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猪细小病毒PCR检测与分离研究 总被引:3,自引:0,他引:3
根据猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2基因序列,设计合成1对引物,建立了检测PPV的PCR方法。检测14份临床组织,检出阳性11份,阳性检出率为79.5%。阳性样品扩增产物用EcoRⅠ酶切得到了预期的结果,对PCR产物进行测序,测序结果与已发表的PPV基因核苷酸序列比较,同源性达99%~100%,所编码的氨基酸同源性为93%~100%。从PCR检测阳性的一份病料组织中分离出1株PPV。试验证明,建立的PPVPCR检测方法特异性强、敏感性高,适用于临床样品的快速检测。 相似文献
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采用B病毒(BV)作为抗原的ELISA法和人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的酶免疫(EIA)法分别检测食蟹猴血清中BV抗体和BV相关抗体,结果BV ELISA法和HSV-1EIA法阳性检出率均为10.9%(5/46),两者符合率为100%。这一结果为食蟹猴的BV抗体监测和进出口检验提供参考。 相似文献
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鸭疫里默氏杆菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank登录的鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白(OmpA)基因保守区序列,设计引物和探针,建立了直接检测鸭疫里默氏杆菌的实时荧光定量PCR快速方法。10倍梯度稀释RA菌株制备DNA模板测定方法的灵敏度,结果可在8.0×103CFU/mL浓度下特异地检测出目的菌,最低能检测到RA的DNA模板为8.0拷贝/μL;对鸭源大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌进行检测,结果均为阴性,建立的实时荧光定时PCR方法特异性强。用RA菌株人工感染雏鸭,感染后定时采集咽喉拭子、泄殖腔拭子、心血、肝脏、肺脏、脑,分别用实时荧光定量PCR检测,对脏器进行病原菌分离。结果表明,1/10半数致死量接种组,感染后8 h从心血、肝脏、脑组织检测到RA核酸,16 h后全部试样呈阳性;24 h首先从肝脏分离到RA,心血、肝脏、肺脏、脑组织均分离出RA。心血和脏器RA实时荧光定量PCR阳性检出率为63.8%(51/80),RA分离率为28.8%(23/80)。10个半数致死量接种组,1 h即可从咽喉拭子、心血和肝检测到RA核酸,5 h全部样品为阳性;5 h从肺和脑分离到RA。RA人工感染鸭的心血、肝脏、肺脏、脑实时荧光定量PCR阳性检出率为86.3%(69/80),RA分离率为60%(48/80)。用加热裂解法提取样品RA DNA只需30 min,建立的实时荧光定量PCR检测RA只需2 h,适用于RA的快速诊断、流行病学调查、种鸭引进隔离检疫、活鸭及其产品国内市场和进出口检验检疫。 相似文献
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仔猪水肿病病原分离鉴定及药敏试验 总被引:2,自引:0,他引:2
从临床出现仔猪水肿病症状死亡的仔猪心血、淋巴结和水肿液中分离到3株细菌,分别命名为GP7-1、GP8-1、GP8-3。经细菌形态学观察、鉴别培养、生化分析及血清型鉴定确诊为仔猪水肿病大肠杆菌,其血清型分别是O101、O147和O139,3株分离菌均对小白鼠有致病性,致死率分别为20%、100%、40%。药敏试验结果表明,3株分离菌均对丁胺卡那、头孢三嗪、头孢哌酮、头孢噻肟、氧哌嗪青霉素高度敏感,对头孢唑啉、卡那霉素、氯霉素、链霉素、复方磺胺、利福平、氨苄青霉素耐药。 相似文献
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猪细小病毒N株弱毒苗的免疫效果观察 总被引:2,自引:2,他引:0
经调查,广西猪群普遍存在猪细小病毒感染[1]。为了有效防制该病,本研究室已研制出能预防猪细小病毒感染的弱毒疫苗(简称PPV-N株弱毒苗)。该弱毒苗用于预防猪细小病毒引起的繁殖失败,具有良好的免疫原性和安全性[2]。我们用四批PPV-N株弱毒苗对广西多个流行该病的猪场的后备母猪进行免疫,取得了良好的效果,现将结果报告如下。1 材料和方法1.1 PPV-N株弱毒苗本实验室研制,种毒按蒋玉雯等[2]的方法进行培养。1.2 试验动物500克左右健康青年豚鼠,并经PPV-HI检测为阴性。1.3 猪细小病毒… 相似文献
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气雾接种鸡新城疫和鸡痘联苗盘宝进编译郑儒标校广西兽医研究所530001对鸡群的免疫,气雾接种最为方便和有效。小鸡对鸡新城疫病毒(NDV)和鸡痘病毒(FPV)高度易感。用10日龄鸡胚增殖NDV疫苗F株和R2B株,已高度致弱的FPV疫苗HP1株用12日龄... 相似文献