树突状细胞介导的肿瘤免疫治疗研究

树突状细胞是抗原递呈能力最强的抗原递呈细胞。树突状细胞可通过交叉致敏途径呈递外源性抗原如肿瘤抗原，诱导CD8 的CTL应答。应用不同形式的肿瘤抗原负载DC，将致敏DC作为疫苗回输体内可诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。     

双抗体夹心ELISA定量检测内毒素的方法学研究

目的 建立检测细菌内毒素（endotoxin,ET)的双抗体夹心ELISA法。方法 用自制的抗LPS－mAb C3A2和H3D3，分别作为包被和酶标记mAb，建立双抗体夹心ELISA法，并进行了实验条件的选择。然后用优化后的双抗夹心法对检测LPS的敏感性、特异性、重复性和回收率进行鉴定试验，并与鲎试验定量仪器比浊法和鲎试验定性法进行比较。结果 双抗体夹心法检测LPS的敏感性为50ng/L，特异性与准确性均高于仪器比浊法和鲎试验定性法，回收率是86.7%-97.4%，CV值为0.62%-4.8%。结论 建立的双抗夹心法，检测LPS的敏感性、准确性和特异性均较良好，为临床诊治内毒素血症提供了一种简便快速准确特异的实验工具。     

血清免疫抑制酸性蛋白含量诊断恶性肿瘤的意义

免疫抑制酸性蛋白 (ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ,ＩＡＰ)为α１酸性糖蛋白的一个亚种 ,是正常人血清中存在的一种成分。在恶性肿瘤患者体内含量显著增高 ,可作为肿瘤的标志物用于癌症患者的临床诊断、疗效观察、监测和判断预后。据文献报道 ,卵巢癌和肾细胞癌等患者血清ＩＡＰ的含量升高［１ -４］,但有关其它恶性肿瘤患者血清中ＩＡＰ水平的变化尚未见报道。我们采用琼脂扩散法 ,检测了常见的不同恶性肿瘤患者血清ＩＡＰ的含量 ,并探讨了其临床意义。１对象和方法１ .１对象恶性肿瘤组 :１１９例均是住…     

药房药品数字化管理与发放可行性探讨

目的:探讨药房药品数字化管理与发放的可行性。方法:将实施数字化管理后药房药品管理和发放情况作为观察组,将未实施数字化药品管理和发放的情况作为对照组,经过整理和分析,将两组患者取药时间、药房药品盘点时间、药品账目相符率及药品损失率进行比较。结果:观察组患者的取药时间平均为(18.68±3.23)min,药房药品盘点时间平均为(1.02±0.51)d,药品账目相符率平均为(95.72±2.39)%,药品损失率平均为(0.05±0.02)%。对照组资料显示,患者的取药时间平均为(29.54±4.36)min,药房药品盘点时间平均为(3.01±1.26)d,药品账目相符率平均为(86.12±3.23)%,药品损失率平均为(0.27±0.02)%。观察组各项观察指标均明显优于对照组(P<0.05)。结论:药房实施计算机数字化药品管理与发放,提高了医院整体效益,值得在各医院进行计算机数字化药房药品管理和发放的推广应用。     

树突状细胞诱导高聚金葡素刺激的淋巴细胞体外高效特异性杀瘤作用

目的体外诱导高效特异的抗肿瘤免疫反应,以期制备新型特异性肿瘤免疫治疗效应细胞。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),将其中非贴壁细胞(淋巴细胞)加高聚金葡素(HAS)培养(称HASL);贴壁细胞经IL-4和GM-CSF联合刺激诱导树突状细胞(DC)分化。DC用人肺癌细胞系GLC-82的可溶性抗原致敏,并用TNFα和PGE2促进DC的抗原递呈能力。培养第10天,将DC与经或未经HAS刺激的淋巴细胞混合培养4h,分别称混合培养细胞为DC-HASL和DC-L。将DC-HASL、HASL及DC-L作为效应细胞,肿瘤细胞作为靶细胞,用MTT法检测细胞毒活性。细胞表型用流式细胞仪分析。结果DC-HASL对GLC-82细胞具有高效而特异性的杀伤作用(杀伤率100％);对另一肺癌细胞系A549细胞的杀伤率也达94.2％;对大肠癌细胞moser和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤率分别为73.5％和71.2％。而HASL和DC-L对A549、GLC-82、moser和MCF-7细胞的杀伤率则分别为48％、63％、60％、45％和42.1％、46.4％、39％、25.6％。淋巴细胞经HAS刺激后,CD3＋CD56＋细胞的比例大幅度增加。结论HAS在体外刺激淋巴细胞增殖产生的HASL对肿瘤细胞有一定的杀伤作用,无明显特异性。而DC-HASL则可高效特异性地杀伤GLC-82细胞,对其它肿瘤细胞也有不同程度的杀伤作用。另外,其对同类肿瘤细胞的杀伤率明显高于不同来源的肿瘤细胞。DC-L的杀伤力则明显低于DC-HASL。以上结果提示,将DC与HAS结合可诱导产生高效特异性的抗肿瘤免疫作用,为利用同种异体效应细胞进行肿瘤继承性免疫治疗提供了依据。     

