Introduce法经皮胃造瘘术在上消化道狭窄肿瘤患者中的应用

目的: 总结Introduce法经皮胃造瘘术在上消化道狭窄肿瘤患者中的应用经验。方法: 对61例上消化道部分或完全梗阻肿瘤患者[男48例,女13例;年龄18~90岁,平均(60.02±9.88)岁],采用Introduce法经皮胃造瘘建立肠内营养管道,分析术前准备、胃腔充气膨胀方式、胃壁固定穿刺置管、术中及术后并发症等情况。结果: 61例患者中,造瘘成功60例,失败1例。鼻胃镜充气膨胀52例,超细管充气4例,腹腔穿刺针刺入充气5例,其中1例穿刺充气失败,原因是穿刺针滑入胃壁,造成胃黏膜下充气,形成夹层。鼻胃镜引导手术顺利,术后无并发症;CT引导下手术后1例伤口出血,止血处理后出院。结论: Introduce法经皮胃造瘘术是上消化道梗阻患者建立肠内营养途径的有效方法。鼻胃镜和CT均可引导胃造瘘,但前者可提供可视窗口,安全性较好;CT不能实时监控,需严格掌握适应证。     

晚期糖基化终末产物与糖尿病皮肤微血管病变的相关性研究

目的　研究晚期糖基化终末产物 (AGE)与糖尿病 (DM)皮肤微血管病变的关系 ,探讨DM创面新生血管化障碍或延迟的机制。方法　应用链脲佐菌素 (STZ)将SD大鼠诱导成速发型DM大鼠模型 ,并以正常SD大鼠作为对照 ,于致病后 12周获取大鼠背部中央的皮肤标本。应用F 30 10荧光分光光度计和免疫组织化学技术测定皮肤中AGE含量的变化 ;应用透射电镜观察皮肤微血管超微结构的改变。再选用人脐静脉内皮细胞株ECV30 4细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白 (AGE HSA)在体外共同培养 ,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测AGE对人血管内皮细胞活性的的影响。结果　DM大鼠皮肤胶原提取液的荧光值明显高于相应年龄的正常大鼠 (P <0 .0 1) ;免疫组织化学检测显示DM大鼠皮肤中AGE呈片状或块状沉积 ,其表达阳性率和强阳性率显著高于正常大鼠 (P <0 .0 1) ;DM大鼠皮肤普遍存在微血管病变 ,主要表现为血管内皮细胞变性和基底膜增厚 ;内皮细胞经 10 0 μg/mlAGE HSA干预 6h后 ,采用MTT法测定其吸光度值显著低于正常大鼠 (P <0 .0 1) ,流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率亦明显高于正常大鼠 (P <0 .0 1) ,且均呈时间和剂量的依赖性。结论　AGE是DM皮肤微血管病变的重要致病因素 ,亦是DM合并创伤后新生血管化障碍或     

糖尿病真皮组织中细胞的增殖和凋亡状态

目的 研究在未受到外源损伤时,糖尿病真皮组织中细胞的行为表现特征.方法 以糖尿病患者(糖尿病组)和非糖尿病对照者(对照组)的皮肤组织标本作为研究对象,分别进行组织学观察,免疫组化检测PCNA、cyclin B1的表达,TUNEL法检测凋亡细胞,组织蛋白提取ELISA法测定p53、Bcl-2和Bax表达水平.结果 与对照组相比,糖尿病组真皮组织胶原排列松散杂乱,纤细的浅层胶原范围广.两组真皮组织中PCNA、cyclin B1和Bax表达无明显差别;与对照组相比,糖尿病组真皮组织中凋亡细胞表达明显增加(P＜0.01),p53水平增高而Bcl-2水平减低(均P＜0.05).结论 无外源性损伤时,糖尿病真皮组织已有病理改变.凋亡细胞比例增加,相关的凋亡调控蛋白表达异常.提示糖尿病创面有一个异常的愈合起点.     

