实时定量RT-PCR监测慢性粒细胞白血病患者伊马替尼治疗过程中bcr/abl mRNA水平

目的观察甲磺酸伊马替尼(简称伊马替尼)治疗Ph+慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓bcr/ablmRNA水平的变化。方法采用实时定量(Realtimequantitative)RTPCR(RQPCR)技术连续监测34例α干扰素治疗无效Ph+CML患者在伊马替尼治疗前后不同时间120份骨髓标本bcr/ablmRNA水平。治疗前骨髓Ph+细胞百分率均≥95%。结果RQPCR的敏感度为10pgRNA,标准品日间差及日内差均<5%。10例伊马替尼治疗前标本中位bcr/ablmRNA水平为5.79%,各例之间差异甚大(0.24%～60.90%)。72份Ph+细胞百分率为0%～94%的治疗后标本bcr/ablmRNA水平与Ph+细胞百分率显著相关(r=0.82,P<0.001)。7例治疗12个月内达到完全遗传学缓解(CCyR)的患者bcr/ablmRNA水平随治疗时间延长而迅速降低,可供分析的6例患者治疗3个月时较治疗前下降65.9%～98.8%。达到CCyR后,bcr/ablmRNA水平随治疗时间延长继续下降,直至为0。4例治疗12个月后获得显著遗传学缓解患者(Ph+细胞百分率均<35%)bcr/ablmRNA水平缓慢下降,可供分析的3例患者治疗3个月时的bcr/ablmRNA水平分别比治疗前下降2.5%、18.5%及61.6%。5例持续遗传学无效,并且维持在慢性期的患者bcr/ablmRNA水平1例缓慢下降,2例缓慢上升,2例基本不变。4例治疗中发生急变的患者bcr/ablmRNA水平均逐步升高。结论对于伊马替尼     

一次性留取尿常规标本装置的研制

尿常规是临床常规检查项目之一 ,检验报告的准确性会直接影响疾病的诊断和治疗 ,尤其对一些特殊病人 ,尿标本的留取非常重要。目前临床常用的一次性塑料杯或空药瓶接取尿标本存在许多弊端 :①接取尿液时 ,尿液外溅 ,污染手、衣裤及周围环境 ;②无法观察全程及分段尿液的性状 ,亦无法准确接取中段尿 ;③接取尿的容器不能保证无菌。笔者根据多年的临床观察 ,研制出一种一次性留取尿常规标本装置 ,现已获国家实用新型专利权。1　一次性留取尿常规标本装置的结构 (见图 1)　　一次性留取尿常规装置由接尿漏斗、尿流通道及贮尿器组成 ,接尿漏斗呈…     

四色流式细胞术分析B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型

为了研究国人B细胞型急性淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型特点，使用了四色流式细胞术CD45／SSC 设门分析181例B-ALL的免疫表型。研究结果发现，所有检测病例CDl9阳性率100％，HLA-DR阳性率98．9％，CD38，CD10和CD34阳性率分别为88．5％，76．8％和76．8％，CD117与T系抗原CD2和CD7在B-ALL中很少表达。儿童组(≤14岁)CD10比例较高，青少年(15-18岁)和成人组(≥19岁)髓系相关抗原CD13和(或)CD33表达较高。各年龄组CD10 ／CD34 型比例最高，随年龄增长CD10 /CD34 型比例升高。CD10-CD34 型伴殖系抗原表达率明显高于其它亚型。与CD45 病例相比，CD45-或CD45 /-病例常伴有较高的CD10表达。43例标本RT-PCR检测bcr／abl结果显示：bcr／abl 组和bcr／abl-组伴殖系抗原表达率无显性差弄，m-bcr／abl 主要见于CD10／CD34 型。结论：典型的B-ALL细胞表达CD19和HLA-DR，不表达CD117。不同发育阶段CD34，CD10和CD45表达不一。青少年组免疫表型与成人组相似。CD45 多见于CD10-B-ALL。儿童组殖系抗原表达率较低。m-bcr／abl 多见于CD10／C1)34 型B-ALL。     

甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病慢性期100例追踪观察

目的评价甲磺酸伊马替尼治疗Ph阳性（Ph^＋）慢性粒细胞白血病（CML）慢性期的有效性与安全性。方法100例Ph^＋CML第1次慢性期（多为干扰素仅治疗失败的晚慢性期）患者持续口服甲磺酸伊马替尼400mg／d（93例）或600mg／d（7例）。结果中位追踪49．0（4，5—58．0）个月，累积获得的完全血液学缓解率为100％，主要细胞遗传学缓解（MCyR）率为86．0％，完全细胞遗传学缓解（CCyR）率为76．0％，CCyR患者中主要分子学缓解率为68．8％，完全分子学缓解率为26．6％，预计54个月无疾病进展率和总生存率分别为90．0％和92．6％。治疗中，18．0％和28．0％的患者分别出现了Ⅲ级白细胞和血小板减少。多因素分析显示，年龄≥60岁（P=0．033，RR：4．196）和治疗前外周血中嗜碱粒细胞比例≥0．05（P=0．012，RR=4．173）为独立预示Ⅲ级白细胞减少发生的危险因素。非血液学毒性发生普遍，大多程度轻微。10．0％和13．0％的患者分别检出了Ph^＋和Ph^＋细胞克隆演变，除个别Ph^＋细胞克隆演变者外多数处于疾病稳定状态。多因素分析显示，治疗前骨髓中存在高比例（100％）的Ph^＋细胞（P=0．027，RR=0．523或P=0．004，RR=0．424）和治疗中出现Ⅲ级白细胞减少（P=0．001，RR=0．306或P=0．004，RR=0．337）为独立影响MCyR或CCyR获得时间和比例的不利因素。结论甲磺酸伊马替尼明显提高Ph^＋CML慢性期患者的细胞遗传学和分子学疗效，改善生活质量，延长无疾病进展生存期。     

