人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控表达

人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控高效表达 ,采用RT PCR技术从人肝脏组织总RNA中扩增谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列 ,将其插入到原核温控表达载体pBV2 2 0多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定 ,并进行了温控表达 ,表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1基因克隆到原核表达载体pBV2 2 0中 ,测序结果同Genbank中的人谷胱甘肽硫转移酶M基因序列比较 ,在 619位点C→A ,氨基酸由Pro→Thr,在 5 2 8位点C→T ,编码氨基酸仍为Asp。通过温控诱导 ,在 2 8kDa的表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1原核温控表达载体pBV2 2 0的构建 ,为毒理学、遗传药理学的研究提供了应用基础     

用间接萤光检查与非甲、非乙型肝炎有关的抗原—抗体系统

用病人血清或先前接种了病人血清的黑猩猩的血清接种,十只黑猩猩感染了非甲、非乙型肝炎。在间接萤光试验(IF)中,其中一只黑猩猩的恢复期血消同自身的肝活检标本以及其余黑猩猩中8只的标本切片的肝细胞核超反应。同样,和一恢期病人血清起反应。这些阳性血清不和未感染的黑猩猩的肝切片起反应。未感染或已有抗甲型或乙型肝炎抗原的抗体的黑猩猩血清同阳性肝切片无反应。这些对照的结果暗示,查到的抗原—抗体系统对非甲、非乙型肝炎有特异性。     

保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶高产株的筛选

目的：鉴定和筛选β-半乳糖苷酶高产酶保加利亚乳杆菌。方法：采用涂片染色和形态特征观察。鉴别生化试验，（如过氧化氢酶试验，碳水化合物发酵产酸试验及牛奶石蕊试验）对购买的保加利亚乳杆菌1.1480，保加利亚乳杆菌6032和从酸奶中分离的保加利亚乳杆菌进行鉴定；采用X-gal定性试验和ONPG定量试验对酶活性进行测定以筛选高产酶菌株。结果：（1）保加利亚乳杆菌1.1480和从酸奶中分离的保加利亚乳杆菌均为保加利亚乳杆菌，保加利亚乳杆菌6032已发生变种。（2）保加利亚乳杆菌1.1480和从酸奶中分离的保加利亚乳杆菌均可在含有X-gal和IPTG琼脂培养基上产生蓝色菌落。进一步的定量试验表明保加利亚乳杆菌1.1480比从酸奶中分离的保加利亚乳杆菌酶活性高。结论：从酸奶中分离的保加利亚乳杆菌在作为酸奶菌种的过程中可能被人工训化；保加利亚乳杆菌1.1480的特性与伯杰手册第八版中描述的完全一致，且产酶量最高。     

WD复合碘的研究——Ⅰ.WD复合碘杀菌效果的实验研究

WD复合碘是我们研制成功的一种新型碘伏类消毒剂。本品含有效碘6.25ppm的溶液,对金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)和大肠杆菌(8099)作用5分钟杀灭率均达到100％;含有效碘125ppm和500ppm的WD复合碘溶液对蜡状杆菌芽胞(4001)和枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC 9372)作用10分钟杀灭率分别为99.9992％和99.9940％;含有效碘500ppm的溶液对纯化HBsAg作用10分钟,破坏率达100％。本品在室温下避光密闭保存2年,有效碘无明显下降。     

三种常用过氧乙酸稳定剂稳定作用的研究

本文报道在实验室合成的过氧乙酸原液中分别加入0.1％(W/V)8-羟基喹啉,0.5％(V/V)磷酸和0.5％(W/V)焦磷酸钠作稳定剂。通过一年左右贮存和定期测定过氧乙酸百分含量;并作了不同含量磷酸以及0.5％(V/V)磷酸对用不同配方配制的过氧乙酸的稳定性的研究。结果表明,0.1％、0.3％和0.5％(V/V)的磷酸以及0.5％(W/V)焦磷酸钠对过氧乙酸原液均无稳定作用。故认为,贮存过氧乙酸原液不宜以磷酸或焦磷酸钠作稳定剂。     

醋酸洗必泰手消毒液的研制及稳定性考察

本文对不同浓度的醋酸洗必泰消毒液进行了杀菌试验比较,结果显示0.02%的醋酸洗必泰消毒液即能有效地杀灭各种试验指示菌,用于临床外科手消毒效果满意。作者还对该消毒液在室温下留样观察了三年,结果表明其含量、PH 等均无明显变化,说明该制剂理化性质稳定,是较为理想的外科手消毒液。     

非融合表达β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌的构建和性能研究

目的 构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究.方法 提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ 1.1480和pMG36e-lacZ wch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MGl363.测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率.结果 携带pMG36e-lacZ wch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mg pro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24 h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20 g/L乳糖时,分泌率最高,达(27.09±0.05)%.结论 获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体.     

人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统的构建及序列分析

目的 构建人谷肽甘肽硫转移酶A1真核表达系统，为毒理学、遗传药理学的研究等提供材料。方法 用RT—PCR技术从人肝脏组织总RNA中分离扩增人谷胸甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列，将其插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点中，构建重组表达质粒，并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果 人谷胱甘肽硫转移酶A1被正确地克隆到真核表达载体pcDNA3中，测序结果同Genbank序列比较，在152位点T→C，氨基酸由Met→Thr。结论 经酶切鉴定和PCR扩增，证实人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统构建成功。     

人GSTM1TV2基因的克隆及温控表达

目的 克隆人GSTMlTV2基因并在大肠杆菌的温控高效表达。方法 用RT-PCR技术从人肺组织总RNA中分离扩增人GSTMlTV2基因的cDNA序列，将其插入到原核温控表达载体pBV220多克隆位点中，构建重组表达质粒，并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定，并进行了温控表达。结果 人GSTMlTV2克隆到原核表达载体pBV220中，测序结果同Genbank序列比较，完全一致。通过温控诱导，在26kDa的表达量约达到33％。结论 pBV220-GSTMlTV2原核温控表达载体的构建，为毒理学、遗传药理学的研究提供应用基础。     

消毒效果评价中指示病毒的应用

1选择指示病毒的意义 本文所指的指示病毒足指在消毒和灭菌实验中,替代有传染性危险、培养很困难,用于评价消毒和灭菌效果的病毒.