氧化应激对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响

目的探讨糖尿病机体氧化应激状态的改变及其对烧伤创面愈合过程的影响。方法应用STZ诱导糖尿病大鼠烫伤模型,检测其血浆中H2O2以及MDA水平与创面愈合的情况;流式细胞仪检测H2O2对大鼠成纤维细胞凋亡的影响。结果糖尿病大鼠创面愈合显著延迟,血浆中H2O2以及MDA水平明显增加;H2O2可促进大鼠成纤维细胞凋亡。结论氧化应激增强是糖尿病创面难愈发生的可能原因之一。     

微创治疗急性严重脑出血的临床研究

目的探索提高严重脑内血肿急诊救治成功率的新途径。方法以2006年1月-2007年12月间收治的189例GCS3-8分的脑内血肿患者为研究对象，分为内科治疗组（即对照组，93例）和急诊微创穿刺组（微创组）。对照组采用常规内科治疗，微创组患者则在CT引导下，用YL-1型颅内血肿粉碎穿刺针，在急诊抢救室内行微创血肿碎吸术，比较两组间的治疗效果。结果对照组96例，7、14d和30d分别死亡35、44例和57例，死亡率分别为25．0％、33．3％和46．7％；实验组93例，7、14d和30d分别死亡24、32例和45例，死亡率分别为37．6％、47．3％和61．3％。治疗后神经功能缺损评分比较，微创组7、14、30d均明显优于对照组。结论早期微创脑内血肿清除显著提高脑内血肿的急诊救治成功率，是一项可在急诊抢救室内开展的脑内血肿救治的新方法。     

氧化应激对大鼠真皮成纤维细胞生物学行为的影响

目的:创面微环境中许多细胞都能不同程度的产生活性氧等自由基。观察氧化应激对大鼠真皮成纤维细胞生物学行为的影响,有利于认识创面愈合的机制。方法:实验于2005-09/2006-03在上海市烧伤研究所完成。①实验材料:体质量为200～220g的清洁级雄性SD大鼠,由中科院上海动物实验研究所提供。②实验方法:取SD大鼠背部皮肤组织,消化分离表皮真皮,剪成0.1cm×0.2cm真皮块,置于含体积分数为0.10 FBS的DMEM培养瓶中,在37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养,每周换液2次。约7～10d后,成纤维细胞逐渐从真皮块中迁移出来,并且大量增殖,待原代培养成纤维细胞生长融合成片,用0.05%胰酶-EDTA消化,用含体积分数为0.10FBS的DMEM终止消化,离心后,按1∶3分装传代。取对数生长期的成纤维细胞,培养24h后,分别以20,50,100,150μmol/LH2O2干预成纤维细胞,另设空白对照(不加H2O2)及调零组(只加Hank’s液不加细胞)。③实验评估:采用MTT法观察细胞活力,流式细胞仪观察细胞凋亡,荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测,脂质过氧化物测试盒测试细胞丙二醛含量。结果:①MTT法观察细胞活力:随着H2O2浓度增加,成纤维细胞活力明显降低,各H2O2干预组吸光度值均较空白对照组低(P<0.01)。②流式细胞仪测定细胞凋亡:与空白对照组相比,20μmol/LH2O2干预组细胞凋亡无明显变化,100μmol/LH2O2干预组细胞凋亡明显升高(F=47.78,P<0.01)。③细胞内活性氧的测定:与空白对照组相比,20,100μmol/LH2O2干预组细胞活性氧产生明显升高(F=166.557,P<0.01,P<0.01)。④细胞内脂质过氧化物测定:与空白对照组相比,20μmol/LH2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量无明显变化,100μmol/LH2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量明显升高(F=5.756,P<0.01)。结论:氧化应激能导致大鼠真皮成纤维细胞细胞活力下降,凋亡增加,抗氧化治疗可以作为难愈性创面的治疗策略。     

表皮生长因子受体与糖尿病创面难愈

表皮生长因子受体(EGFR)是一种170-kDa跨膜受体酪氨酸激酶。其配体,如:表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α),和受体胞外结构域结合可引发受体二聚化和聚集,继而导致受体胞内部分的酪氨酸激酶激活。这种激活的、聚集的受体可使聚集的其他受体磷酸化,产生可供带有SH2结构域的胞内蛋白结合的位点,引发其下游一系列信号转导途径的激活。EGFR是一个多效应的信息传递者,其激活后能促进有丝分裂或诱导细胞凋亡;增加细胞活性、蛋白质分泌;诱导细胞分化或细胞去分化。人类皮肤中对EGF/TGF-α的反应决定于EGFR的数量和位置,并受影响结合力、内吞、受体酪氨酸激酶活性等过程的调节。EGFR在组织中的分布与该组织的生长活性相一致。链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(STZ-DM)小鼠肝细胞中高亲和力位点的EGFR完全缺失,低亲和力位点下降到50000。糖尿病患者组织中EGFR的性质发生了改变,受体后自磷酸化程度下降。目前还不清楚这种改变与疾病发生的因果关系。     

