守宫木细胞与遗传毒性实验研究

目的：以体外试验研究野生蔬菜守宫木的细胞毒性和遗传毒性。方法：生（Ⅰ）和煮熟（Ⅱ）的守宫木匀浆液分别以40000、20000、10000、5000、2500、1250μg／ml浓度对CHL细胞染毒，每一浓度分别在24、48和72h时间点以中性红摄入方法对守宫木的细胞毒性进行评定；体外染色体畸变试验则以同样的浓度分别以生和煮熟的守宫木匀浆液染毒2h后，收获细胞制备中期相，对染色体结构畸变进行分析。结果：中性红摄入细胞毒性试验：在生的与煮熟的守宫木匀浆液细胞毒性剂量效应关系分析中，低剂量组随着染毒浓度加大细胞毒性增强，而在较高剂量组则出现随染毒浓度加大细胞毒性减弱，20000和40000μg／ml剂量组出现细胞的增殖现象；时间效应分析中有和剂量效应分析相似的现象，即在低剂量组随着染毒时间的延长细胞毒性增强，而从10000μg/ml剂量组开始随着染度时间的延长细胞毒性减弱并出现细胞的增殖现象；对生的与煮熟的守宫木细胞毒性进行比较分析，仅在染毒24h的20000μg／ml剂量组发现煮熟的守宫木匀浆液的细胞毒性有统计学意义（P〈0．05）地高于生的守宫木匀浆液。体外染色体畸变试验结果阴性。结论：守宫木在一定浓度范围内对细胞溶酶体和高尔基体有一定的损伤作用，未观察到守宫木对细胞的遗传物质染色体有损害作用，未发现不同的食用习惯对守宫木的毒性有影响。     

应用寡核苷酸探针膜杂交方法快速检测耐异烟肼结核分支杆菌基因型

目的应用寡核苷酸探针膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌对异烟肼(isoniazid,INH)耐药性.方法设计与合成用于检测结核分支杆菌耐INH基因katG、inhA的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分支杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(Polymerase chain reaction-Single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-direct sequencing,PCR-DS)结果比较.结果 20株INH敏感株中,仅9株出现野生型探针K1阳性杂交,余11株中,10株K1b'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→ACC,1株K1c'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→AAC;15株出现野生型探针inh1阳性杂交,另5株Inha1探针杂交阳性,PCR-DS显示inhA基因-15位C→T突变.36株耐药株中,17株K1探针杂交阳性,18株K1b'杂交阳性,1株与所试探针不杂交,PCR-DS显示katG基因279位密码子GGC→GAC;11株与突变型Inha1探针阳性杂交,25株与野生型探针inh1杂交阳性.katG基因膜杂交突变检出率为 50 %,inhA基因膜杂交突变检出率为 30.56 %.结论寡核苷酸探针膜杂交技术可能成为检测部分结核分支杆菌耐异烟肼基因型简便、快速的方法.     

多菌灵在人参生长期的残留动态研究

目的研究种植人参生长期施用多菌灵后,农药在人参叶、茎与根部的动态降解试验及人参药材中的残留情况。方法采用HPLC法测定试验期所采集的样品中多菌灵农药的量。结果将数据进行回归处理,Y=-0.1207X 5.1424,r=0.974(多菌灵0.5%);Y=-0.106X 4.3275,r=0.973(多菌灵0.2%),半衰期分别为多菌灵0.5%为6.61d,多菌灵0.2%为5.94d。结论多菌灵在人参茎叶中的动态曲线符合直线方程lnC=lnC0-kt,人参根部的多菌灵农药动态降解在15~20d内已全部降解。     

头孢他啶对大鼠体内氨茶碱药动学的影响

目的通过检测茶碱在大鼠体内的血药浓度，分析头孢他啶对氨茶碱药动学参数的影响。方法12只大鼠随机分为两组，每组6只，给药前禁食12 h，对照组每只动物分别给予氨茶碱18 mg·kg^-1，灌胃1次。实验组给予氨茶碱18 mg·kg^-1，ig，并肌内注射头孢他啶100 mg·kg^-1，分别在给药前及给药后0.08，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，12.00 h采血0.3～0.5 mL，置不抗凝离心试管内，离心(10 000 r·min^-1)，取血清60 μL，用全自动荧光偏振免疫分析仪测茶碱血药浓度。结果茶碱以一室药动学模型消除，头孢他啶与氨茶碱合用与单用氨茶碱比较，药动学参数无明显变化。结论头孢他啶在大鼠体内对氨茶碱药动学无显著影响。     

斑秃患者皮损处T淋巴细胞表型的研究及Fas的表达

目的　研究斑秃患者皮损处浸润T淋巴细胞的表型及Fas的表达情况。方法　应用免疫组织化学技术检测斑秃患者皮损处CD4和CD8T淋巴细胞及Fas的表达。结果　CD4和CD8:活动期和稳定期斑秃患者皮损处无论是毛囊周围还是血管周围CD4T淋巴细胞浸润数量均明显多于CD8T淋巴细胞 (P <0 .0 5 ) ;斑秃活动期的CD4和CD8T淋巴细胞浸润数量与稳定期和对照组相比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。Fas :与对照组相比较 ,斑秃患者皮损处毛囊角质形成细胞Fas的表达例数较多 (P <0 .0 5 )。结论　斑秃患者皮损处浸润T淋巴细胞以CD4T细胞占优势 ;Fas在斑秃皮损处毛囊角质形成细胞异常表达。     

