大鼠乳鼠和成鼠雪旺细胞提取纯化的对照研究*

背景：许旺细胞是神经创伤修复的种子细胞,获取大量高纯度、高活性许旺细胞是研究的关键。 目的：比较乳鼠和成年鼠许旺细胞的体外培养、纯化和形态学的差别,探讨简单可行的、可以获得高纯度许旺细胞的培养方法。 方法：出生1~3 d SD大鼠20只和成年大鼠10只(体质量150~200 g),实验按细胞的来源分为新生组和成年组。双酶分步消化,二次接种差速分离纯化细胞;倒置显微镜观察细胞形态、贴壁速度;细胞计数,纯度计算;MTT法检测细胞增殖能力,绘制两组许旺细胞的增殖曲线,判定增殖速度;S-100免疫化学法鉴定细胞。 结果与结论：乳鼠的许旺细胞贴壁速度快于成纤维细胞,成鼠的许旺细胞贴壁速度慢于成纤维细胞,两组许旺细胞纯度均达96%以上;MTT法检测两组许旺细胞增殖均活跃,由增殖曲线显示乳鼠许旺细胞增殖更快(P < 0.05);S-100免疫化学反应均呈阳性。提示双酶分步消化,二次接种差速分离纯化细胞,可以获取纯度高、活性良好的许旺细胞;乳鼠许旺细胞的增殖、贴壁能力更强。     

刺五加总黄酮和针刺对脑缺血后TGF-β1的影响

目的：研究脑缺血与TGF—β1的关系及刺五加总黄酮和针刺联合治疗作用。方法：通过建立大鼠局灶性脑缺血模型（MCAO），用免疫组化的方法，测定模型组（A组）、针刺组（B组）、总黄酮组（C组）、针药结合组（D组）、正常对照组（E组）TGF—β1的表达。结果：梗死灶中心区无明显TGF—β1阳性染色。与E组比较，A、B、C、D组明显增加，有明显差异（P〈0．01）；与B、C组比较，D组表达更明显增多（P〈0．01）。结论：刺五加总黄酮和针刺能提高TGF—β1蛋白表达，减少脑缺血区细胞凋亡的发生。针药结合治疗有良好的疗效。     

六君子汤上调小鼠免疫功能的机制

目的:探讨六君子汤(LD)对小鼠的免疫调节作用。方法:用一定剂量的LD给正常小鼠和免疫抑制小鼠灌胃7d,用ELISA法测定血清溶血素的水平;采用中性红吞噬试验检测腹腔巨噬细胞的吞噬功能;应用重氮化反应测定NO的水平;采用MTT比色法测定淋巴细胞增殖反应。结果:中剂量的LD可提高正常小鼠的免疫功能,明显提高免疫抑制小鼠的免疫功能。结论:LD对小鼠的免疫功能具有上调作用。     

雌二醇对系统性红斑狼疮小鼠模型肾组织芳香酶表达的影响

目的：研究雌二醇对系统性红斑狼疮（ Systemic lupus erythematosus, SLE）小鼠模型肾组织芳香酶表达的影响。方法：BALB／c小鼠卵巢切除后采用ConA活化的同系脾细胞诱导SLE，同时给予不同剂量苯甲酸雌二醇，并设立对照组。于4、6、8和10周用ELISA法检测外周血和肾组织雌二醇（Estradiol，E2）水平，RT-PCR检测肾组织芳香酶mRNA的表达。结果：SLE模型小鼠外周血和肾组织E2水平随着外源性给予苯甲酸雌二醇剂量的加大而升高，与未进行SLE模型诱导的小鼠相比较，SLE模型鼠外周血和肾组织E2水平升高（P〈0．05）；正常BALB／c小鼠肾组织芳香酶mRNA低表达；随着SLE炎症的诱导及E2水平的升高，肾组织芳香酶mRNA的表达增加。结论：E2通过促进SLE小鼠模型肾组织芳香酶mRNA的表达影响SLE发生发展。     

玉屏风散对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的:探讨玉屏风散对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响.方法:采用体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,并给予玉屏风散治疗,观察计算抑瘤率,检测巨噬细胞吞噬活性,巨噬细胞NO分泌量,自然杀伤细胞(NK)活性,T淋巴细胞增殖能力及白介素-2(IL-2)的产生及活性.结果:玉屏风散可提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能,增加巨噬细胞NO分泌量,促进荷瘤小鼠白介素-2(IL-2)的产生,淋巴细胞的转化、及NK细胞活性.结论:玉屏风散可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制模型鼠肿瘤的生长.     

