丙型肝炎病毒E2糖蛋白在哺乳动物细胞中的表达、纯化及初步应用

目的在哺乳动物细胞中表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２糖蛋白,并对其进行纯化,研究该蛋白作为抗原检测丙型肝炎患者血清中抗Ｅ２抗体的可行性。方法将中国株ＨＣＶＥ２／ＮＳＩ基因片段克隆到含有６个连续组氨酸的真核表达载体上,转染哺乳动物细胞,表达Ｅ２糖蛋白,经金属和亲和层析（ＩＭＡＣ）纯化后用于ＥＩＡ检测丙型肝炎患者血清中抗Ｅ２抗体。结果哺乳动物细胞中表达的Ｅ２糖蛋白为７．０×１０４,ＩＭＡＣ纯化后纯度达９０．２％。３５份ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中,２９份抗Ｅ２抗体阳性（８２．９％）。结论成功利用哺乳动物细胞中表达的Ｅ２糖蛋白建立ＥＩＡ检测抗Ｅ２抗体,并证实Ｅ２糖蛋白有较好的抗原性及敏感性,可用于建立新一代抗ＨＣＶ检测试剂。