氟达拉滨吸入治疗小鼠气道炎症的实验研究

目的:评价气道滴入氟达拉滨对气道炎症的作用及在体内抑制信号转导和转录活化因子1(STAT1)的效果,从而探讨其作为治疗肺部炎症性疾病药物的可能。方法:清洁级ICR小鼠36只,脂多糖(LPS)制备肺部炎症模型后经鼻滴入不同浓度的氟达拉滨(fludarabine)溶液,观察动物一般状况、肺部病理和STAT1蛋白表达的变化。结果:不同浓度的氟达拉滨滴入均能抑制LPS导致的体重下降和肺部炎症,并抑制肺部STAT1表达。结论:氟达拉滨气道滴入能显著抑制气道炎症和改善动物一般状况,其机制可能与抑制STAT1的表达有关。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺内树突状细胞的影响

目的 :研究不同浓度三氧化二砷 (arsenictrioxide ,As2 O3)对哮喘小鼠肺内树突状细胞 (dendriticcell,DC)分布、募集的影响及其作用机制。方法 :BALB/c小鼠 5 0只随机分为 5组 ,即对照组、哮喘组、低剂量 (1mg/kg)As2 O3组、中剂量 (5mg/kg)As2 O3组和高剂量 (10mg/kg)As2 O3组。采用免疫组织化学染色技术检测小鼠肺、气道DC ;计算机图像分析技术对DC进行定量测定 ;扫描电镜分析DC形态。结果 :对照组小鼠整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个NLDC -14 5 +DC网络 ,NLDC -14 5 + DC密度从大气道到小气道分别为 (5 0 0± 5 0 )个 /mm2 到 (60± 10 )个 /mm2 上皮面积 (P <0 0 5 ) ,扫描电镜下DC呈典型的树突状形态 ;哮喘组小鼠肺内NLDC -14 5 + DC密度较对照组显著增加 (P <0 0 1) ;哮喘小鼠经As2 O3处理后 ,肺内DC密度皆显著下降 (P <0 0 1) ,但三种不同浓度砷剂处理组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :下调肺内DC数量可能是As2 O3治疗哮喘的一个重要机制 ;低剂量As2 O3治疗哮喘既安全又有效 ,具有潜在的应用前景。     

吲哚胺-2,3双加氧酶在支气管哮喘和过敏症中的作用

变态反应(过敏症)是指机体对某些抗原初次应答后,再次接触相同抗原刺激时,产生以机体生理功能紊乱或组织损伤为主的一种特异性免疫应答.吲哚胺-2,3双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase,IDO)既是细胞内催化色氨酸分子沿犬尿酸途径进行分解代谢的限速酶,也是一种重要的免疫调节酶.越来越多的研究表明,免疫耐受机制缺陷在变应性疾病中扮演着重要的角色,而抗原递呈细胞(APC)如树突状细胞(DC)表达的IDO可通过多种机制诱导机体产生免疫耐受.因此,通过增加DC表达IDO而诱导免疫耐受,有望成为治疗支气管哮喘、变应性鼻炎和特应性皮炎的新靶点.     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的 研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用.方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组.卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型.末次激发24 h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF) Th2细胞因子(IL-4和IL-13).Western blot检测肺组织IDO蛋白表达.结果 正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P＜0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组肺组织IDO)较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P＜0.05).结论 布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关.     

变应性鼻炎和哮喘的综合诊治

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)也称过敏性鼻炎,是特应性个体接触变应原所引起的以IgE介导的Ⅰ型变态反应为特征的鼻黏膜慢性炎症性疾病,可诱发或伴发支气管哮喘(bronchial asthma,简称哮喘)、鼻息肉、中耳炎和结膜炎等变应性疾病[1,2].AR是一种常见病,全球10％～25％的人受其困扰,粗略估计我国每年至少有3千万人罹患AR.喷嚏、清涕、鼻塞和鼻痒是四个典型的症状.     

极罕见的致命性气管Rosai-Dorfman病:NF-κB作用探讨

Rosai-Dorfman病,亦称窦组织细胞增生症伴巨大淋巴结病(SHML),由美国Rosai和Dorfman于1969年首次报道.这是一种罕见的非肿瘤性组织细胞增生症,临床表现为双侧无痛性颈部淋巴结增生以及低热、ESR增快、白细胞增多和高γ球蛋白血症.     

支气管哮喘患者血清对内皮穿越模型中单核细胞分化为树突状细胞的作用

目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者血清和正常血清对内皮穿越模型中单核细胞向树突状细胞(DC)分化和功能的作用及其机制.方法 在江苏省哮喘联盟数据库中选择2008年5月至2009年5月轻～中度哮喘患者12例,募集匹配的健康志愿者12名,常规分离血清和外周血单个核细胞,免疫磁珠法获得单核细胞.选择健康产妇5名,胰酶消化法获得人脐静脉内皮细胞(第2代),培养融合至内皮细胞单层.在内皮细胞上方加入单核细胞及哮喘血清(哮喘组)或正常血清(对照组),构建内皮穿越模型.硝酸银染色法观察单核细胞来源的树突状细胞(MDDC)迁移行为.于48 h收集MDDC,扫描电镜观察形态学特征,电泳迁移率实验检测核因子κB(NF-κB)活性,流式细胞术、ELISA和混合淋巴细胞反应分别检测其表型和功能.结果 (1)在内皮穿越模型中,单核细胞2 h后发生正向穿越,48 h后发生逆向穿越并分化为DC.(2)与穿越前单核细胞[CD14(81±6)%、人白细胞抗原DR(HLA-DR)(24±5)%、CD80(2.8±2.0)%、CD86(14±4)%、CD83(0.9±0.8)%]比较,对照组MDDC的CDi4[(20±5)%]显著下降(F=49.01,P＜0.05)、HLA-DR、CD80、CD86和CD83[(43±4)%、(17.9±3.5)%、(43±11)%和(6.7±1.8)%]均显著增高(均P＜0.05),但CD83仍较低,为未成熟DC.(3)与对照组比较,哮喘组MDDC的HLA-DR和CD86[(55±6)%和(59±12)%]相仿(F值分别为15.29和35.97,均P＞0.05)、CD80和CD83[(49.7±10.2)%和(30.2±6.8)%]显著增高(F值分别为34.01和20.68,均P＜0.05),为成熟DC.并且,哮喘组MDDC呈典型的树枝样突起,其NF-κB活性、白细胞介素-12 P70水平和T细胞增殖作用[(100±11)%、(568±43)ng/L和(2033±198)cpm]较对照组[(12±3)%、(220±35)ng/L和(952±64)cpm]显著增高(均P＜0.05).结论 哮喘血清可诱导内皮穿越模型中单核细胞向DC异常分化成熟,并与NF-κB过度激活有关.该模型为剖析哮喘免疫学发病机制和筛选新型抗哮喘药物建立了新的体外实验平台.

Abstract：

Objective To explore the effect of asthmatic and healthy serum on differentiation and function of monocyte-derived dendritic cells (MDDC) in a transendothelial trafficking model. Methods The sera and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were separated from 12 asthmatic patients and 12 healthy volunteers, and monocytes were selected from PBMC using magnetic beads. The trypsin-digested human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) at passage 2 from 5 healthy lying-in women were used to construct the transendothelial trafficking model under asthmatic or healthy serum, wherein MDDC were identified by silver nitrate staining and scanning electron microscopy. Nuclear factor κB (NF-κB) activity was determined by electrophoretic mobility shift assay. Flow cytometry, ELISA and mixed leukocyte reaction were relevantly utilized to detect the phenotype, cytokine and T cell proliferation. Results ( 1 ) Monocytes traversed through HUVEC monolayer after 2 h, and reverse-transmigrated to develop into DC 48 h later. ( 2 ) The healthy serum stimulated monocytes into immature MDDC with lower CD14 [ ( 20 ±5)%] (F=49.01, P＜0.05), and higher HLA-DR, CD80, CD86 and CD83 [(43 ±4)%, (17.9 ±3.5)%, (43 ± 11)% and (6.7 ± 1.8)%, respectively] (F= 10.35 -40.17, all P＜0.05) than monocytes did before transmigration at 0 h [ CD14(81 ±6)%, HLA-DR (24 ±5)%, CD80(2. 8 ±2. 0)%,CD86( 14 ±4)% and CD83(0. 9 ±0. 8)%, respectively]. (3) The asthmatic serum stimulated monocytes into mature MDDC, characteristic of dendrites, with similar HLA-DR and CD86 [ ( 55 ± 6 ) % and ( 59 ±12)%] (F=15.29 and 35.97, all P ＞0.05), higher CD80 and CD83 [(49.7 ± 10.2)% and (30.2 ±6. 8) % ] ( F = 4. 01 and 20. 68, all P ＜ 0. 05), accompanied by increased levels of NF-κB activity, IL-12 p70 and T cell proliferation [ ( 100 ± 11 )%, (568 ±43) ng/L and (2033 ± 198) cpm, respectively] (F=49. 23 - 350. 84, all P ＜ 0. 05 ) relative to the healthy serum-stimulated immature MDDC [ ( 12 ± 3 ) %,(220 ± 35) ng/L and (952 ± 64) cpm, respectively ]. Conclusion The asthmatic serum induces mature MDDC in association with NF-κB overactivation in the transendothelial trafficking model, which provides a promising experimental platform for both investigation of immunological mechanisms in asthma and screening of novel anti-asthma drugs in vitro.     

Toll样受体4介导的Th2免疫在支气管哮喘中的作用

支气管哮喘(简称哮喘)是一种以Th2优势免疫为特征的慢性气道炎症性疾病.Toll样受体4(TLR4)是表达在固有免疫细胞表面的模式识别受体,与病原体相关分子模式结合并启动细胞内信号转导.脂多糖介导的TLR4信号转导激活核转录因子NF-κB,引起固有免疫细胞活化.一方面,分泌多种促炎症细胞因子、参与炎症形成,并促进抗原递...     

靶向Toll样受体4治疗支气管哮喘的价值

<正>支气管哮喘(哮喘)是多基因参与的具有遗传易感性的慢性气道炎症性疾病,其发病涉及多种炎症细胞、炎症介质和复杂的细胞因子网络,以血清IgE增高、气道炎症、气道高反应性和气道重塑为显著的临床特征~([1])。Toll样受体(Tolllike receptors,TLR)是果蝇受体Toll同源物,作为固有免疫系统的一种重要的模式识别受体,连接着机体固有免疫和适应性免疫。目前已鉴定人类14种TLR。越来越多的证据表     

预真空高温高压蒸汽对手术包的灭菌效果观察

目的验证采用预真空高温高压蒸汽对骨科手术包和妇科手术包的灭菌效果。方法将大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌作为指示菌,包裹于手术包内进行预真空高温高压蒸汽灭菌处理,以此来验证预真空高温高压蒸汽灭菌的灭菌效果。结果预真空高温高压蒸汽灭菌对妇科手术包中4种试验菌株灭菌率为100.0%,对骨科手术包中的大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞和金黄色葡萄球菌的灭菌率均为100.0%,对骨科手术包中的蜡样芽胞杆菌灭菌率为85.7%。结论预真空高温高压蒸汽灭菌能够满足绝大部分手术包的灭菌要求,但是在实际应用过程中,需要对于其灭菌效果需要进行验证。