玉屏风散对荷瘤小鼠肿瘤生长及IL-2与IL-2R基因表达的影响

目的 探讨玉屏风散对荷瘤鼠肿瘤生长及脾淋巴细胞IL-2与IL-2K基因表达的影响.方法 采用体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型.成瘤后给予玉屏风散治疗,观察计算抑瘤率,MTT比色法检测脾脏T淋巴细胞增殖能力,实时定量RT-PCR技术检测脾淋巴细胞IL-2与IL-2R基因表达情况.结果 荷瘤后小鼠的T细胞增殖能力及IL-2与IL-2R基因表达受到明显抑制;玉屏风散治疗组小鼠的平均瘤重明显低于荷瘤对照组,T细胞增殖能力及IL-2与IL-2R基因表达水平明显升高.结论 玉屏风散可能通过促进荷瘤小鼠T淋巴细胞的免疫功能进而抑制肿瘤生长.     

五味消毒饮对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

五味消毒饮方剂载于医宗金鉴具有清热解毒凉血消肿化痰散结止痛之功效主治各种疔毒痈疮疖肿现代多用于感染性疾病的治疗该方剂组成为金银花野菊花蒲公英紫花地丁紫背天葵本文研究了五味消毒饮对小白鼠腹腔巨噬细胞M 吞噬功能的影响1 实验材料和方法1 .1 实验动物 昆明纯种小白鼠,体重18g ~22g,雌雄兼用,随机分组由本院实验动物中心提供1.2 灌胃液的制备 (1)五味消毒饮煎液:将市售金银花等五味中药常规煎煮3 次,过滤去渣,混合,再浓缩配成1 0 0%和5 0%煎液2 黄芪精口服液 为江苏扬子江制药厂产品1 .3 试剂 阿氏液,瑞氏--姬姆萨染液1 .4 方法 …     

中药体外抑菌实验检测方法的比较

目的：比较几种不同的中药体外抑菌检测方法。方法：采用肉汤倍量稀释法、琼脂倍量稀释法、生长曲线绘制方法检测双黄连对细菌的抑制作用。结果：常量肉汤倍量稀释法双黄连最低抑菌浓度为50 g/L;琼脂倍量稀释法检测双黄连最低抑菌浓度为12.5 g/L;生长曲线绘制法检测双黄连最低抑菌浓度为50 g/L,可以观察到不同浓度双黄连对细菌生长影响的不同作用。结论：生长曲线绘制法最能直接反映中药与细菌的相互作用。     

黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染小鼠肠黏膜局部免疫的调节作用

目的探讨黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的肠道局部黏膜免疫的调节作用。方法用醋酸地赛米松给Balb/c小鼠灌胃8d,第9天接种1×106个隐孢子虫卵囊,建立免疫抑制小鼠隐孢子虫感染模型。再经黄芪水煎剂及黄芪多糖灌胃治疗10d,并设正常对照组、模型对照组和乙酰螺旋霉素对照组。每日计数小鼠粪便中隐孢子虫卵囊的数量,于实验第20天,光学显微镜观察肠组织病理学改变,ELISA法测定肠组织匀浆上清IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ水平及小肠黏液SIgA,流式细胞仪检测肠黏膜上皮细胞下T细胞亚群。结果与模型组比较,黄芪水煎剂组、黄芪多糖组和乙酰螺旋霉素组小鼠卵囊排出数量减少,肠组织病理学改变较轻,免疫学检测发现CD4+、CD8+淋巴细胞数量、小肠黏液SIgA及肠组织匀浆上清IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γ的水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论黄芪水煎剂及黄芪多糖通过上调肠道黏膜局部免疫功能促进隐孢子虫感染小鼠恢复。     

低分子量肝素对E-选择素介导的HL-60细胞与血管内皮细胞黏附的影响

目的 研究低分子量肝素(LMWH)对E-选择素介导的 HL-60 细胞与血管内皮细胞黏附的影响.方法 通过原代培养方法分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并建立体外模拟毛细血管流动的层流体系,利用该体系观察LMWH对体外动态条件下 HL-60 细胞与 TNF-α诱导的 HUVEC 的黏附作用的影响,荧光读板仪测定LMWH对E-选择素表达的影响.结果 TNF-α处理 HUVEC 5 h,能明显增加 HL-60细胞与 HUVEC 在动态条件下黏附,并能明显促进 HUVEC 表面 E-选择素表达.0.1、1 mg/ml对 HL-60细胞体外黏附有明显抑制作用;0.01、0.1、1 mg/ml对脐静脉内皮 E-选择素的表达有明显抑制作用.结论 LMWH有明显抑制体外动态条件下 HL-60细胞与人脐静脉内皮细胞黏附及降低血管内皮细胞 E-选择素表达的作用.这一结果为LMWH作为抗炎药物,尤其是为以选择素作为药物作用靶点应用于临床提供了重要的实验基础.