血清血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子-1水平与胸腔镜食管癌根治术后食管胃吻合口漏的相关性研究

目的 探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)-1水平与胸腔镜食管癌根治术后食管胃吻合口漏的关系。方法 2015年9月～2022年9月我院收治的食管癌病人425例,根据术后发生食管胃吻合口漏情况分为吻合口漏组(31例)和无吻合口漏组(394例)。检测血清VEGF、IGF-1水平,分析影响胸腔镜食管癌根治术后食管胃吻合口漏发生的危险因素以及VEGF、IGF-1预测术后食管胃吻合口漏发生的价值。结果 吻合口漏组术后血清VEGF、IGF-1水平降低,无吻合口漏组血清VEGF、IGF-1水平增高,吻合口漏组术前、术后1天、术后2天、术后3天血清VEGF、IGF-1水平均低于无吻合口漏组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后肺部感染、低白蛋白、术后3天VEGF、术后3天IGF-1与术后食管胃吻合口漏有关(P<0.05)。术后3天VEGF、术后3天IGF-1水平预测术后食管胃吻合口漏的曲线下面积为0.675、0.655,联合两项指标曲线下面积为0.841,高于单独指标(Delong z=3.752、3.218,P<0.05)。结论 胸腔镜食管癌根治术后吻...     

Living和HIF-1α在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的讨论凋亡抑制蛋自Livin和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管癌的发展、侵袭和转移的关系。方法应用免疫组化SP法检测49例食管鳞状细胞癌组织及37例相应正常食管黏膜组织中Livin和HIF—1α的表达情况。结果49例食管鳞状细胞癌组织中分别有27例Livin表达阳性（55．1％）和35例HIF—1α表达阳性（71．4％）,明显高于相应正常食管组织（P〈0．01）;两者的表达均与癌组织浸润深度和淋巴结转移相关,其中HIF-1α与癌组织分化程度相关（P〈0．05）,而Livin与编组织分化程度不相关（P〉0．05）。Livin与HIF-1α的表达之间不存在相关性。结论检测Livin和HIF-1α蛋白有助于评估肿瘤的生物学行为．并有利于食管鳞状细胞癌患者的临床治疗决策。     

Wnt-1在非小细胞肺癌中表达的临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Wnt-1的表达及其临床意义.方法 用山羊抗人Wnt-1多克隆抗体(G-19,sc-6280)对60例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色,并与15例肺良性病变比较.结果 Wnt-1在肺鳞癌、腺癌中都有较高的表达,其阳性率分别为55.6%、62.5%;在肺良性病变中,阳性率为13.3%.两者与对照组相比均具有统计学意义(P<0.05).肺鳞癌、腺癌与肿块直径、病理分期相关(P<0.05),且鳞癌与淋巴结转移相关(P<0.05).结论 Wnt-1的过度表达与NSCLC的发生、发展和预后等密切相关,对NSCLC的诊断、治疗有一定的指导意义.     

MDM2多肽抑制剂的发现与评价

目的:寻找MDM2的多肽抑制剂，从多角度探讨多肽药物在靶向肿瘤治疗中的潜在价值。方法:通过分子模拟对接技术对已有多肽库中的102条多肽进行结合测试；使用Alpha-lisa技术，分析多肽对MDM2与p53相互作用的影响；BIAcore技术研究多肽与MDM2的相互作用，及对MDM2和p53之间结合的影响；Western Blotting法检测多肽对MCF-7细胞中MDM2、p53及p21表达的影响。结果:Alpha-lisa对分子对接中得分较高的多肽进行验证，发现含苯环结构的Peptide 58:Ser-Tyr-Val-Trp及Peptide 95:Ala-Ser-Asp-Phe两条多肽对MDM2与p53结合破坏较大，分别在50.0和80.0 nmol/L即可产生抑制（Peptide 58:t=5.36，P<0.05，Peptide 95:t=31.26，P<0.05）；BIAcore实验发现，Peptide 58与Peptide 95可特异性的与MDM2结合，较p53相比。它们与MDM2的结合常数分别为(389.6±13.4)nmol/L和(1.6±0.2)μmol/L，而与p53的结合常数分别为(19.5±2.4)μmol/L（t=6.85，P<0.01）和(12.8±1.4)μmol/L（t=8.32，P<0.01）；Western Blotting结果表明，Peptide 58与Peptide 95能上调p53在MCF-7细胞内的表达水平，并引起p21表达的增加，相对p53基因，两肽对MDM2本身的表达水平影响较小。结论:Peptide 58与Peptide 95在体外对MDM2有较强的亲和抑制效应，但体内作用效果欠佳，原因可能是由于多肽进入细胞的比率较低或在细胞内由于蛋白酶的作用降解失效。     

