急性肺栓塞大鼠血浆组织型纤溶酶原激活剂和抑制剂的改变

本研究目的是通过动态观察急性肺栓塞后大鼠血浆组织型纤溶酶原激活剂（tissue plasminogen activator,t-PA）和抑制剂（plasminogen activator inhibitor-Ⅰ、PAI—Ⅰ）的变化，了解急性肺栓塞后纤溶功能的改变。     

膈式呼吸降低慢性阻塞性肺病患者的呼吸效率

膈式呼吸通常用于COPD患者的康复治疗,以纠正异常的胸壁运动,减轻呼吸做功和呼吸困难,增加呼吸效率,改善通气分布。本文研究了7例严重COPD患者(FEV_1为预计值的34±7%)在有负荷和无负荷情况下膈式呼吸练习对胸壁运动、呼吸肌机械效率、呼吸方式以及呼吸困难感觉的影响。胸壁运动的研究着重     

慢性气道阻塞性疾病的发病机制研究：转化生长因子β1对大鼠气道重塑的影响

目的：观察转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)对大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell，ASMC)增殖的影响。方法：ASMC取自1只健康雄性SD大鼠。应用体外培养的方法，加入不同浓度的TGF-β1，通过MTT法观察其对ASMC增殖的影响。实验分4组：对照组[20mL／L胎牛血清(FCS)／低糖Dulbecco最低必须培养液(DMEM)]，100mL／L FCS／DMEM组，10μg／L TGF-β1组和100μg／L TGF-β1组。结果：细胞培养第2天，MTT法检测的10μg／LTGF-β1组A值(O．36&;#177;0．043)和100μg／LTGF-β1组(0．37&;#177;0．050)明显高于对照组(0．126&;#177;0．052)(t=5．44，7．63，P&;lt;0．05)和100mL FCS／DMEM组(0．182&;#177;0．051)(t=5．97．5．88．P&;lt;0．05)。100mL FCS／DMEM组(0．38&;#177;0．034)于细胞培养第3天A值与对照组(0．20&;#177;0．035)比较增高(t=8．18，P&;lt;0．05)。镜下观察发现，10μg／L TGF-β1组和100μg／L TGF-β1组ASMC于培养第3天铺满96孔培养板，而100mL／L FCS／DMEM组细胞于第5天铺满培养板。结论：TGF-β1对气道平滑肌细胞的增殖具有明显的促进作用。     

家庭无创机械通气治疗慢性阻塞性肺病并发呼吸衰竭30例疗效观察

目的:探讨家用无创机械通气对慢性阻塞性肺疾病并发呼吸衰竭患者的治疗效果。方法:对30例经过医院内正规治疗的慢性阻塞性肺疾病并发呼吸衰竭患者在其病情稳定后,应用家用BiPAP无创呼吸机进行治疗,在医院内调试、应用48h,评价其一般情况、动脉血气稳定后,让其出院在家中进行无创机械通气,定期随访观察治疗效果。结果:家庭无创机械通气前及治疗6个月后,呼吸困难程度分级分别为4和3级;肺功能检测结果(FEV1)分别为(29±14)%和(35±9)%;动脉血气PO2为53.1±5.9mmHg和61.0±7.0mmHg,PCO2分别为55.2±5.2mmHg和45.8±5.9mmHg;住院天数分别为21±9d和12±5d。结论:家庭无创机械通气治疗慢性阻塞性肺疾病并发呼吸衰竭患者疗效可靠,且较安全。     

