基于Eppin优势中和B细胞表位的新型DNA避孕疫苗的制备和鉴定

目的制备基于Eppin优势中和B细胞表位的新型DNA避孕疫苗。方法采用PCR技术扩增mIL-4和Eppin B细胞表位基因,将其克隆到真核表达载体pVITR02-mcs,构建双盒表达载体,并将双盒表达质粒转染CHO细胞,检测其体外表达;将双盒表达质粒DNA与具有穿膜活性的HIV-1 TAT49-57阳离子肽,通过正负电荷吸引原理,制备成模拟病毒颗粒样的疫苗,并以DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和扫描透射电镜对该疫苗进行鉴定。结果 RT-PCR和免疫印迹结果表明转染细胞中均有目的分子的存在,在电荷比为4的条件下,该疫苗能形成类似病毒样的颗粒。结论成功制备了基于Eppin优势中和B细胞表位的模拟病毒颗粒样疫苗,为进一步研究避孕效果奠定了基础。     

p53基因与DNA修复

DNA的损伤修复是一个多因子参与的、多环节的复杂修复系统。p5 3基因以多条信号通路 ,多种调控方式参与 DNA修复。它可以通过其下游一系列靶基因 p2 1、gadd4 5等调控细胞周期 ,使细胞停滞于 G1 期、G2 期等检测点 ,从而使受损 DNA有足够的时间进行多因子参与的修复过程 ;也可以与 DNA修复因子 RPA、PCNA、XP p4 8基因等相互作用 ,直接参与 DNA修复 ;还可以蛋白—蛋白相互作用参与 DNA修复。     

海军某试验基地1990～2000年肾综合征出血热监测研究

目的:了解部队肾综合征出血热(HFRS)的发病情况和危害程度,以便采取有效措施预防控制该病发生.方法:在各调查点捕鼠,调查鼠密度,鉴定鼠种;捕获鼠用间接免疫荧光法(IFAT)检测HFRS抗原;收集调查部队1990～2000年HFRS的发病情况.结果:某部1990～2000年共发生HFRS 69例,平均年发病率为69.69/10万,呈单峰型,以春季多发,以18-35岁青壮年为主,男性多于女性;从事警卫巡逻、仓库保管、修理、野外测量四种工作的人发病较多;部队驻地鼠带毒率为6.28%,褐家鼠为主要传染源.HFRS地鼠肾(Ⅱ型)灭活疫苗的一年保护率为100%.结论:该部队须加强HFRS的防治,应扩大疫苗注射范围,加强防鼠、灭鼠工作力度,并对鼠情和鼠带毒率进行监测.     

关于课程班硕士研究生教学与培养的感想

本分析了目前课程班硕士研究生教学与培养方式的现状及存在的主要问题，并提出了相应的对策和建议。     

纳升电喷雾质谱鉴定维甲酸诱导HL60细胞分化相关蛋白质

目的鉴定维甲酸诱导肿瘤细胞分化有关蛋白质.方法双向电泳分离维甲酸诱导分化前后HL660细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选分化肿瘤细胞特异表达的蛋白点,用纳升电喷雾质谱对酶解消化样品进行部分氨基酸的序列测定,数据库比较即可得知是已知或未知蛋白.结果PDQuest分析全反式维甲酸(atRA)诱导分化前后HL60细胞蛋白双向电泳图谱,有许多蛋白表达水平有变化,我们对两个在分化细胞中明显表达的两个蛋白点进行了鉴定,质谱测序结合数据库检索表明两个蛋白点为同一种蛋白,即S100钙结合蛋白A9.结论S100A9蛋白在atRA诱导的HL-60细胞表达.     