B超诊断粪石性肠梗阻1例

患者,女性,63岁,因腹痛、腹胀伴恶心、呕吐2d,肛门停止排气排便1d就诊。体格检查:腹部略膨隆,全腹压痛,尤以上腹部及右下腹痛为重,无反跳痛及肌紧张,肠鸣音存在。血常规:白细胞16.5×109L。X线立位腹部平片示小肠完全梗阻。行B超检查示:肝、胆、胰、脾、双肾未见异常。腹部肠管扩张积液,上腹部肠壁呈琴健征,下腹强回声部呈长管状改变,蠕动减弱。于脐右侧约5cm处扩张的肠管内见5cm×3cm中强回声团后方伴声影,以下肠管瘪陷。右髂窝内见少许无回声区(图1)。超声诊断:粪石性肠梗阻。手术所见:切开腹膜见少许淡黄色清亮液体溢出约150ml,肠管明…     

开胸术后双侧腋温对比及相关因素分析

测量体温是护士在护理工作中经常要做的工作,住院病人每天常规测温,测温结果的准确与否,直接关系到对病人病情的评估、治疗手段的选择、预后的判定等多方面的问题,因此,对于如何正确测温,避免其他因素的干扰,许多护理同仁进行了细致、大量的临床观察[1].     

抗PML抗体免疫荧光法快速诊断急性早幼粒细胞白血病

对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均为典型非APL表现。研究结果表明,抗PML抗体免疫荧光法简便、快速、特异,适于诊断未治和复发的APL病人。     

人工气道雾化吸入装置的改进

一般超声雾化吸入是将吸嘴含在病人口中,闭口吸入。但人工气道通气病人雾化吸入时,气雾无法全部进入气道,吸入效果较差。利用面罩吸氧管、医用雾化吸入器接头及超声雾化吸入器部件装配成套,给人工气道病人进行雾化吸入,收到满意效果。1材料及制作高速射流医用雾化吸入器的软管及三通接头,医用氧气面罩输氧管,超声雾化吸入器软管及接头。将超声雾化吸入器、软管、接头、高速射流软管、三通接头、氧气面罩输氧管(粗端剪掉)连接成套,然后将输氧接头插入气管导管内8cm～10cm胶布固定即可。2优点病人吸气时无气雾溢出。因输氧管直径<气管导管内径…     

CD123在急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测中的应用

为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的4色抗体组合对172份标本进行MRD检测并与实时定量PCR结果相比较。172份标本包括19例连续随访APL患者的116份骨髓或外周血标本和47例距初诊3个月至2年不等的非连续随访患者的56份骨髓标本,其中形态学完全缓解(CR)后117份,CR前55份标本。对18份标本同时加做抗体组合CD9/CD117/CD34/CD33检测。结果表明:初诊APL患者除高表达CD9、CD33、CD117和低表达CD34、HLA-DR外,CD123的阳性表达率为100%(30/30);正常骨髓中CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞和CD117+CD34-CD9+CD33+细胞在有核细胞中的比例分别为(0.066±0.012)%和(0.089±0·066)%,与APL患者相比相差4个对数级;随访期内,19例患者全部获得形态学CR,中位时间为4周(3-6周),13例FCM结果转阴的中位时间为7.5周(5-11周),11例PCR结果转阴的中位时间为8周(5-12周);形态学CR后随访的117份标本中41份FCM检测MRD呈阳性,8份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例>5%,中位值为9.02%(5.26%-18.14%),33份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例<5%,中位值为0·48%(0.02%-4.70%);CD117+CD34-细胞中CD123+HLA-DR-细胞的中位相对比例分别为86.77%(63.29%-92.62%)和63.59%(15.11%-98.36%);FCM与PCR同时检测MRD结果显示,FCM(+)标本中95.9%(93/97)PCR为阳性,FCM的假阳性率为4.1%(4/97),PCR的假阴性率为8.75%(7/93)。FCMMRD(-)标本中,92%(69/75)PCR阴性,8%(6/75)为PCR阳性。连续随访的116份标本和形态学CR后的117份标本显示,CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例与实时定量PCR检测的mRNA水平基本一致,两者均有一定的相关性(r=0.824,P<0.001和r=0.754,P<0.001)。结论:应用CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的2组4色抗体组合检测APL患者中的MRD简单可行,可与PCR检测相互补充。     

四硫化四砷治疗急性早幼粒细胞白血病过程中PML/PML-RARα蛋白的变化

为了研究四硫化四砷(As4S4)对急性早幼粒细胞白血病(APL)患白血病细胞中PML/PML-RARα蛋白的作用。在患治疗前和治疗后不同时间多次留取骨髓或外周血标本，用抗PML蛋白单抗对APL细胞进行间接免疫荧光染色，并在荧光显微镜下观察荧光信号的演变规律。结果显示：治疗前APL细胞表现为细胞核内弥漫分布的大量微颗粒荧光信号。As4S4治疗后，最早于第2天即可出现荧光分布的改变，表现为微荧光颗粒消失，出现数个大荧光颗粒，并出现核周荧光，最终大荧光颗粒也消失。当As4S4合用全反式维甲酸(ATRA)时，PML蛋白荧光信号变化规律与单用As4S4基本相同。但单独应用ATRA治疗后，PML蛋白荧光信号的改变与前两组明显不同，主要差别为微荧光颗粒不会很快消失，而是在微荧光颗粒逐渐减少的基础上，出现越来越多的大荧光颗粒，最终微荧光颗粒消失，而大荧光颗粒始终存在。结论：As4S4使患体内APL细胞的PML/RML-RARα蛋白发生重新分布，与ATRA治疗后完全不同。