TRAIL胸外段基因克隆及其表达与纯化

目的；克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因（the extracellular region of the human TRAIL cDNA,TPAILex），构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段。方法：抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞，用RT－PCR、巢式－PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段cDNA，并克隆到pGEM-T Easy载体中，DNA测序鉴定，将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T，构建重组表达质粒pGEX/TRAILex，用IPTG诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段，GST－Agarose 4B层析柱纯化GST－TRAILex融合蛋白，Western-blot鉴定纯化产物。结果：抗CD3 McAb能诱导正常人外周血核细胞TRAIL的高表达，成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因，构建了重组表达载体pGEX/TRAILex，IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段，经12％SDS－PAGE分析，可观察到一分子量和理论值相符（约54kD）的诱导表达。Kodak软件分析表达GST－TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28％，进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达，用GST－Agarose 4B层析柱纯化超声破菌后的上清，每升细菌培养液可得到9.8mg纯度的95％以上的GST－Tex。Western-blot结果证实54kD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应。结论：成功地克隆了人TRAIL基因，并应用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人TRAIL蛋白的胞膜外段，为进一步研究TRAIL的功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。     

双头数片机介绍

本数片机是采用双回转盘式数片或数丸、装瓶,生产率高。更换不同孔径的数片盘可以对不同大小、粒数、糖衣或非糖衣的片药、丸药进行自动数片、装瓶及送瓶,适用范围广。数片机是制药包装自动化不可缺少的重要设备。     

颈丛神经麻醉并发喉返神经阻滞、呼吸困难一例

病例报告:患者女性,30岁。诊断为左侧甲状腺瘤,拟行手术治疗。术前查体无特殊。三大常规检查,胸透、ECG 均正常。术前肌注东茛菪碱0.3mg、鲁米那钠0.1。患者入手术室后,血压120/90,心率90次,按 Winnir 氏介绍的方法,施行颈深丛神经阻滞,每侧分别注射1.3%利多卡因10ml。约完成阻滞10分钟后,患者出现声嘶,并诉胸闷、气憋,用面罩给氧继续观察。3分钟后出现呼吸困难伴明显的三凹征,紫绀,同     

单侧单睑重睑术186例体会

我国汉族人群中,一侧眼为单睑,另一侧眼为重睑的发生率约为6.52%[1]。本文就生理性单眼单睑的分型及重睑术进行探讨,而烧伤、外伤或感染等外来因     

儿童颅脑损伤158例临床救治体会

儿童颅脑损伤是常见外伤性疾病，由于小儿生理特点，临床表现与成年人不一致，易造成误诊，延误诊断和抢救。我院2002年5月-2005年11月共收治小儿颅脑损伤158例，报告如下。     

《山东医药》杂志被美国《化学文摘》列为来源期刊

宫颈糜烂是女性生殖器炎症，常伴有阴道分泌物增多、腰骶部疼痛、下腹坠痛、接触性出血等症状，严重者可致不孕。炎症长期刺激可增加宫颈癌的发病率，因此应积极治疗。2005-2006年，我们用安达芬栓治疗宫颈糜烂，取得明显疗效。现报告如下。     

经肛管肌鞘内巨结肠根治术后远端狭窄病因分析

目的 探讨经肛管肌鞘内巨结肠根治术后远端狭窄的并发症的原因及防治。方法 回顾性分析本院自1998年2月至今采用的经肌管肌鞘内巨结肠根治术41例。结果 本组发生远端狭窄并发症的7例，占17.1%，其中吻合口狭窄3例，吻合口上端肌鞘狭窄2例，结肠扭转性狭窄1例，吻合口结肠回缩瘢痕性狭窄1例。结论 经肛管肌鞘内巨结肠根治术是目前公认的疗效满意的术式，但仍存远端狭窄、梗阻等并发症，只要处理恰当，可以尽量避免和减少该并发症的发生。     

209例鼻窦炎鼻息肉患者手术治疗术中出血量的相关因素分析

慢性鼻窦炎鼻息肉是耳鼻咽喉科常见疾病.手术是其有效治疗手段之一.手术方式有传统的柯-陆氏手术及近年来迅速发展的鼻窦内镜手术.手术中出血一直是困扰手术医师的问题之一,尤其在鼻腔、鼻窦手术中,因视野狭小、手术位置深、操作空间小而更易出血.     

肝局灶性结节增生1例

1临床资料 患者男,22岁.入伍查体时B超检查发现肝左叶实性占位.体检上腹部无压痛及反跳痛. CT:螺旋CT平扫于肝左内叶近膈面处,下腔静脉前方见一直径约6.5 cm略低密度病灶,密度较均匀.CT值约55HU,边缘清晰光滑.增强早期病灶明显强化,CT值约128HU,边缘较清,延迟约1 min后肿块密度明显降低,与邻近肝实质密度相同,周围显示"包膜征".(图1、2)     

脉冲激光治疗血管性疾病所致瘢痕形成的原因分析

我们科室从1999年3月至2001年8月应用固体脉冲激光仪治疗皮肤血管性疾病482例患者，除16例患者治疗部位形成瘢痕外，其余均取得满意的疗效，现将16例患者瘢痕形成的原因分析如下。