IgG Fab—BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的 构建抗抗LPS Fab-BPI真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法 通过RT－PCR,获得广谱抗LPSmAbC3A3（IgG)的Fd和完整轻链（LC）cDNA片段。在分别构建了pcDCNA3-Fd和pcDNA3-LC表达载体的基础上,将包括BPI N端抗LPS活性中心的180bpDNA片段,通过一段长16个氨基酸的linker连接于上述Fab表达载体中Fd基因的下游,构建成Fab-BPI融合蛋白（FB）真核表达载体。将pcDNA3-LC质粒中包括hCMV启动子、LC和BGH polyA等序列在内的片段,插入到pcDNA3-Fd中hCMV启动子上游,从而构建成单质粒的Fab-BPI表达载体pcD-NA3-FB,转染真核细胞。结果 序列测定表明,重组质粒构建正确。pcDNA3－FB转染CHO细胞后,经ELISA、免疫荧光和mRNA鉴定表达成功,免疫印迹试验显示,与抗k轻链和抗BPI抗体反应的慢白区带的Mr均为60000左右。交叉反应试验证明,Fab和FB与多种革兰氏阴性菌的LPS有交叉反应性。结论 成功地在CHO细胞中表达出了抗LPS Fab-BPI(FB)融合蛋白。FB作为融合蛋白,集广泛交叉反应性和强大中和活性于一身,有可能成为更适于临床应用的新的抗LPS免疫制剂。     

检验科成本核算问题的探讨

目前,随着医学科学技术的高速发展,使检验专业的范围逐渐扩大。由于各种新型检测仪器的不断增加,专业试剂的大量使用,造成检验成本成数十倍或更多的增加。因而,提出了在市场经济确立的背景下,如何有效、合理地使用有限的卫生资源,用尽可能少的劳动消耗,取得尽可能大的社会效益和经济效益的问题。现就检验科的成本核算问题,与同行商榷。     

精神分裂症患者体内氧化－抗氧化系统的分析

精神分裂症患者体内氧化－抗氧化系统的分析杨麦贵１张竹映２于文彬１丁振若１李恒泽１（１第四军医大学西京医院检验科西安７１００３３２中国铁道建筑总公司西安医院）关键词精神分裂症脂质过氧化物超氧化物歧化酶中图号Ｒ７４９．３近年来研究发现，自由基与许多疾病有...     

脾虚症患者全血白细胞吞噬功能的临床研究

目的:根据中医理论,对脾虚证患者全血白细胞吞噬功能改变进行临床研究。方法:采用化学发光测定和分析的方法,对脾虚患者和健康正常组全血白细胞吞噬功能进行检测。结果:脾虚患者组全血白细胞吞噬发光动力学曲线各时间点吞噬发光峰值均低于正常组,脾虚患者组全血白细胞吞噬发光积分值较正常组明显下降。结论:脾虚证机体非特异性免疫功能失调,全血白细胞吞噬功能显著下降,与中医学对脾的认识相符合;全血白细胞吞噬功能下降是脾虚证免疫功能失调的重要方面之一。     

单克隆抗体亲和层析纯化日本脑炎病毒V3（E）糖蛋白的研究

本文探讨了用JEV-V3(E)McAb制备亲和层析柱纯化mg量V3糖蛋白的方法。结果表明，超声粉碎法裂解病毒囊膜不影响HA活性，而化学裂解剂(NP40、去氧胆酸钠，Triton x-100)处理病毒原始材料，则导致HA活性的丧失：pH11．5，0．05M二乙胺洗脱剂对V3的生物学活性影响较少；而3M KSCN对V8的HA活性有明显影响；用亲和力适中的McAb 2F2和mC3亲和层析柱纯化V3糖蛋白，其HA活性的回收率分别为30～40％及30～60％，蛋白收获量分别为0．33～1．26及0．21～0．66mg，相对HA比活性分别提高3～8倍及8～12倍；经SDS-PAGE考马斯亮蓝染色，显示一条主带，分子量相当于V3糖蛋白：纯化的V3糖蛋白可诱导小鼠产生HI抗体及NT抗体。