Egr1介导的人截短型凋亡诱导因子表达载体的构建及其在乳腺癌MCF-7细胞中的辐射诱导表达规律

目的: 克隆人截短型凋亡诱导因子（AIF）cDNA序列,并构建早期生长反应因子1（Egr1）介导的重组表达载体pcDNA3.1-Egr1-AIFΔ1-480（pEgr1-AIFΔ1-480）,观察其在人乳腺癌MCF-7细胞中的辐射诱导表达规律。方法: 以人白血病Jurkat细胞mRNA为模板,RT-PCR法扩增获得人AIFΔ1-480,与pMD18T载体连接后行全自动测序,限制性内切酶切取pMD19T-Egr1中Egr1片段,并利用基因重组技术构建Egr1启动子介导的人AIFΔ1-480表达质粒pEgr1-AIFΔ1-480。实验分为对照组、 pcDNA3.1组、pAIFΔ1-480组和 pEgr1-AIFΔ1-480组。各组质粒分别转染MCF-7细胞,Western blotting法检测AIF及AIFΔ1-480蛋白的辐射诱导表达时程-效应（2.0 Gy照射后0、2、4、12、24和48 h）和剂量-效应（0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 Gy照射后24 h）规律。结果: 经测序证实,RT-PCR获得的人AIFΔ1-480基因与预期一致,pEgr1-AIFΔ1-480经PCR和酶切鉴定完全正确;各组MCF-7细胞经2.0 Gy照射后0～48 h,AIF蛋白在各组中均有表达,从4 h开始显著增加,4、12、24和48 h各组AIF表达与0 h组比较差异有统计学意义（P<0.05）,48 h达到最大;而在pAIFΔ1-480和pEgr1-AIFΔ1-480组,AIFΔ1-480从2 h开始表达,4、12、28和48 h各组AIFΔ1-480表达与2 h比较差异有统计学意义（P<0.05）,24 h达到峰值;而且24和48 h时pEgr1-AIFΔ1-480组AIFΔ1-480表达较pAIFΔ1-480组显著增加（P<0.05）。各组MCF-7细胞经0～5.0 Gy照射后24 h,各组均有AIF蛋白表达,而AIFΔ1-480只在pAIFΔ1-480和pEgr1-AIFΔ1-480组表达,二者均随着剂量增加而增加,0.2、0.5、1.0、2.0和5.0 Gy照射后各组AIF表达与0 Gy比较差异有统计学意义（P<0.05）,在5.0 Gy照射时达到最大,相同照射剂量pEgr1-AIFΔ1-480组AIFΔ1-480表达高于pAIFΔ1-480组。结论: 成功构建Egr1介导的人截短型AIF重组表达载体pEgr1-AIFΔ1-480, AIF和AIFΔ1-480蛋白在MCF-7细胞中的表达随照射时间延长和照射剂量增加而增加。     

肝动脉灌注化疗和栓塞治疗原发性肝癌130例分析

肝动脉灌注化疗和栓塞（ＨＡＩＥ）治疗原发性肝癌的临床应用已日益普及。通过ＨＡＩＥ可使不能手术的中晚期患者有了非手术治疗方案。同时,治疗能使不能切除的肝癌肿块缩小,可达到二期手术的目的。我们回顾总结了１３０例肝癌ＨＡＩＥ的血管造影和临床治疗的资料,分析ＨＡＩＥ在肝癌治疗中的作用。材料和方法一、一般资料本组１３０例,男性１０１例、女性２９例,年龄３４～７２岁,平均４７岁、经Ｂ超、ＣＴ检查提示为肝癌。其中７２例血清ＡＦＰ值≥４００μｇ／Ｌ,经肝动脉造影检查,符合临床原发性肝癌的诊断。临床表现：右上腹痛…     

皖南山区肺吸虫中间宿主感染情况调查

皖南休宁县原是肺吸虫病重流行区,近二十年,随着经济、文化迅速发展,大力开展健康教育,当地居民的生活习惯、饮食卫生习惯、自然生态环境都已发生较大变化。今年暑期,我们深入该地区调查肺吸虫中间宿主感染情况,并观察高温、冷冻等物理因素对囊蚴活力之影响。结果如下。     

