测定其包络常数.结果 伏立康唑被羟丙基β-环糊精包合后,其溶解度大大提高,溶解度随羟丙基β-环糊精浓度的增加而增加,两者之间呈良好的线性关系;包合物的组成比基本呈1:1关系,包络常数约为311.1 mol·L-1.结论 羟丙基β-环糊精对伏立康唑具有较强的增溶作用,是制备注射用伏立康唑的有效方法之一.     

我市药品不良反应监测工作开展现状与建议

药品能治病但也可能有有害的反应,我们常常把这类有害的反应叫药品不良反应(ADR),即合格药品在正常用法用量下出现的与用药目的无关的或意外的有害反应[1]. 不良反应监测工作是食品药品监督管理工作的重要组成部分,是食品药品监督管理部门和卫生行政部门保证公众用药安全、促进合理用药的重要职责,它是关系到广大人民群众用药用械安全和健康的重大社会问题,因而做好不良反应监测工作对保障社会稳定、促进经济发展具有非常重要的意义,同时也是"三个代表"重要思想在食品药品监管工作中的具体实践.我市ADR监测工作起步于04年,3年来,在上级领导的支持与关怀下,在社会公众关注的目光中,ADR监测工作稳步推进,取得可喜成绩,但同时也存在一些问题,本文就我市ADR监测现状和存在问题谈几点看法.     

胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型的建立与应用

目的建立低分化高转移性胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型,并观察该移植瘤对抗癌药物的敏感性。方法 5×106个MKN-45胃癌细胞接种于裸鼠右侧胁部脂肪垫下,观察成瘤情况。接种2周后,分别将荷瘤小鼠分为生理盐水对照组与化疗药物组,其中化疗药物组给予1 mg·kg-1紫杉醇与5 mg·kg-1氟尿嘧啶,1周1次,连续3周;生理盐水对照组则给予生理盐水。实验结束后采用HE染色观察移植瘤病理组织学特点,采用免疫组化法检测移植瘤的核增殖抗原Ki-67与波形蛋白(vim-entin)及钙黏蛋白(E-cadherin)表达情况。结果接种的12只裸鼠均荷瘤成功,且移植瘤成瘤时间早,肿瘤大小及形状较一致,并保持了原发肿瘤vimentin高表达与E-cadherin低表达等重要的生物学特征。使用临床抗癌药物紫杉醇与氟尿嘧啶联合处理3周,结果与生理盐水对照组相比,化疗组肿瘤生长速度明显放缓,肿瘤体积明显缩小,肿瘤组织Ki-67表达下降,新生血管减少,肿瘤细胞凋亡明显,但vimentin与E-cadherin表达变化不明显。结论胃癌细胞株MKN-45裸鼠移植瘤模型建立成功,为开展胃癌发病机制及治疗药物药理作用等研究提供了理想的实验平台。     

肿瘤干细胞在食管癌放射线抵抗中的作用及分子机制研究

目的：探究肿瘤干细胞在食管癌放射线抵抗中的作用及其分子机理,为食管癌的放疗提供理论参考。方法采用8 GyX线照射食管癌细胞系TE1,建立并筛选出放射线抵抗的食管癌细胞系TE1－res。利用细胞计数法比较增殖情况,采用流式细胞术比较CD44（ high） CD24（－） CD133（＋）分子表达及其凋亡情况,克隆形成实验比较克隆形成率及细胞存活曲线,BSP方法比较抑癌基因甲基化程度。成组t 检验或方差分析差异。结果 TE1－res 细胞比 TE1细胞增殖能力增强（平均值20．84×105∶4．46×105／d,P＝0．008）,CD44（high） CD24（－）CD133（＋）细胞比例升高[（38．0±2．9）％∶（10．1±1．3）％,P＝0．001],抗凋亡能力增强（平均值33．23％∶10．50％,P＝0．003）,8 Gy照射后克隆形成率升高[（14．3±2．6）％∶（0．9±0．3）％,P＝0．011],D0值升高（3．28 Gy ∶2．19 Gy,P＝0．125）, SPINT2、CDKN1B、DKK1、TP53、PPP2R1B抑癌基因启动子区甲基化水平升高[（89．7±4．9）％∶（5．0±0．5）％（P＝0．001）、（92．3±4．7）％∶（10．4±0．7）％（P＝0．001）、（90．7±3．7）％∶（7．9±0．4）％（P＝0．001）、（83．4±5．7）％∶（17．2±1．2）％（P＝0．002）、（90．2±6．7）％∶（4．4±1．2）％（P＝0．002）]。结论肿瘤干细胞在食管癌放射线抵抗中具有重要作用,放射线抵抗与SPINT2、CDKN1B、DKK1、TP53及PPP2R1B等抑癌基因启动子区的高甲基化水平密切相关。