人Izumo蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测

目的:预测人Izumo蛋白的二级结构及B细胞抗原表位.方法:以人Izumo基因序列为基础,按Chou-Fasman和Gamier-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplus-Schulz方法预测Izumo蛋白骨架区的柔韧性;按Kyte-Doolittle方法预测其亲水性、Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数.结果:Chou-Fasman及Gamier-Robson两种方法预测的结果均表明,Izumo蛋白含较多的α螺旋,蛋白第6～17、30～40、88～99、103～120、153～160、173～188、249～260、283～297、334～338和339～346区段可能是α螺旋中心,第21～25、198～200、245～248和320～323区段可能是β折叠中心.用Kyte-Doolittle、Emini和Jameson-wolf方法分别对Izumo蛋白B细胞抗原表位进行预测结果表明,蛋白质第36～42、62～66、94～99、118～122、129～132、151～154、161～164、173～177、205～208、212～216、256～265、271～276、283～288、314～318和336～350区段附近很可能为B细胞表位优势区域.结论:该研究结果有助于确定Izumo蛋白的B细胞优势表位及发挥免疫避孕的活性部位.     

城镇社区卫生服务模式发展与全科医学人才培养

随着我国经济和社会的飞速发展,城镇人口迅速增多。针对人口激增、日渐来临的人口老龄化、慢性疾病增多、医疗费用居高不下等一系列问题,开展城镇社区卫生服务、建立适当的社区卫生服务模式是新时期卫生体制改革的必然趋势。目前,一些经济和社会发展水平较高的大中城市经过试点探索,建立了以社区人群健康为中心、以社区为范围、家庭为单位,融预防、医疗、保健为一体的良好的综合社区服务模式犤1犦。主要有如下四种:1以大型综合医院为后盾的社区卫生服务模式在大型综合医院内设立预防保健科,承担社区内居民的社区卫生保健工作。社区医疗保健…     

人源轮状病毒的小型猪腹泻模型建立

目的建立人源轮状病毒的小型猪腹泻模型，为人源轮状病毒感染的免疫保护机制、致病机制及疫苗的研制奠定基础。方法ELISA与RT-PCR相结合分离鉴定野生型人源轮状病毒；用野生型人源轮状病毒G1与G3血清型口服接种不同日龄的小型猪，观察粪便排泄等临床症状，ELISA及免疫荧光分别检测粪便与小肠上皮组织中的轮状病毒抗原，光镜及透射电镜观察小肠上皮组织的病理变化与病毒样颗粒。结果3～5日龄小型猪均出现了典型的临床腹泻症状；粪便中轮状病毒抗原排泄可平均持续5～7d；小肠组织可见明显的病理变化，同时用免疫荧光检测方法可在小肠组织中检测到特异性轮状病毒抗原；透射电镜进行观察，在小肠组织的超薄切片中可见到大量的轮状病毒颗粒。30～35日龄小型猪可出现明显腹泻临床症状，粪便中轮状病毒抗原排泄可持续4～7d；56～60日龄小型猪接种野生型人源轮状病毒G1血清型后，均未出现典型的腹泻症状，但可持续排毒2～3d。结论小型猪可作为人源轮状病毒的理想腹泻动物模型。     

SARS-CoVS蛋白全长基因克隆及其表达的初步研究

目的：克隆表达SARS-CoVS蛋白，构建SARS全长基因疫苗。方法：从SARS病毒的总cDNA中以PCR方法扩增编码人SARS-CoV S1和S2蛋白的编码序列，再将二者分别克隆入真核表达载体pVAX1，构建重组表达载体。然后进一步将S1和S2连接到pVAX1中。酶切和测序鉴定阳性克隆。采用脂质体法转染Vero E6细胞，用Western检测S蛋白的表达。结果：PCR方法分别扩增出了1900bp和1800bp左右的基因片段，两片段插入pVAX1构建重组表达载体后，经序列测定证实该插入片段为SARS病毒S蛋白编码序列。将重组子转染Vero E6细胞，收集细胞总蛋白，Western检测获得特异蛋白带。结论：成功克隆并表达了SARS-CoVs蛋白，为其作为SARS基因疫苗研究打下基础。     

《医学免疫学》本科生教学的几点体会

医学免疫学是医学院校本科教育开设的一门重要基础课由于免疫学的一些概念和理论非常抽象,新理论和新技术进展迅速,它成为医学生难学的课程之一,如何使其内容由难变易、由抽象变具体、由深奥变浅显,这是授课教师在教学上值得探讨的问题。几年来,我们在免疫学教学中,注重加强教学改革,对学生在知识、能力和素质三方面进行培养。收到良好的效果,为学生今后的临床实践和医学研究打下了良好的基础