LKB1 协同二甲双胍影响宫颈癌HeLa细胞的增殖与凋亡及其可能的机制

目的： 探索肝脏激酶B1 (liver kinase B1, LKB1 或serine-threonine kinase 11, S TK11 )基因协同二甲双胍对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的机制。 方法： 构建含有 LKB1 基因的重组质粒LKB1-pEGFP-n1并转染HeLa细胞,MTT检测 LKB1 基因对经二甲双胍处理的HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响,Western blotting检测对LKB1-AMPK信号通路相关蛋白AMPK、ACC和Rb磷酸化水平的影响。 结果： LKB1-pEGFP-n1和空载体pEGFP-n1成功转染HeLa细胞,LKB1-pEGFP-n1转染细胞内稳定表达LKB1。二甲双胍处理LKB1-pEGFP-n1转染细胞的IC50显著低于pEGFP-n1转染细胞\[(2.9±0.4) vs (7.8±1.3) mmol/L;t=-6.9921,P=0.002 2\]及野生型HeLa细胞\[(2.9±0.4) vs (9.6±1.5) mmol/L;t=-7.527 1,P=0.001 7\]。经二甲双胍处理后,LKB1-pEGFP-n1转染细胞周期阻滞于G1期,而pEGFP-n1转染和野生型细胞周期无显著变化。二甲双胍作用剂量为15 mmol/L时,LKB1-pEGFP-n1转染细胞凋亡率较pEGFP-n1转染及野生型HeLa细胞显著增多\[（28.6±2.3）% vs （9.6±1.6）%、（17.8±1.9）%,均P＜0.05\]。LKB1-pEGFP-n1转染细胞内AMPKα和ACC的磷酸化水平较pEGFP-n1转染和野生型细胞升高,Rb磷酸化水平降低。 结论： LKB1 能够协同二甲双胍影响HeLa细胞的增殖与凋亡,其可能通过LKB1-AMPK信号通路发挥作用。     

Gli1在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨Hh信号通路关键因子Gli1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义,并分析其与预后的关系.方法:食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管组织各88例,采用免疫组织化学法检测Gli1的表达,另用Western-blot方法检测其中30例ESCC的Gli1的表达,Pearson卡方检验分析Gli1表达与临床病理特征之间的关系.单因素Kaplan-Meier法分析Gli1表达与预后的关系.Cox比例风险回归评估Gli1表达与预后的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中Gli1的表达在蛋白水平明显高于食管正常鳞状上皮,Gli1在ESCC中免疫组化阳性表达率为71.59％ (63/88),Gli1在癌旁正常食管鳞状上皮中免疫组化阳性表达率为6.82％ (6/88),差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法证实Gli1蛋白在ESCC组织中表达上调,与癌旁正常食管组织中的表达比较,差异有统计学意义(P ＜0.001).Gli1高表达与肿瘤病理分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).单因素分析Kaplan-Meier法提示Gli1阳性表达组与阴性表达组生存率之间的差别有统计学意义(Log-rank test,P=0.005).结论:食管鳞状细胞癌中Gli1的表达比较普遍,与ESCC的预后密切相关,可作为预测转移潜能和预后判断的有价值的指标.