糖基化基质对人皮肤成纤维细胞增殖凋亡平衡的研究

目的探讨糖尿病皮肤细胞外基质（ECM）糖基化改变与细胞增殖凋亡平衡的相关性。方法DM或非DM患者的皮肤组织和溃疡创面标本组织学观察,同时免疫组化法检测皮肤组织增殖细胞核抗原（PCNA）、凋亡细胞、糖基化终末产物（AGE）和糖基化终末产物受体（RAGE）表达;体外建立糖基化基质,RAGE抗体干预后,检测细胞存活率、细胞周期和凋亡。结果与对照组相比,DM皮肤胶原萎缩,凋亡细胞比例增高;创面肉芽形成不良,细胞增殖能力减弱,凋亡细胞增加,AGE和RAGE表达增多;体外糖基化基质上接种成纤维细胞存活率明显减少,细胞周期运行障碍,凋亡增加,阻断AGE-RAGE间相互作用可基本缓解糖基化基质对细胞增殖凋亡过程的影响。结论DM皮肤组织中糖基化ECM蓄积是细胞功能改变的重要环境介质,经RAGE介导影响细胞增殖凋亡平衡,致糖尿病皮肤创伤起点异常,创面难愈。     

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化

背景：创面愈合是个复杂而有序的生物学过程，近期研究表明慢性创面愈合延迟往往与一些特定的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase．MMP)表达失调有关。目的：研究活化的MMP(activ ematrix metallopmteinase，aMMP)-2及其组织抑制因子(tissue inhihitor of metallopmteinases，TIMPs)在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验在上海市第二医科大学附属瑞金医院烧伤研究所完成。对象为SPF级Sprague-Dawley大鼠72只，体质量250g左右．雌雄不限，以链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤为模型，将伤后0，1，3，7，21d的组织标本进行组织块培养24h。主要观察指标：组织培养上清液中aMMP-2和TIMP-2的含量。结果：伤后糖尿病和正常鼠皮肤组织释放的aMMP-2和TIMP-2逐渐升高，糖尿病组未损伤组织释放的aMMP-2明显高于正常组(t=3．214，P&;lt;0．05)，伤后21dTIMP-2明显低于正常组(t=2．427．P&;lt;0．05)；正常组aMMP-2／TIMP-2比值基本稳定于一定的水平，而糖尿病组aMMP-2／TIMP-2比值逐渐下降，自伤后7d起，显著低于0时相点(t=10．019．P&;lt;0．01)。结论：糖尿病者在创伤前后皮肤组织中基质金属蛋白酶及其相关的生物活性物质的平衡均出现异常。     

增加精氨酸摄入量对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响

目的观察摄入大剂量精氨酸对烧伤患者血浆氨基酸谱的影响。方法10例烧伤患者随机分为烧伤试验组和烧伤对照组(各5例),前者给予占总热量2%的盐酸精氨酸静脉注射液,后者给予占总热量2%的14复合氨基酸静脉注射液。两组患者其他营养成分的摄入量均相同。营养方案自伤后第3天起执行,给予总量的1/4;伤后4、5d给予总量的1/2;伤后6~21d给予全量。在两组患者伤后3d(方案实施前)及7、14、21、28d清晨取其静脉血标本,检测血浆氨基酸谱水平。以10名健康志愿献血者的血浆氨基酸谱水平作为正常参考值。结果伤后3d,两组患者血浆瓜氨酸水平显著低于正常参考值(P<0.05),而鸟氨酸和精氨酸水平与正常参考值比较差异无统计学意义(P>0.05)。烧伤对照组伤后3d后精氨酸、瓜氨酸和鸟氨酸水平呈现下降趋势。而烧伤试验组伤后14、21、28d血浆精氨酸水平分别为(280±121)、(223±106)、(110±44)μmol/L,与同期烧伤对照组(124±21)、(59±15)、(50±26)μmol/L相比明显偏高;伤后21d瓜氨酸和鸟氨酸水平分别为(30±5)、(162±44)μmol/L,明显高于同期烧伤对照组(8±7)、(66±4)μmol/L(P<0.05或0.01)。两组患者伤后血浆其他氨基酸水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论机体烧伤后血浆瓜氨酸转化为精氨酸的过程加速。增加外源性精氨酸摄入量可显著提高血浆精氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸水平,但对其他氨基酸水平无明显影响,这一药理作用可能是通过加速鸟氨酸循环实现的。