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目的:克隆人白细胞介素-18结合蛋白(hIL-18BP)的cDNA及构建hIL-18BP逆转录病毒载体,以研究IL-18BP与IL-18相互作用的机制及自身免疫性疾病的基因治疗。方法:从中国汉族人胎盘组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增hIL-18BP cDNA,与载体pcDNA3连接,转化大肠杆菌DH5α,得到的重组质粒经鉴定正确后,再作为模板进行PCR,PCR产物插入逆转录病毒载体pLNCX中。结果RT-PCR扩增出全长585bp hIL-18BP cDNA,2次酶切鉴定证明hIL-18BP已分别与pcDNA3,pLNCX重组,2次测序结果均与国外文献报道的hIL-18BP的序列一致。结论:成功地克隆了中国人IL-18BP cDNA,并构建了重组hIL-18BP 闻转录病毒载体。 相似文献
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<正>Alport综合征是最常见的遗传性肾病,又称遗传性肾炎或眼-耳-肾综合征,是一种主要表现为血尿、肾功能进行性减退、感音神经性耳聋和眼部异常的遗传性肾小球基底膜疾病。本病多见于儿童及青年,男性发病率高于女性,且病情更为严重[1],并以反复镜下血尿或肉眼血尿为最常见,85%患者伴有蛋白尿,50%患者听力障碍,通常为双侧感音神经性耳聋,也有单侧耳聋者,眼部病变多出现在肾功能损伤之后[2]。随着肾活检的普及和电镜技术的发展, 相似文献
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目的 阐释江西省名中医吴兆东主任医师治疗慢性肾功能衰竭的遣药组方规律,并探讨潜在新方组合的潜在作用机制。方法 收集2019年7月至2021年7月吴兆东主任门诊处方,运用中医传承辅助平台(V2.5)进行数据挖掘,分析处方药物的用药频次、药物关联,并得出潜在中药新方组合。运用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、STRING及京都基因与基因组百科全书(KEGG)对“新处方”中药物靶标间相互作用关系进行分析,并进行分子对接验证和实验验证。结果 ①共筛选出200首处方,包含217味中药,演化得到8个潜在新方组合:处方1苦杏仁-黄芪-桔梗-当归-土茯苓-炒白术;处方2防风-荆芥-地肤子-紫菀-薄荷;处方3苦杏仁-紫菀-桔梗-枇杷叶-炙麻黄;处方4紫苏梗-党参-黄连-太子参;处方5旱莲草-炙黄芪-贯众-金樱子-薏苡仁-女贞子;处方6泽兰-忍冬藤-络石藤-泽泻;处方7黄芩-水蛭-赤芍-枇杷叶-北沙参;处方8甘草-玄参-野菊花-土茯苓-六月雪。②筛选出潜在新处方组合(新方1)的主要化学成分有18种;③预测到新方1活性成分的作用靶标80个,映射后得出新方1治疗CRF37个潜在靶标[(如白细胞介素(IL)-6、血管内皮生长因子(VEGF)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、一氧化氮合酶(NOS)3、缺氧诱导因子(HIF)-1等];④中药-疾病靶标涉及的KEGG通路主要包括脂质和动脉粥样硬化、NF-κB、Toll样受体、HIF1信号通路。⑤新方1显著降低CRF大鼠血清肌酐、尿素氮,提高肾组织NO、NOS3含量。结论 新方1中药组合显示了多成分、多靶点的药物作用特点,其机制可能与其抑制肾纤维化、抗炎、改善肠道微生态、改善肾脏缺氧缺血有关。 相似文献
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目的:研究整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响及机制。方法:采用MTT及细胞流式测定观察整合蛋白β1亚基过表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的影响。蛋白质印迹及RT-PCR检测细胞中p27的蛋白及mRNA的表达,并构建p27的RNA干扰质粒,转染整合蛋白β1亚基过表达细胞,再观察p27的表达变化对细胞增殖的影响。结果:整合蛋白β1亚基过表达可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并将细胞阻滞在细胞周期的G1期。整合蛋白β1亚基过表达可以在蛋白水平上调p27的表达,但并不影响p27的mRNA水平。p27的RNA干扰质粒可明显抑制p27的表达,而且p27表达的下调可以阻止整合蛋白β1亚基过表达所引起的细胞增殖抑制。结论:整合蛋白β1亚基过表达通过上调p27抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖。 相似文献