肺炎链球菌介导大环内酯类及四环素双重耐药性相关元件的研究

目的研究介导肺炎链球菌临床分离株耐大环内酯和四环素药物的基因元件特点。方法 48株耐红霉素肺炎链球菌以PCR检测大环内酯类耐药基因ermB、ermTR、mef与四环素耐药基因tetM及转座子家族Tn916整合酶int,聚合酶链式反应-限制片段长度多态性(RFLP)鉴定mefA和mefE。结果全部菌株均未发现ermTR和mefA基因,48株耐红霉素肺炎链球菌中,仅1株(2.1%)未检出ermB和mefE基因,其余47株均检出ermB和(或)mefE基因,其中ermB 50.0%,ermB+mefE为45.8%及mefE 2.1%;ermB和mefE基因在耐药株中的阳性率分别是95.8%和47.9%;48株肺炎链球菌均检出tetM,int在46株肺炎链球菌中检出占95.8%;45株(93.7%)肺炎链球菌同时存在int、四环素抗性基因和红霉素抗性基因,其中int+tetM+ermB为47.9%,int+tetM+ermB+mefE为45.8%。结论 ermB编码23S rRN(A)甲基化酶致靶位改变是肺炎链球菌对大环内酯药物耐药的主要机制,其次是mefE基因表达主动外排系统导致对大环内酯药物耐药,接合性转座子家族Tn916可能是介导肺炎链球菌对大环内酯类药物、四环素等药物耐药的重要机制之一,并在选择压力下导致耐药菌的广泛传播。     

肺炎支原体培养和药物敏感试验在小儿呼吸道感染疾病中的应用

肺炎是我国儿童常见的疾病,是导致小儿病死的首位原因,肺炎支原体(mycop lasm a pneumon iae,MP)是其常见病原体之一[1]。MP是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物,没有细胞壁,专性细胞内寄生,但能在人工培养基上生长。国内最常用的检测方法是ELISA法和荧光定量聚合酶链反应(FQ     

卵圆孔封堵术治疗偏头痛合并右向左分流的临床研究

目的:评价卵圆孔封堵术治疗偏头痛合并右向左分流(RLS)的临床疗效及安全性。方法:偏头痛合并RLS患者114例随机分为手术组及对照组,各57例;手术组采用卵圆孔封堵术治疗,对照组采用常规药物治疗。观察治疗后1年2组HIT-6评分与评分差值;术后1月内与1年后并发症发生率;术后24 h与1年后残余分流及新发梗死灶情况。结果:治疗1年后,手术组HIT-6评分为(49.57±4.58)分,差值为(14.38±3.57)分;对照组HIT-6评分为(56.85±5.69)分,差值为(8.64±2.24)分,2组差异均有统计学意义(P0.05)。术后1月内发生并发症11例(19.30%),1年后并发症均消失。术后24 h大量残余分流患者8例(14.04%),1年后仅1例(1.92%)存在大量残余分流。治疗1年后,手术组患者7例出现新发梗死灶,对照组17例,2组差异有统计学意义(P0.05)。结论:卵圆孔封堵术可有效改善患者偏头疼症状,安全性高,并可降低脑卒中发病风险。     

FCM联合检测在恶性胸腔积液诊断中的价值

目前临床上对恶性胸腔积液的诊断主要依据胸膜活检或胸腔积液细胞学检测等 ,这些常用方法损伤较大或阳性率较低。流式细胞术 (FCM)能快速精确地进行细胞 DNA定量分析[1 ] 。现就我院的 84例胸腔积液患者应用 FCM进行胸腔积液脱落细胞 DNA定量分析 ,同时与胸水癌胚抗原 (CEA)含量测定相结合 ,并与胸腔积液细胞学检测相比较 ,评价 FCM联合CEA测定在恶性胸腔积液诊断中的临床价值。现报告如下。材料与方法1.一般资料本组男性 5 3例 ,女性 31例 ;年龄在 2 4～ 78岁 ,平均 5 1岁。84例均予常规胸腔积液脱落细胞学检查及胸腔积液脱落细胞…     

叶酸代谢基因多态性与出生缺陷的关系

随着我国新生儿出生死亡率明显降低,出生缺陷问题日益突出。在降低新生儿出生缺陷发生率的众多研究中,发现叶酸吸收代谢途径基因多态性与出生缺陷发生存在明显相关性。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)677C>T多态性与神经管缺损发生明显相关已取得较为一致的结论。但MTHFR 677C>T、MTHFR 1298A>C在唇裂/腭裂、先天性心脏病、唐氏综合征的发生中所起的作用结论尚不统一,并且较少涉及叶酸代谢通路中甲硫氨酸合成酶(MTR)2756A>G、甲硫氨酸合成还原酶(MTRR)66A>G、还原型叶酸载体-1(RFC-1)80A>G多态性与出生缺陷的研究。就叶酸来源、吸收代谢途径及代谢途径关键基因多态性与出生缺陷的相关性进行综述。     

