八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用

目的与方法：为探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机理，用电泳迁移率变动分析技术（EMSA），观察CCK-8对脂多糖（LPS）诱导核转录因子κB（NF-κB）活性变化的影响，用光密度扫描电泳谱带峰面积积分值表示NF-κB活性，观察肺组织的病理学变化。结果：LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF-κB活性1 639.92±198.63（P<0.01），显著高于对照组（593.56±89.34），此作用为预先静脉注入CCK-8部分逆转，NF-κB活性低至823.91±97.32（P<0.01），CCK-8可减轻LPS引起的肺组织病理学变化。结论：CCK-8对LPS激活肺组织NF-κB有抑制作用。     

八肽胆囊收缩素对经钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对经钥孔戚血蓝蛋白（KLH）免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法：雌性BALB/c小鼠KLH免疫同时分别给予不同剂量CCK-8。流式细胞法检测小鼠外周血及脾细胞中CD4+、CD8+T细胞阳性百分率；RT-PCR法检测脾细胞中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达；ELISA法检测其培养上清中IFN-γ、IL-4水平；HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果：CCK-8下调KLH免疫小鼠外周血及脾细胞中上升的CD4+、CD8+T细胞阳性百分率，降低CD4+/CD8+比值；进一步提高其IFN-γ mRNA表达和培养上清中IFN-γ分泌量，同时下调上升的IL-4 mRNA表达和培养上清中IL-4分泌量；减轻KLH免疫所致小鼠肺部炎症。结论：CCK-8可调节适应性免疫应答，抑制T细胞尤其是CD4+T细胞活性；抑制Th2功能，提高Th1功能，因此可能在变态反应性疾病的发病和防治中具有一定作用。     

大鼠视网膜发育过程中细胞增殖与凋亡的形态学

目的:观察视网膜发育过程中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化及细胞凋亡状态。方法:14~20 d胎鼠(E14-20 d)、生后0~15 d幼鼠(P0-15)及成年鼠(P36),取出眼球组织,免疫组织化学显色及原位末端标记(TUNEL)观察PCNA的表达和细胞凋亡变化。结果:发育早期E14~P7,可观察到有较强PCNA阳性表达,P9时PCNA阳性细胞数目明显减少,P15开始未见明显PCNA阳性表达。E18可观察到凋亡细胞,随着发育的进行,凋亡细胞逐渐增多,P7时凋亡细胞数目最多,之后又逐渐减少,成熟的视网膜组织内未见明显凋亡细胞。结论:在视网膜神经细胞发育过程中,细胞的增殖和凋亡呈现了有序的动态变化,正是这种有序的增殖和凋亡的平衡才使视网膜最终发育成了正常的组织结构及功能。     

CCK-8降低TNF-α诱导的大鼠RSC-364细胞增殖及p38 MAPK活性

目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素(CCK-8)对TNF-α诱导大鼠成纤维样滑膜细胞株RSC-364细胞增殖及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)活性的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;Western blot技术检测p38 MAPK活性。结果TNF-α(50μg/L)孵育5 min,p38 MAPK磷酸化水平升高,15 min达高峰,2 h恢复基础水平;孵育15 min时,p38 MAPK磷酸化程度随其剂量(10、25、50μg/L)的增大而增加。CCK-8(10-10~10-6mol/L)剂量依赖性降低TNF-α诱导的细胞增殖及磷酸化p38 MAPK的激活,此作用可被CR1409和CR2945拮抗。SB203580(10μmol/L)可抑制TNF-α引起的细胞增殖。结论CCK-8通过降低p38 MAPK磷酸化水平而抑制TNF-α激活的RSC-364细胞增殖,该作用可能由CCK-A和CCK-B受体共同介导。     

大鼠海马神经元中μ阿片受体、CCK受体的表达及慢性吗啡作用对其表达的影响

目的:研究MOR-1,CCK-AR,CCK-BR在海马神经元的分布和吗啡对其受体的影响.方法:用激光共聚焦扫描技术,以神经元特异性标记抗体NF-200对原代海马神经元进行鉴定,采用特异性的MOR-1,CCK-AR,CCK-BR的抗体观察观察它们在海马神经元上的表达.选用雄性Wister大鼠,用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡,对照组以同样的方法给予生理盐水后,取出大鼠海马组织用流式细胞技术检测不同时间吗啡作用于海马神经元时上述受体的表达.结果:海马神经元上同时表达MOR-1,CCK-AR及CCK-BR;给予吗啡后2～4 d,MOR-1在海马神经元上的表达较对照增高(P＜0.05),5 d时,MOR-1的表达显著下降(P＜0.01);随吗啡作用时间延长,CCK-AR和CCK-BR在海马神经元的表达呈上调趋势,且CCK-BR的表达高于CCK-AR (P＜0.01).结论:海马神经元上同时存在MOR-1,CCK-AR和CCK-BR,吗啡作用时间越长,MOR-1表达越弱,而CCK-AR和CCK-BR表达越强.     

河北汉族人群四个X-STR基因座遗传多态性研究

目前常染色体和Y染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)已广泛应用于法医学个体识别和亲权鉴定.但在某些特殊案件中,如父女关系的单亲鉴定及父母缺失的姐妹认亲,X染色体STR遗传标记由于其独特遗传方式,在解决此类案件时有常染色体所无法比拟的优点.目前遗传学数据库(genetic data bank,GDB)中绝大多数X-STR基因座尚未进行群体调查.为了发掘更多具有法医学应用价值的X-STR基因座,我们利用PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA序列分析技术,对河北省汉族150名无关男性及150名无关女性个体4个X-STR基因座进行调查,首次获得河北省汉族人群中DXS6800、DXS6797、GATA172D05、DXS986基因座的群体遗传学数据,报告如下.     

胆囊收缩素-8对大鼠急性脊髓损伤核因子-κB活性的影响

目的　探讨胆囊收缩素 8(CCK 8)对于急性创伤性大鼠脊髓损伤后核因子 κB(NF κB)的活性影响。方法　成年SD大鼠 72只 ,体质重 2 0 0～ 2 5 0 g ,雌雄不限 ,随机分为 3组 ,每组 2 4只。①损伤组 ,受试动物行椎板切除术 ,制造脊髓打击挫伤模型 ;②治疗组 ,选取损伤组中NF κB表达最强烈的两个时间点 ,每个时间点按 2 0 μg/kg、40 μg/kg、80 μg/kg剂量的CCK 8分别于术前尾静脉给药0 .2ml/只 ,再行椎板切除术 ,制造脊髓打击挫伤模型 ;③生理盐水组 ,于术前尾静脉注射生理盐水 0 .2ml/只 ,再行椎板切除术 ;④对照组 ,大鼠仅行椎板切除术 ,不行脊髓打击。各组动物均于术后 1h、6h、12h、2 4h、72h、5d在脊髓挫伤灶上下各 1cm处横断脊髓 ,并将神经根切断 ,将挫伤脊髓完整取出 ,放入 -70℃冰箱保存。应用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)及免疫印记 (westernblot)分析法 ,检测胞浆内及细胞核内NF κB的活性变化并作光密度定量分析。结果　急性脊髓损伤时 ,NF κB的活性表达逐渐增强 ,12h达到高峰 ,2...