乳酸杆菌活菌制剂治疗滴虫性阴道炎的临床研究

滴虫性阴道炎是育龄期妇女的常见病、多发病,与阴道微生态环境改变有关。乳酸杆菌活菌制剂可调节阴道酸性环境及微生态平衡,可作为治疗和预防阴道炎的有效手段之一。本研究使用深圳市万泽医药有限公司生产的乳酸杆菌活菌制剂(定君生)观察评价其治疗滴虫性阴道炎的效果。1资料与     

反相HPLC法测定马钱子中士的宁和马钱子碱的含量

建立反相高效液相色谱法测定马钱子中士的宁和马钱子碱的方法.色谱柱为Diammsil C18柱,以10mmol·L-1庚烷磺酸钠与20mmol·L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值为2.8)-乙腈(79∶21)作为流动相,检测波长260nm;马钱子样品采用碱化后以氯仿回流提取.线性范围士的宁为0.4392～2.196μg、马钱子碱为0.3936～1.9680μg,士的宁回收率为100.90%,RSD为2.32%,马钱子碱回收率为102.57%,RSD为2.48%.本方法快速、准确、重现性好,可用于马钱子的质量控制.     

盐酸乙基吗啡滴眼液含量测定方法的改进

目的 寻找一种快速测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量测定方法、方法利用自动旋光仪测定盐酸乙基吗啡的含量。结果在20～25℃下，4～20mg／mL范围内，其浓度与旋光度呈现良好的线性关系、r=0．9999，RSD：1．33％，n=8。结论用旋光法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量，其方法快速；住确，明显优于酸碱滴定法，适用于医院制剂的含量快速分析.     

分枝杆菌菌种鉴定DNA微阵列的初步研究与应用

目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列。方法根据19种分枝杆菌标准株的16SRNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物。结果该DNA微阵列与9种非分枝杆菌标准株不杂交,具有分枝杆菌特异性;可将19种分枝杆菌标准株鉴定到群或种,具有较高的分枝杆菌种特异性。应用PCR-SSCP分枝杆菌初步菌种鉴定方法对31株分枝杆菌临床分离株进行初步的鉴定,9株为结核分枝杆菌复合群和22株为非结核分枝杆菌。应用DNA微阵列进一步进行菌种鉴定,9株与探针a杂交阳性,为结核分枝杆菌复合群;2株与探针c杂交阳性,为胞内分枝杆菌;8株与探针d杂交阳性,为堪萨斯分枝杆菌或瘰疬分枝杆菌或猿猴分枝杆菌或胃分枝杆菌;1株与探针k杂交阳性,为戈登分枝杆菌;2株与探针p杂交阳性,为龟分枝杆菌脓肿亚种;2株与探针r杂交阳性,为偶然分枝杆菌;1株与探针s杂交阳性,为草分枝杆菌;2株与探针a和p杂交阳性,为结核分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种复合感染株;1株与探针a和r杂交阳性,为结核分枝杆菌和偶然分枝杆菌复合感染株;3株与该芯片杂交阴性。2株临床分离株经基因测序也证实DNA微阵列鉴定的特异性。结论该DNA微阵列有可能简便、快速、准确地     

医院内深部真菌感染的前瞻性调查

目的　了解目标人群医院内真菌感染的危险因素、发病率和疾病谱。方法　对 1997年 10月～ 1999年 12月间在我院部分病房住院治疗的患者的医院内真菌感染进行前瞻性调查、分析 ,对分离到的其中 5 6株白色念珠菌进行药敏试验。结果　医院感染和医院内真菌感染的发病率分别为 12 .3%和 2 .5 7% ,医院内真菌感染的主要部位分别是口腔 ( 39.5 1% )、下呼吸道 ( 34.5 7% )和尿路 ( 17.2 8% ) ,主要的真菌为念珠菌 ( 90 .6 2 % ) ;医院内真菌感染的发生与免疫抑制剂治疗、多种广谱抗生素的使用 ( >3种 )、气管切开或插管、昏迷 ( >3d)、年龄≥ 6 5岁、留置导尿、恶性肿瘤性疾病等有关 ;白色念珠菌对两性霉素 B、氟康唑、氟胞嘧啶和伊曲康唑的敏感性分别为 10 0 %、94 .6 %、92 .86 %和 5 7.1%。结论　接受免疫抑制剂和多种广谱抗生素治疗、昏迷、体内留置导管的患者易发生医院内真菌感染 ;白色念珠菌仍是医院内真菌感染的主要病原 ;药敏试验表明 ,白色念珠菌对两性霉素 B、氟康唑、5 - FC高度敏感 ,而对伊曲康唑的敏感性较差