细菌预成酶联合检测在阴道微生态评价中的应用价值

目的：探讨需氧菌性阴道炎（AV）、细菌性阴道病（BV）五项联合检测在阴道微生态评价中的应用价值。方法用传统方法对5000例健康体检者阴道分泌物进行清洁度、阴道pH、革兰染色检查作阴道菌群分析;同时应用AV、BV五项联合检测进行细菌预成酶测定。结果5000例体检者中传统方法检测阴道菌群正常2675例（53.5%）,阴道菌群异常2325例（46.5%）;阴道菌群异常组细菌预成酶检测结果阳性率明显高于阴道菌群正常组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 AV、BV五项联合检测灵敏度高,操作简便,可以作为快速筛查方法应用于临床,结合阴道清洁度等指标可系统评价阴道微生态状况。     

实时荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、D

金黄色葡萄球菌（金葡菌）不仅可以引起感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成，还可以通过分泌外毒素或毒素休克综合征毒素，引起食物中毒和毒素休克综合征。本试验选择FemB、SEA和SED基因分别作为金葡菌菌株、肠毒素A、肠毒素D的靶序列，拟采用Taqman探针技术建立一种快速、准确特异定量检测金葡菌及其肠毒素A、D的方法；探讨肠毒素在食物中毒引起腹泻中的意义。     

急性缺血性脑卒中患者白细胞对血小板聚集的影响及一氧化氮释放

目的探讨缺血性脑卒中患者白细胞与血小板的相互作用及其在中风发病过程中的作用机制和临床意义.方法分别测定40例急性缺血性中风患者富血小板血浆(PRP)加患者白细胞前后和加正常人白细胞前后的血小板聚集率和一氧化氮(NO)含量,同时作白细胞、血小板计数.结果患者白细胞、血小板数和健康对照组无显著差异.加白细胞前,患者血小板最大聚集率和NO含量明显高于对照组(71.63±14.82)%对(63.23±14.30)%(t=2.491,P＜0.05)和(0.386±0.026)μmo1/L对(0.292±0.020)μmo1/L(t=17,407,P＜0.001),加患者白细胞后,血小板最大聚集率为(51.71±15.02)%,明显抑制(t=5.971,P＜0.001),NO浓度为(0.496±0.072)μmol/L,明显升高(t=9.091,P＜0.001),且血小板聚集抑制和NO升高呈负相关.加正常白细胞后的血小板聚集率和NO浓度分别为(67.39±16.62)%和(0.391±0.028)μmol/L,均无明显变化(t=1.205,P＞0.05和t=0.826,P＞0.05).结论缺血性脑卒中患者白细胞激活后通过释放NO对血小板聚集起抑制作用,并和梗死大小、病情轻重及预后有一定关系.     

幽门螺杆菌cheA和cheY基因表达及其产物与细菌趋化的相关性

目的 克隆幽门螺杆菌趋化相关基因cheA和they并构建其原核表达系统,建立幽门螺杆菌体外趋化模型并确定其趋化诱导物质,了解特异性抗体和氯氰碘柳胺对幽门螺杆菌趋化的抑制作用.方法 PCR扩增幽门螺杆菌NCTC11637株全长cheA和cheY基因片段,T-A克隆后测序.构建上述目的基因原核表达系统,采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶成像分析系统检查目的重组蛋白rCheA和rCheY的表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rCheA和rCheY.rCheA和rCheY免疫家兔获得抗血清,用饱和硫酸铵沉淀法和DEAE-32离子交换法提纯IsG,用免疫扩散法检测抗血清及其IsG效价.采用硬琼脂法建立幽门螺杆菌NCTC11637株体外趋化模型并检测11种物质的趋化诱导作用,同时分别观察抗rCheA IgG(rCheA-IgG)和氯氰碘柳胺钠对细菌趋化的抑制作用.结果 PCR扩增获得预期大小的cheA和cheY基因片段,其核苷酸和氨基酸序列与文献报道完全相同.所构建的原核表达系统能有效表达rCheA和rGheY.rCheA和rCheY兔抗血清及其IgG免疫扩散效价均分别为1:4和1:2.盐酸、硫酸和乙酸对该幽门螺杆菌均有趋化诱导作用,一定浓度的rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠均对幽门螺杆菌趋化有抑制作用(P<0.05).结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌NCTC11637株cheA和cheY基因原核表达系统.H~+是诱导幽门螺杆菌趋化的信号物质,rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠均能抑制幽门螺杆菌对H~+的趋化.     

失代偿肝硬化患者血及腹水中—氧化氮测定及临床意义

<正>一氧化氮(Nitric Oxide,N0)是近年来生命科学研究领域中热门课题之一,与临床多种疾病有密切联系.在慢性肝病患者经肝活检中发现,NO增高与肝损害严重程度无关,而与腹水的有无呈非常显著相关,提示增高可能继发于门脉高压及腹水形成.据此,我们对肝硬化腹水中NO含量与白细胞计数作了观察,并对腹水中NO与肝硬化感染性腹水关系作一分析.1对象与方法1.1 对象住院的失代偿肝炎后肝硬化患者47例,诊断符合1995年全国病毒性肝炎学术会议诊断标准.其中男30例,女17例,年龄22岁～70岁,平均45岁,按Child-paugh分级:B级21例,C级26例.肝硬化合并腹水感染诊断标准:①不同程度的腹膜炎表现;㈡腹水白细胞>0.2X10~9/L.多形核细胞>50%,李凡他阳性;③排除癌性腹水.