氟化物及氟化物加钙对卵巢切除大鼠血清中LPO变化的影响

目的 确定氟化物及钙对卵巢切除大鼠血清脂质过氧化物的影响。方法 64只雄性Wistar大鼠,随机分为卵巢切除组,卵巢切除后单纯喂给氟组及卵巢切除后喂给氟加钙组。喂养6个月后,处死动物,测定血中的脂质过氧化物含量。结果 卵巢切除组血中OPO含量明显高于对照组（P＜0．05）。卵巢切除同时喂给不同剂量的氟及氟加钙组,大鼠血清OPO明显低于单纯卵巢切除组（P＜0．01）。卵巢切除同时投给不同剂量的氟与卵巢切除同时投给不同剂量的氟加钙组比较大鼠血清LPO改变不明显（P＞0．05）。结论 卵巢切除骨质疏松大鼠血中LPO明显增高,加入不同剂量的氟及钙后改善了去势大鼠的脂质过氧化程度。     

羟基脲联合辐射对沉默ATRX后细胞周期及凋亡的影响

目的:探讨羟基脲(HU)联合辐射对沉默α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关蛋白(ATRX)后A549细胞周期和凋亡的影响,并阐明其可能的分子机制。方法:建立稳定沉默ATRX的A549细胞模型(shATRX-A549),荧光显微镜下观察细胞感染情况,采用Western blotting法检测沉默ATRX细胞中ATRX蛋白表达量验证细胞模型,以shNC-A549细胞作为阴性对照。实验分为对照组、HU组、辐射组(给予8 Gy X射线辐射)和HU+辐射组(给予HU+8 Gy X射线辐射)。流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率,采用RNA测序(RNAseq)检测沉默ATRX后各组细胞中mRNA表达,采用Western blotting法检测各组细胞中细胞分裂周期因子(CDC25B)、细胞周期蛋白(Cyclin) B1和细胞周期蛋白依赖性激酶1 (CDK1)蛋白表达量。结果:荧光显微下可见shNC-A549和shATRX-A549细胞表达绿色荧光蛋白(GFP);Western blotting法检测,与shNC-A549细胞比较,shATRX-A549细胞中ATRX蛋白表...     

中国地区贫困对成人抑郁情绪的影响

目的 探索地区贫困对中国成人抑郁情绪是否存在独立于个体因素的情境效应.方法 数据来源于2012年中国家庭追踪调查(CFPS),该调查是具有全国代表性的多阶段抽样调查.首先通过主成分分析方法 提取县级不同维度贫困指标的第一主成分得分,采用标准化后的第一主成分得分作为地区贫困指数.采用CES-D抑郁自评量表测量成人的抑郁情...     

血小板保存相关添加剂研究现状

血小板在止血、炎症、肿瘤转移、伤口愈合及防御反应中起到了重要作用，然而其常规保存需要特定温度且保存时间一般为5～7 d,同时，血小板储存损伤和细菌滋生会影响其保存时间及保存质量。此外，常规输注后会产生非溶血性发热、过敏、循环超负荷及输血相关急性肺损伤等严重不良反应。这些都限制了血小板制品在临床中的应用。但是，与血小板保存相关的添加剂可以降低它们发生的可能性。因此，我们就近年来血小板保存相关添加剂的研究现状，以及改善血小板储存损伤、提高血小板保存特性等方面进行了综述。     

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜的保护作用

目的 基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用。方法 将48只小鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组(阳性药，0.45 g/kg)和化浊解毒消痈方高、中、低剂量组(28.68、14.34、7.17 g/kg),每组8只。除正常组外，其余各组小鼠均采用2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d建立溃疡性结肠炎模型，造模后各组灌胃给予相应剂量药物。给药7 d后，分析小鼠疾病活动指数(DAI)评分，HE染色观察结肠组织病理学改变，RT-qPCR和Western blot法检测结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达。结果 与模型组比较，化浊解毒消痈方各剂量组和美沙拉嗪组小鼠DAI评分降低(P<0.05),结肠组织病理形态得到改善，结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),其中高剂量组作用与美沙拉嗪组相当。结论 化浊解毒消痈方能抑制结肠上皮细胞的过度凋亡，对UC小鼠结肠损伤具有保护作用，其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHO...