应激诱发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体水平的变化

目的 检测吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体含量的变化。方法 建立大鼠对吗啡的条件性位置偏爱（conditioned place preference,CPP）,CPP消退后用足底电击（footshoek）诱发CPP的重现。将大鼠断头取血并取出下丘脑,制备组织习浆,采用液-液萃取和固相萃取法提取下丘脑和血浆中的神经甾体,经衍生化后,采用高效液相色谱-质谱法测定神经甾体含量。结果 与生理氯化钠溶液对照组相比,吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREG和PREGS的水平分别升高36％和60％（P〈0．05）。与CPP消退组相比,吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREGS水平升高60％（P〈0．05）;吗啡CPP重现组大鼠血浆中的DHEAS水平下降33％（P〈0．01）。结论 足底电击应激诱发吗啡CPP重现时,大鼠下丘脑中的神经甾体PREG、PREGS和DHEAS水平不依赖于血浆中相应的甾体水平变化,其中枢作用可能与应激诱发的吗啡CPP重现行为有关。下丘脑中的PREG和PREGS可能通过其对GABA系统的作用参与足底电击应激诱发的大鼠吗啡CPP重现。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中的硝苯地平

目的建立测定人血浆中硝苯地平的高效液相色谱-大气压化学源-质谱联用(HPLC-MS)的方法。方法液相分离采用DiamonsilC18分析柱,柱温:30℃,以甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1.2ml/min,进样量20μl;采用四极杆质谱检测器,大气压化学电离源(APCI),雾化气(N2)压力为60p,干燥气(N2)流速为4.0L·min-1,干燥气(N2)温度为350℃,毛细管电压4KV,碎片电压为75V,峰宽0.10,负离子方式检测,在选择离子监测(SIM)模式下检测质荷比(m/z)为345.0(硝苯地平)和359.1(内标尼群地平)的准分子离子[M-H]-。结果血浆中无内源性物质干扰测定,每个样品的分析时间<8.5min;硝苯地平在1.25~160ng·ml-1范围内呈良好的线性关系,回收率为96.0%~99.5%,日内RSD<4.49%,日间RSD<10.03%。结论本方法操作简便、选择性好、准确、灵敏,可用于硝苯地平的药代动力学研究。     

脱氢表雄酮对原代培养大鼠大脑皮质神经元谷氨酸释放的影响

 目的观察脱氢表雄酮对大鼠大脑皮质神经元谷氨酸释放的影响。方法原代培养的SD大鼠大脑皮质神经元经不同浓度(1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5mol·L^-1)和不同作用时间(0.5,1,1.5,2,5,24,36,48,72h)的脱氢表雄酮处理后,采用OPA-巯基乙醇柱前衍生,荧光检测-高效液相色谱法测定细胞培养液中谷氨酸的含量。结果与对照组相比,不同浓度的脱氢表雄酮处理后,细胞培养液中谷氨酸的水平均下降(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,脱氢表雄酮处理组1,1.5,2,5,24,36,48,72h细胞培养液中谷氨酸的水平均下降(P<0.05或P<0.01)。结论脱氢表雄酮可抑制神经元谷氨酸的释放,这可能介导了其对抗谷氨酸兴奋性毒性的作用。