不明原因原发不孕症患者黄体中期血清蛋白质谱研究

目的探讨不明原因原发不孕症患者血清蛋白质谱特征，寻找女性不孕症血清生物学标志物。方法采用表面增强激光解离飞行时间质谱技术（SELDI-TOFMS），运用WCX2蛋白质芯片检测2005-01-11卫生部北京医院妇产科、北京大学第三临床医院生殖中心、北京妇产医院的29例不明原因原发不孕患者（原发不孕组）和30例健康育龄妇女（对照组）黄体中期血清蛋白质谱，建立并测试不明原因原发不孕症患者血清蛋白质指纹图谱模型。结果筛出差异显著的5种蛋白质组成不明原因原发木孕患者血清的蛋白质谱最佳优化模型，其中质荷比（m／z）分别为8690、8715、8634、8826的4种蛋白质表达下降，质荷比（m／z）6628的蛋白质表达上调。结论不明原因原发不孕患者与正常育龄妇女黄体期血清蛋白质谱存在明显差异，深入研究可能为女性不明原因不孕的病因学提供基础，同时有助于不孕症生物标志物的筛查和发现。     

蛋白质组学及在卵巢癌诊断中的应用进展

卵巢癌是女性生殖器官恶性肿瘤中首位的致死性疾病．但现有的卵巢癌肿瘤标记物用于卵巢癌诊断价值有限．因此目前卵巢癌尚缺乏理想的诊断方法。新发展起来的蛋白质组学能够动态、整体、定量地考察肿瘤发生过程中蛋白质种类、数量的改变，有助于寻找到肿瘤诊断和预后的特异性标记物。运用该技术建立正常与癌组织的蛋白表达图谱，可直接用于肿瘤标记物筛选并为临床诊断提供可靠的理论依据，成为研究肿瘤标记物与肿瘤分期研究良好的技术平台。     

难免流产与正常早孕子宫内膜蛋白质组的差异

目的用蛋白质组学相关技术分析难免流产与正常早孕子宫内膜蛋白质组的差异,探讨自然流产发生的可能机制。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离难免流产(研究组)者和正常早孕行人工流产(对照组)者子宫内膜的蛋白质组。银染显色,PDQuest2DE软件分析。结果图像分析测得2种胶的匹配率达84.5%,在等电点pI4~9、分子量17.0~75.4kD范围内分离得研究组子宫内膜蛋白点大约730个,对照组子宫内膜蛋白点大约780个,其中至少60个蛋白点在2种子宫内膜间有2倍以上的量变。结论难免流产与正常早孕子宫内膜蛋白质组的差异表达,可能是导致孕卵着床胚泡植入障碍造成流产的一个原因。     

黄体生成素受体rs61996318基因多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究

目的探讨黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因rs61996318多态性与PCOS的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism PCR-RFLP)方法对北京大学第三医院及北京妇产医院生殖中心门诊患者进行LHR基因rs61996318多态性进行检测,并通过基因测序证实。结果 RFLP检测未发现rs61996318位点突变。通过基因测序证实无突变。结论 LHCGR的SNP位点rs61996318是中国人稳定的多态位点,与PCOS的发病无关。     

TNF-α对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的探讨TNF-α对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法收集未成熟卵母细胞,在含不同浓度TNF-α的培养液中进行培养,浓度梯度为0(作为对照),5,10,100,200,400和600ng/ml培养3、9、12h,所有卵母细胞体外培养12h后统计MⅡ期成熟卵母细胞数量。结果当TNF-α浓度≥5ng/ml作用3h,与对照组相比,卵母细胞生发泡破裂(GVBD)比例及成熟率明显降低(分别为89.54%与73.12%及78.43%与50.54%,P0.05)。将已经发生生发泡破裂的小鼠卵母细胞移到含有不同浓度TNF-α的培养液中培养9h,当TNF-α浓度≥10ng/ml时,小鼠卵母细胞自GVBD发育到MⅡ的比例为74.55%,明显低于对照87.59%(P0.05)。TNF-α作用12h组,当TNF-α浓度≥5ng/ml时,MⅡ期卵母细胞比例显著低于对照组(P0.01)。结论TNF-α明显抑制卵母细胞的体外成熟,包括抑制生发泡的破裂及第一极体的排放,并具有一定的剂量依赖性,低剂量组还具有时间依赖性。     

唐氏综合征产前筛查新进展

唐氏综合征（Downgs＇syndrome,DS）,是一种最常见的染色体疾病。早在1886年LangDown首先对此病做了临床描述,事隔近一个世纪,Lejeune于1959年证实该病是因为额外多出一条21号染色体而引起。唐氏综合征在新生儿中的发病率为1／800—1／600,但是约2／3的患儿在妊娠早、中期自发流产或胎死宫内,因此实际发病率高于新生儿发病率。本病的主要特征是智力低下,生长发育迟缓,特殊面容,手掌可表现为贯通手,并可伴有先天性心脏病和消化道畸形等。     

激光捕获显微切割技术联合短串联重复序列多态性分析在葡萄胎受精类型鉴别中的应用研究

目的探讨激光捕获显微切割技术（LCM）联合短串联重复序列（STR）多态性分析用于葡萄胎受精类型鉴别的可行性。方法首先通过LCM获得葡萄胎病病理组织的滋养细胞,再用16个位点（D8S1179,D21S11,D2S1338,CSF1PO,TH01,TPOX,D3S1358,D13S317,D16S319,D19S433,FGA,D18S51,D5S818,VWA,D7S820,Am）复合微卫星序列-PCR方法对61例病理学诊断为葡萄胎标本进行分析,明确其受精类型。结果用LCM技术从61例标本中获得滋养细胞后,成功提取DNA46例,浓度范围为：6.2-114.5（ngμ/l）。经STR多态性分析确定空卵单精子受精完全性葡萄胎13例,空卵双精子受精完全性葡萄胎13例,部分性葡萄胎20例。结论 LCM联合多重STR多态性分析能够确定葡萄胎的受精类型。     

多囊卵巢综合征家系遗传方式研究

目的 探讨多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS)的遗传方式。方法 采用遗传流行病学中的简单分离分析和综合分离分析方法。对139PCOS患者一级亲属中女性月经不规律和男性早秃的发生情况进行分离比分析。结果 女性月经不规律在患者母亲和姐妹中的发生率分别为37．4％和33．1％,男性早秃在患者父亲和兄弟中的发生率分别为19．4％和6．5％,简单分离分析显示PCOS在子代的分离比为0．3023,综合分离分析显示其符合共显性完全外显有散发遗传模型,纯合致病基因频率为0．046。结论 PCOS呈共显性遗传方式。