单增李斯特菌作为疫苗载体的研究进展

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytohenes)简称单增李斯特菌(LM),是一种革兰氏阳性兼性厌氧、胞内寄生菌,对环境耐受性强,可在较高的盐浓度(可高达40%NaCl)以及宽泛的pH(pH3~12)和温度范围(0~45℃)内生长,并可形成夹膜,因而LM     

鼠抗人天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体的制备与肿瘤表达检测

目的:通过制备抗天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体(mAb),检测ASNS在不同肿瘤中的表达,探索其表达的意义。方法:诱导表达融合蛋白MS2-ASNS,以纯化的MS2-ASNS蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0融合,以融合蛋白MS2-ASNS和MS2-PAI通过间接ELISA双筛和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA和Western blot方法对抗ASNS mAb效价、特异性及亲和力进行鉴定。IHC技术检测ASNS在肿瘤细胞株及肿瘤组织中的表达。结果:获得2株能高效分泌特异性抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株F4-15、F4-16,亚类均为IgG2a。间接ELISA结果表明制备的抗体有很好的特异性,抗体效价均达到1∶5×105。Western blot鉴定抗ASNS mAb能特异性识别肿瘤细胞株中的ASNS。IHC技术检测天然ASNS在胃癌细胞株SGC-7901和肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7402、HepG2及肺癌、食管癌组织中均为胞质表达。结论:制备的抗ASNSmAb特异性强,可检测ASNS在多种肿瘤中的表达,为进一步研究ASNS在特定肿瘤如中线鼻/鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达奠定了基础。     

丙型肝炎疫苗研究的新理念、挑战与策略

丙型肝炎病毒（HCV）感染是引起慢性肝病的主要原因之一,严重危害人类健康,目前抗病毒治疗的标准方案为聚乙二醇干扰素α（PEG-IFN-α）联合利巴韦林,其有效率仅为50%70%,且疫苗研究进展缓慢,已成为严峻的公共卫生问题。近10多年来,对HCV感染发病机制、保护性免疫应答和病毒持续感染机制的认识取得了很大进展,中和抗体以及CD4＋和CD8＋T细胞在内的强烈的T细胞免疫应答已被证明与HCV的清除相关,这将是研制丙型肝炎疫苗的希望所在。当前HCV疫苗的研究主要集中在多肽疫苗、核酸疫苗、病毒载体疫苗、重组多表位疫苗、以抗原递呈细胞为载体的树突状细胞（DC）疫苗等,已有多种疫苗正在研制并进行进入临床试验前的测试。我们结合多年来对HCV的研究基础,通过与国内外同行交流,提出变＂单纯预防＂为＂防治结合,以诱导持续免疫应答和维持病毒抑制状态为基本目标＂的HCV疫苗研究新理念,发展以诱导细胞免疫为主的预防和治疗性疫苗,尤其是既能在体内有效激发HCV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应,又能维持CD4＋记忆T细胞功能的治疗性细胞疫苗。本文综述关于HCV保护性免疫应答及持续感染的机制,HCV疫苗研究新理念,目前面临的挑战以及研究策略。     

肝细胞核因子4在肝细胞分化和成熟中的作用

肝细胞核因子4在肝脏发育及肝细胞的分化、成熟过程中有着重要的调控作用,通过与肝特异基因启动子结合而影响肝特异基因的表达,促进肝细胞极化结构的形成,调节肝细胞的物质代谢和生物转化,并且能够抑制肝脏肿瘤的发生。     

T细胞疫苗对HCV的清除作用

1 材料和方法 1.1 材料 雌性BALB/c小鼠(H-2d) 5～6 wk龄; P815细胞(H-2d,仅表达MHC Ⅰ类抗原,不表达MHCⅡ类抗原);SP2/0(H-2d)细胞;表达丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的质粒载体pcDNA-C、pcDNA-CE1、pcDNA-CE1E2[1];腺病毒表达载体pAd.HCV-C、pAd.HCV-CE1、pAd.HCV-CE1E2[2];Na51CrO4;抗CD8 单克隆抗体;小鼠抗HCV C单克隆抗体;重组鼠源性IL-2;2-巯基乙醇等.     

