生理实验中汞污染的预防

分析生理实验中发生汞污染的原因并提出预防措施     

带有6肽组氨酸的HBV S/S145真核表达载体的构建及应用

目的 构建稳定表达带有6肽组氨酸的HBV S/S145蛋白的真核载体.方法 应用PCR技术及体外基因重组技术,将S基因和nt587突变的S基因插入带有his-tag的pxF2RH载体中,扩增6个组氨酸和S/S145基因,最后与经Nhe I、Sal I双酶切的线性载体pCI-neo连接,构建成带有6肽组氨酸的稳定表达S/S145的真核表达载体(简称pCI-his-SY/S145).用脂质体转染的方法将质粒转至人宫颈癌细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中抗原的分泌情况.用Western-blot方法检测细胞中外膜蛋白的表达情况.结果 真核表达载体pCI-his-SY/S145的测序结果与预期大小一致.ELISA方法可检测到细胞上清中的野生型表面抗原,但检测到145突变抗原表达水平低.应用Western-blot方法可以同时检测到野生型和G145R突变的外膜蛋白表达.结论 带有his-tag的重组质粒pCI-his-S/S145可以在Hela细胞中成功表达融合蛋白,且组氨酸可作为检测蛋白的标志.     

进展期大肠癌术前辅助化疗临床效果分析

目的探讨进展期大肠癌接受辅助化疗的临床效果。方法选取64例进展期大肠癌患者且随机分为观察组和对照组,各32例。观察组术前接受FOLFOX-4方案化疗,对照组接受术前常规处理,评价两组术后临床效果。结果两组肛门排气时间和下床活动时间差异有统计学意义(P<0.05);两组住院时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组1、2、3年生存率差异无统计学意义(P>0.05);观察组生活质量优于对照组,差异有统计学意义(χ2=4.73,P<0.05)。结论术前辅助化疗不能明显延长进展期大肠癌患者术生存期,但能促进术后恢复,提高患者生活质量。     

人类精液 DNA 提取方法的探讨及影响因素分析▲

目的建立一种最优化的提取高质量人类精液基因组DNA的方法,为辅助生殖技术男性不育分子生物学科学研究提供技术支持.方法提取人类精液基因组DNA,优化设计实验步骤,研究初始样品类型、初始样品量、二硫苏糖醇(DTT)剂量、蛋白酶K(PK)消化时间、混匀震荡等因素对DNA的提取效果的影响,应用核酸定量和琼脂糖凝胶电泳分析比较各组提取效果的差异.结果应用自然分层后的精液沉淀提取DNA较原始精清可获得较高浓度的DNA.初始样品量为100~150μl时可获得较好的提取效果,随着样本量的增加,DNA提取效果逐渐下降.在样本中加入DTT可以明显提高DNA产量,DTT的加入利于DNA裂解及提取,且增加了DNA的稳定性. PK适宜消化时间为5~8 h;时间过短(<2 h),DNA裂解不全提取效果较差,时间过长(>12 h)则会造成DNA降解.在PK消化时,摇床震荡可以提高DNA产量.结论应用自然分层后的精液沉淀提取DNA,当初始样品量为100~150μl时,在样本中加入1M DTT 20μl,PK消化时间为5~8 h,并在消化时摇床震荡,可以获得高质量的基因组DNA.     

铒玻璃1540nm点阵激光治疗面部瘢痕的疗效观察

目的:评估Lux 1540nm铒玻璃点阵激光治疗面部瘢痕的临床疗效。方法:面部瘢痕患者60例,接受1 540nmnm铒玻璃点阵激光治疗,每隔4周治疗1次,共治疗4次,评估治疗后疗效和不良反应。结果:60例患者中痊愈14例(23.33%),显效27例(45.00%),有效12例(20.00%),无效7例(11.67%),总有效率88.33%。不良反应为治疗即刻疼痛、红斑、水肿、炎症后色素沉着。结论:Lux 1 540nm铒玻璃点阵激光治疗面部瘢痕安全、有效。     

纳米金对人微血管周细胞增殖的影响

目的 观察纳米金(GNP)对人微血管周细胞增殖和G蛋白信号调节蛋白5(RGSS)表达的影响.方法 制备浓度为50 nmol/L直径分别为25、50、100 nm的GNP溶液;体外培养人微血管周细胞株HBVP-1200;光学显微镜观察GNP作用周细胞、在细胞中沉积;噻唑蓝(MTT)比色法检测周细胞增殖;原子力显微镜( AFM)观察周细胞表面形貌;Western blot检测周细胞RGS5蛋白表达.结果 (1)不同组间的GNP( 25、50、100 nm)及对照组,其周细胞增殖率分别为:(147.9±5.9)％、(121.7±3.4)％、(107.6±2.1)％及( 100.0±0.0)％;粒径越小,周细胞增殖率越高(P＜0.05).(2)AFM观察到粒径越小的GNP处理后,周细胞表而形貌变化越明显.主要表现在细胞膜内陷、细胞表面出现较大孔洞,有细胞内吞现象. (3)Western blot检测到粒径越小的GNP,抑制RGS5蛋白表达越明显.结论 GNP促进人微血管周细胞增殖,抑制周细胞RGS5蛋白表达;并且GNP粒径越小,对周细胞影响越明显.当GNP粒径达到100 nm时,对周细胞增殖和抑制RGS5蛋白表达几乎无作用.     

品管圈在降低硬式内镜器械损坏率中的应用

目的观察品管圈在降低硬式内镜器械损坏发生率的应用效果。方法通过品管圈活动方式,分析其对降低硬式内镜器械损坏中的应用效果。结果品管圈活动后,硬式内镜器械损坏的发生率由开展前的0.51%下降到开展后的0.12%,活动前后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。影响因素主要有圈员在工作责任感、积极性、解决问题的能力、团队凝聚力、沟通协调、操作手法方面的能力显著提高。结论开展品管圈活动有利于降低硬式内镜器械损坏发生率。     

人类胚胎发育、精子发生与DNA甲基化关系的研究进展

表观遗传是指基因的核苷酸序列不发生变化,但基因表达却发生了可遗传的改变。DNA甲基化是表观遗传重要的调控机制,它参与了动物胚胎发育、基因印迹和X染色体失活等过程,在基因表达的调控中具有重要作用。DNA甲基化可引起基因组中相应区域染色质结构变化,使染色质高度螺旋化,凝缩成团,失去转录活性。现对DNA甲基化与人类胚胎发育与精子生成的关系等进行综述。     

不同类型精子发生障碍与精子TEKT5基因mRNA的表达相关性研究

目的:探讨不同类型精子发生障碍人群中TEKT5基因的mRNA转录表达情况。方法:应用实时定量反转录聚合酶链式反应(QRT-PCR)的方法,分别以正常、弱精和少精症组cDNA为模板,扩增正常精子和异常精子中TEKT5基因在mRNA水平的差异。结果:正常组与少精组中TEKT5的表达量均显著高于弱精组(0.681 vs.0.316,P<0.05;0.527 vs.0.316,P<0.05),而正常组与少精组之间差异无统计学意义(0.681 vs.0.527,P>0.05)。结论:TEKT5基因表达是维持精子正常活力所必需的,男性精子TEKT5基因表达减少是精子活力低下的原因之一。