创伤性脾破裂72例诊治体会

目的探讨创伤性脾破裂的诊治体会,提高快速诊断及救治水平。方法回顾性分析2002年10月—2011年10月我院72例创伤性脾破裂患者的诊断治疗经过。结果经脾破裂各种术式选择,治愈率96%。结论脾破裂治疗原则为"抢救生命第一,保留脾脏第二";根据Gall和Scheehe脾创伤分级标准,Ⅰ~Ⅱ级行单纯缝合术、Ⅲ级行脾部分切除术、Ⅳ级行脾切除术,可耐受时加自体脾组织移植术。     

头颈肌上皮癌的生物学特征及诊疗分析

目的探讨头颈肌上皮癌的临床表现,病理、免疫组化特点及诊疗方法,提高对该病的诊疗水平。方法回顾性分析经病理确诊的5例头颈肌上皮癌患者的临床资料,结合文献并从生物学、诊疗和预后方面进行分析。结果5例患者均经病理和免疫组化确诊,其中腮腺3例,硬腭1例,鼻、鼻窦1例。5例患者行根治性手术治疗4例,1例放弃手术而行放、化疗。3例术后局部复发,其中2例出现颈淋巴结转移,行二次手术或加颈淋巴结清扫术,2例出现远处转移;至末次随访,4例死亡,1例无瘤生存（术后10个月）。结论头颈肌上皮癌是预后极差的上皮性恶性肿瘤,好发于腮腺,鼻、鼻窦者极为罕见;颈淋巴结和远处转移率较高,治疗采用手术为主的综合治疗,术后复发率高。     

外源表达Nkx2.5诱导骨髓间充质干细胞向心肌分化

目的 探讨转染外源性Nkx2.5基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的作用.方法 全骨髓法分离大鼠BMSCs,经多次传代培养扩增纯化,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD90、CD45.脂质体法将pEGFP-N1-Nkx2.5质粒转染BMSCs,观察细胞形态变化;转染48h后,免疫细胞化学检测Nkx2.5的表达.转染4周后,Western blotting检测心肌肌钙蛋白(cTnT)的表达;免疫细胞化学检测cTnT、GATA4的表达,鉴定细胞分化.结果 第3代生长良好的细胞中表达CD90而不表达CD45的占细胞总数的99%.转染48h后,实验组可见部分细胞表达绿色的Nkx2.5-pEGFP融合蛋白,免疫细胞化学结果 表明,Nkx2.5蛋白只在实验组有表达(n=3).转染4周后,Western blotting、免疫细胞化学结果 表明,cTnT、GATA4表达在实验组显著高于pEGFP-N1空质粒转染组和空白对照组(n=3).结论 外源表达Nkx2.5基因能够增强BMSCs向心肌分化.     

人粪便中波形蛋白基因甲基化在结直肠癌早期诊断中的意义

目的 分析结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化状态,探讨其作为结直肠癌早期诊断分子标志物的可行性和临床意义.方法 从郑州大学第一附属医院收治的60例结直肠癌患者、门诊行结肠镜检查的17例结直肠腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法分析其波形蛋白基因甲基化状态.结果 60例结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为51.67％(31/60),17例结直肠腺瘤患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为4/17,30名正常对照中无一例检测到波形蛋白基因甲基化.结论 粪便中波形蛋白基因甲基化是结直肠癌进展过程中的早期事件,粪便中波形蛋白基因甲基化分析有望成为结直肠癌早期诊断的标志物之一.     

慢病毒载体靶向沉默原代大鼠海马神经元黏着斑激酶表达siRNA的筛选

目的制备针对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的siRNA慢病毒载体,转染入原代培养的大鼠海马神经元细胞,筛选最佳的感染条件和沉默靶点序列。方法根据siRNA原理设计、构建、酶切、转化、PCR鉴定、阳性克隆测序并病毒包装3种靶向大鼠FAK的siRNA(T1,T2,T3),并转染至原代培养的大鼠海马神经元细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测神经元细胞FAK基因表达,Western blot检测FAK蛋白表达。结果成功制备3种FAK siRNA慢病毒载体,并成功转染到神经元细胞中,在感染复数(MOI)为10并加入5μg/mL polybrene条件下转染率达到90%以上。T1、T2、T3均可抑制FAK基因及蛋白的表达,但T1沉默效果最好,敲除效率达到65%,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论筛选出最佳的转染条件及最佳沉默靶向性序列T1,为后续研究整合素在阿尔茨海默病发病中的机制奠定了实验基础。     

比色法测定黄芪总皂苷的含量

目的：建立黄芪总皂苷的含量测定方法。方法：采用比色法测定黄芪总皂苷。结果：总皂苷在0.06～0.6 mg范围内具有良好的线性关系（R=0.9998）,回收率为98.25%,RSD为0.44%。结论：该方法操作简便、快速、有效、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为黄芪总皂苷的含量测定方法。     

不同入路治疗中青年腰椎结核患者的近期疗效分析

目的:探讨不同入路的病灶清除术治疗中青年腰椎结核患者的近期疗效.方法:回顾性分析本院2018年11月至2020年8月治疗的78例中青年腰椎结核患者临床资料,将采用单纯前入路行病灶清除术的26例患者资料纳入A组,采用单纯后入路行病灶清除术的26例患者资料纳入B组,采用前后联合入路行病灶清除术的26例患者资料纳入C组.分析比较三组手术相关指标手、Cobb角以及并发症发生情况.结果:C组手术时间最长、B组次之,A组最短;C组术中出血量最多,A组次之,B组术中出血量最少;C组出院时间长于A组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);术后30 d,三组Cobb角低于术前,且C组Cobb低于A组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);三组并发症发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:单纯前入路病灶清除术可缩短中青年腰椎结核患者的手术时间,单纯后入路可减少患者术中出血量,而前后联合入路可降低患者Cobb角.     

红景天苷通过PI(3)K/Akt激活HIF-1α表达抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡

目的:探讨红景天苷激活HIF-1α表达,抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡的可能的信号通路.方法:将原代培养的心肌细胞分为4组:正常对照组、缺氧组、缺氧 100 mg/L红景天苷组、缺氧 100 mg/L红景天苷 LY294002组.MTT法测定细胞存活率,Hoechst33258染色、DNA-ladder检测细胞凋亡,通过免疫荧光染色、Western blot检测细胞Akt、磷酸化Akt、HIF-1α的表达.结果:LY294002处理后,红景天苷对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用被明显减弱,细胞存活率明显下降(P<0.01),细胞凋亡比率明显增加(P<0.01),琼脂糖凝胶电泳特异性"ladder"灰度明显加深,磷酸化Akt、HIF-1α2种蛋白表达水平明显降低.结论:红景天苷对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用,其机制可能是通过PI(3)K/Akt信号通路激活HIF-1α的表达有关.     

胎儿半月板形态观察及盘状软骨成因探讨

本文观察了329例胎儿的1316个内、外侧半月板的形态,测量了其中280个半月板侧份宽度的发育情况,未见盘状畸形及盘状畸形的发生迹象,不支持盘状软骨的先天形成学说。作者设想,盘状软骨是在小儿生后至1岁左右开始形成,其成因可能与小儿膝关节运动方式的变换或受负重影响及某种损伤有关;胎儿外侧半月板侧份宽度较内侧为宽,可能是盘状软骨外侧多见的原因之一。     

外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化

目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。