人IL-6、TNF-α对登革病毒感染人树突状细胞的影响

目的:探讨IL-6和TNF-α对登革病毒感染人树突状细胞(DC)的影响。方法:从人外周血中常规分离单核细胞,以GM-CSF和IL-4诱导成DC并进行形态学特征、细胞表型和淋巴细胞刺激能力的鉴定。用不同浓度的IL-6、TNF-α作用于Ⅱ型登革病毒(DV2)感染的DCs,于感染后6、24、48、72、96h收集上清,采用甲基纤维素微量病毒空斑法检测病毒的滴度,以MTT比色法测定IL-6和TNF-α对DV感染DC及正常DC数量的变化。结果:中、低浓度的IL-6对DC中DV2的增殖均有增强作用;高、中浓度的TNF-α对DC中DV2的增殖具有抑制作用。IL-6和TNF-α对DV感染DC及正常DC数量无明显影响。结论:IL-6和TNF-α通过对DC的影响在DV2感染中具有重要作用。     

TNFα和IL-10在巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞中的作用

目的:研究TNFα和IL-10对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(HEL)的影响,以及感染细胞产生TNFα的变化,探讨有关细胞因子在HCMV感染免疫中的作用。方法:用不同浓度的TNFα和IL-10作用于HEL,24h后感染病毒,研究TNFα和IL-10对HCMV感染HEL的影响。用HCMV感染HEL,感染后(4、24、48、72、96h)分别收集培养上清液,用ELISA法检测TNFα含量。结果:在病毒感染前,中、高浓度TNFα或低、中浓度IL-10可抑制HCMV在HEL内的增殖。HCMV感染HEL后,细胞产生TNFα的量无明显改变。结论:TNFα和IL-10在HCMV感染免疫过程中起作用。     

免疫介导小鼠再障模型方法的改进

目的：探讨建立免疫介导小鼠再障模型中的最适照射剂量。方法：采用不同剂量的[⁶⁰Co-γ]射线对BALB/c小鼠进行全身照射，并输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞，于照射并输入细胞后第14 d处死实验小鼠观察股骨骨髓增生程度及病理改变，以确定诱导再障发生的情况。结果：6.0 Gy、5.5 Gy和5.0 Gy各照射剂量再障诱导组的再障发生率分别为85.7%、84.6%和22.2%。各实验组小鼠第14 d存活率分别为57.1%、100%和100%。结论：本实验条件下，5.5 Gy的照射剂量对建立免疫介导小鼠再障模型较为合适。     

NOD/SCID小鼠人源化TCR Vβ亚家族T细胞分布与克隆性分析

目的 应用脐血CD34 细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化TCR Vβ亚家族T淋巴细胞分布与克隆性.方法 磁珠分选法分离脐血中CD34 细胞,分别经尾静脉输入亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠.第6周处死小鼠提取外周血、骨髓、胸腺的RNA,RT-PCR扩增人TCR Vβ亚家族基因,并用基因扫描进行T细胞克隆性分析.结果 采用RT-PCR技术在模型小鼠骨髓中检测到部分人TCR Vβ亚家族基因Vβ1、2、9、13、19.经进一步基因扫描分析,发现部分TCR Vβ亚家族基因Vβ9、13、19呈寡克隆表达.结论 在NOD/SCID模型可重建分化成熟的TCR Vβ亚家族T细胞.未能检测到全部人TCR VβT细胞的原因可能与免疫重建不完全或存在移植物抗宿主的反应有关.人源T淋巴细胞在模型鼠骨髓中分化成熟.     

RT-PCR-RFLP技术在登革病毒感染早期诊断中的应用

目的建立疑似登革病毒感染的病原快速鉴定分型方法,并对2004年我院收治的一例疑似登革感染患者进行确诊。方法用免疫层析法(ICT)检测DV-IgM抗体、免疫斑点法(DIBA)检测DV-IgG抗体对疑似登革病毒感染患者进行动态监测;用登革病毒通用引物通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增患者血清中的登革病毒核酸,用限制性内切酶BstnⅠ酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鉴定分型。结果发病第5天患者DV-IgM抗体开始呈弱阳性,第9天DV-IgM抗体滴度达到1∶8,第13天DV-IgM抗体滴度开始下降;发病第9天患者DV-IgG抗体呈弱阳性,第12天DV-IgG抗体滴度达到1∶8。用RT-PCR-RFLP检测疑似登革病毒感染患者早期血标本,确定2004年我院收治的一例患者为登革Ⅰ型病毒感染所致。结论利用RT-PCR-RFLP技术对登革病毒进行分型鉴定具有敏感、特异、快速的优点,与登革热抗体检测结合起来应用可缩短疑似登革感染的确诊时间、降低检测成本,具有很好的社会效益和经济效益。     

复方中药对人宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响

目的研究观察复方中药提取物（葆盛口服液）对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其作用机制。方法以人宫颈癌Hela细胞为研究对象,用MTT法观察葆盛口服液对Hela细胞生长的影响,以肝细胞株7701作为比较;流式细胞仪分析Hela细胞凋亡以及凋亡基因Fas的表达情况,以顺铂作为对照。结果葆盛口服液对Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用,流式细胞术发现葆盛口服液能促进Fas表达,诱导Hela细胞凋亡。结论葆盛口服液诱导细胞凋亡,在抗肿瘤作用中可能具有重要意义。     

枸骨叶两种溶媒萃取物抑制念珠菌机制探讨

目的：本草纲目记载，枸骨叶味苦，微涩，性寒。有清热解毒、止渴生津的功能。本实验旨在探讨枸骨叶极性萃取物成分对病原性念珠菌的抑菌活性及作用机制，以期能开发对临床有实用价值的天然抗真菌药物。材料与方法：枸骨叶5k叠用95％酒精浸提3次，浓缩得枸骨叶浸膏。浸膏依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩后得到2个萃取部分ⅠⅠ、ⅠⅡ。菌种为白念珠菌（ATCC10231）与光滑念珠菌（ATCC2001）。采用RPMI 1640培养液2倍稀释法稀释各实验样品，使成500-3．91mg／L的系列浓度。于96孔板内依次加入倍比稀释浓度的样品100μL，3列复孔。同时设溶剂对照、阳性对照和阴性对照孔。最后加入相应念珠菌菌液100μL于各孔中，置湿盒内35℃孵育24h，终点判定采用MTT法。透射电镜分析枸骨叶萃取物抗念珠菌机制。     

SARS-CoV基因编码的主要蛋白研究进展

SARS病毒(SAP6-CoV)是今年SAPS爆发流行的病因,引起全球关注。目前,许多学者对SARS-CoV进行了广泛的研究,本文综述了SARS-CoV基因编码的主要蛋白及其功能的研究进展。     

严重急性呼吸道综合征冠状病毒包膜蛋白的研究

2002年11月以来,中国大陆、中国香港和台湾地区等地先后经历一次严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coro-navirus,SARS-CoV)感染的流行,由于其传播快,病情凶险,病死率高,又是新发现的传染病,目前世界上尚不清楚其真正的传染源,未明确其确实的传播途径;还不完全清楚其致病和机体对其免疫的机制;尚未开发出可靠的疫苗,也未找到特效的治疗