聚乙二醇干扰素α-2a与替比夫定对慢性乙型肝炎患者肾功能影响的比较

目的观察聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α~(-2)a与替比夫定(Ld T)治疗对慢性乙型肝炎(CHB)患者肾功能的影响。方法回顾性分析2007年7月~(-2)013年3月于第四军医大学唐都医院进行Ⅳ期临床试验的初治HBe Ag阳性CHB患者临床资料,共纳入患者92例,其中39例皮下注射PEG-IFNα~(-2)a(PEG-IFNα~(-2)a组),180μg/周;53例接受Ld T抗病毒治疗(Ld T组),600 mg/d。比较基线、治疗24周和48周时患者HBV DNA阴转率、ALT复常率、血清肌酐、尿素氮和估算肾小球滤过率(e GFR)的变化,其中e GFR分别采用慢性肾病流行病学合作研究(CKD-EPI)和简化的肾病饮食改良(MDRD)2种方法进行计算。对于符合正态分布的计量资料2组间比较采用独立样本t检验,不符合正态分布的计量资料2组间比较采用Wilcoxon秩和检验,组内治疗前后比较采用重复测量数据的方差分析,在进行重复测量数据方差分析前对资料进行Mauchly球形检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。结果治疗过程中,PEG-IFNα~(-2)a组血清肌酐水平在24周[(0.68±0.11)mg/dl]和48周[(0.67±0.11)mg/dl]均较基线明显降低[(0.75±0.11)mg/dl],差异均有统计学意义(P值均0.000 1),e GFR水平在24周[(128.30±10.98)ml·min~(-1)·1.73m~(-2)(CKD-EPI法)/(143.9±25.82)ml·min~(-1)·1.73m~(-2)(MDRD法)]和48周[(128.00±10.17)ml·min~(-1)·1.73m~(-2)(CKD-EPI法)/(144.30±24.68)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(MDRD法)]均较基线水平[(123.10±9.64)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(CKD-EPI法)/(127.40±20.16)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(MDRD法)]明显升高,差异均有统计学意义(P值均0.000 1)。Ld T组患者治疗24周时血清肌酐[(0.73±0.13)mg/dl]及e GFR水平[(122.30±11.22)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(CKD-EPI法)/(128.10±20.67)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(MDRD法)]与基线水平[血清肌酐:(0.74±0.13)mg/dl;e GFR:(121.50±11.21)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(CKDEPI法)/(126.40±20.96)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(MDRD法)]比较差异均无统计学意义(P值均0.05),48周时血清肌酐(0.68±0.12 mg/dl)较基线明显降低,e GFR[(125.30±11.55)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(CKD-EPI法)/(138.0±25.94)ml·min~(-1)·1.73 m~(-2)(MDRD法)]较基线明显升高,差异均有统计学意义(P值均0.000 1)。治疗48周时,Ld T组的HBV DNA阴转率和ALT复常率均高于PEG-IFNα~(-2)a组(HBV DNA阴转率:60.4%vs 38.5%;ALT复常率:75.5%vs 33.3%),差异均有统计学意义(χ~2值分别为6.17、16.34,P值分别为0.037、0.000 1)。结论 PEG-IFNα~(-2)a和Ld T对CHB患者肾功能均无明显影响。     

单核细胞介导的固有免疫在丙型肝炎感染中的作用

<正>全球目前有1.3~1.7亿丙肝患者,每年以300~400万的速度增长~([1]),主要是由于输注污染血液制品、毒品注射和不安全的治疗感染和传播病毒。丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染人体后,首先经历一个急性感染过程,在急性感染的早期,HCV强烈复制,激活固有免疫反应,在肝脏诱导干扰素刺激基因(IFN-stimulated genes,ISGs)的形成,诱导和激活I和Ⅲ型干扰素(interferon,IFN),限制病毒复制,但不能完全清除病毒。在急性感染晚期,HCV特异性T细胞招募至肝脏,通过细胞毒性和γ-IFN介导的非细胞毒性机制有效地抑制病     

原发性肺癌患者血清sIL-2R和TNF-α检测的临床意义

机体免疫功能低下或免疫调节功能紊乱是肿瘤发生、发展的重要因素.近年许多研究表明,恶性肿瘤患者细胞因子的产生及其受体表达异常,且与肿瘤的发生发展、疗效及患者的预后有一定的关系[1,2].IL-2和TNF-α是细胞因子网络中的重要组成部分,具有多种生物学活性,在抗病毒、抗肿瘤免疫及免疫调节中发挥着重要的作用[2-5].我们观察了73例原发性肺癌患者血清可溶性IL-2受体(sIL-2R)和TNF-α水平的变化,并探讨了其与肿瘤的临床分期及治疗之间的关系.     

丙型肝炎病毒多表位疫苗研究的新进展

丙型肝炎病毒引起慢性肝脏疾病的主要原因之一,HCV疫苗一直是研究的热点.多表位疫苗是指通过筛选与组合优势抗原表位(包括T细胞、B细胞表位)的新型核酸疫苗,目的在于产生高效的细胞免疫和体液免疫应答进而清除病毒.其优势在于通过选择最具免疫保护潜力的表位以覆盖尽量多的病毒亚型和诱导机体全面的抗病毒免疫应答.现就近年来国内外在丙型肝炎病毒多表位疫苗的研究做一介绍.     

恶性肿瘤病人外周血T细胞亚群变化的观察

T淋巴细胞是参与肿瘤免疫的主要活性细胞,是抗肿瘤免疫反应的关键。肿瘤的发生、发展与机体免疫监护功能低下密切相关。T淋巴细胞亚群的检测是判断细胞免疫功能的最新指标之一,恶性肿瘤病人外周血T细胞亚群的变化目前国内外已有一些报道,结果不尽一致。我们用武汉系列单克隆抗体对93例肿瘤病人外周血的CD_3~+(总T细胞)、CD_4~+(辅助/诱导T细胞)CD_8~+(抑制/细胞毒T细胞)细胞变化