急性肺栓塞后肺泡巨噬细胞Latexin表达上调及其对炎症的影响

目的:研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中羧肽酶抑制剂Latexin的表达变化及其对肺部炎症的影响。方法:建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h开胸取出肺组织。常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR的方法研究Latexin在mRNA水平表达的变化;采用Western-blot方法进一步验证Latexin在蛋白水平表达的变化;采用免疫组织化学的方法检测大鼠肺组织中Latexin在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况。分别在大鼠急性肺栓塞后1、8、24和48 h暴露气管,进行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液(BALF)上清采用放射免疫法(RIA)检测内皮素-1(ET-1)的浓度;采用ELISA法检测白三烯C4(LTC4)的浓度;细胞沉淀用于分离正常大鼠肺泡巨噬细胞(AMs),并进一步用免疫磁珠法纯化AMs。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测AMs在急性肺栓塞后不同时间点Latexin及其作用底物羧肽酶A3(CPA3)的表达。结果:在大鼠急性肺栓塞后8h,肺组织内Latexin的mRNA水平和蛋白水平均逐渐升高。免疫组化研究表明急性肺栓塞后AMs在肺泡腔内的浸润增加,Latexin主要表达于AMs。急性肺栓塞大鼠BALF中分离的AMs无论Latexin和CPA3的表达都明显升高。随着Latexin表达的升高,ET-1和LTC4的浓度也随之升高。结论:急性肺栓塞后AMs中Latexin及其作用靶蛋白CPA3的表达均升高,二者处于一种动态的平衡。大鼠急性肺栓塞后AMs中Latexin的表达显著升高,抑制了CPA3的酶解作用,使得ET-1和LTC4的浓度增加,从而促进了肺部炎症的发展和肺血管收缩。     

急性肺栓塞后线粒体前凋亡蛋白的表达及其促细胞凋亡机制研究

目的 研究大鼠急性肺栓塞(APE)后肺组织中线粒体前凋亡蛋白(ARTS)的表达变化及其诱导的细胞凋亡.方法 采用自体血栓栓塞颈总动脉制备大鼠APE模型.分别在APE前(对照)和APE后1、8、24和48 h开胸取肺脏.常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ARTS mRNA表达水平,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)进一步验证ARTS以及ARTS诱导凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xL、XIAP和H2Ax的表达变化,用免疫组化法检测肺组织中ARTS在APE前后的表达变化及其组织分布情况,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织内细胞凋亡情况.结果 APE后ARTS的mRNA及蛋白表达水平均升高,于1 h和48 h升高最明显(P相似文献   

急性肺栓塞后富半胱氨酸蛋白1的表达变化及其机制研究

目的研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中富半胱氨酸蛋白1（CRP1）的表达变化以及内皮素-1（ET-1）和血小板源性生长因子（PDGF）对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）中CRP1表达的影响。方法建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1,8,24,48h开胸取出肺组织。常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR和Westernblot方法研究CRP1在mRNA水平和蛋白水平的表达变化;采用免疫组织化学的方法检测大鼠肺组织中CRP1在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况。分离培养PASMCs,在培养液中分别加入1μmol/LET-1和10μg/LPDGF,分别采用半定量RT-PCR、Westernblot和免疫荧光染色的方法研究不同时间点CRP1在PASMCs中的表达。采用Westernblot方法研究SRF-CRP1-GATA6转录蛋白复合体中SRF和GATA6蛋白在不同时间点的表达。结果在大鼠急性肺栓塞后的不同时间点,CRP1的mRNA水平和蛋白水平均逐渐升高,免疫组化研究表明CRP1主要分布在PASMCs,在急性肺栓塞后表达显著升高。PASMCs在ET-1和PDGF的作用下CRP1的表达随着时间的延长均显著升高。Westernblot检测发现PASMCs内SRF和GATA6蛋白在不同时间点的表达均明显升高。结论大鼠急性肺栓塞后肺组织内PASMCs的CRP1表达明显升高。离体实验表明ET-1和PDGF显著促进了PASMCs内CRP1的表达。CRP1可能通过SRF-CRP1-GATA6转录蛋白复合体参与PASMCs特异性基因表达的调控。     

慢性气道阻塞性疾病的发病机制研究:转化生长因子β1对大鼠气道重塑的影响

目的:观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)对大鼠气道平滑肌细胞(airwaysmoothmusclecell,ASMC)增殖的影响。方法:ASMC取自1只健康雄性SD大鼠。应用体外培养的方法,加入不同浓度的TGF-β1,通过MTT法观察其对ASMC增殖的影响。实验分4组:对照组犤20mL/L胎牛血清(FCS)/低糖Dulbecco最低必须培养液(DMEM)犦,100mL/LFCS/DMEM组,10μg/LTGF-β1组和100μg/LTGF-β1组。结果:细胞培养第2天,MTT法检测的10μg/LTGF-β1组A值(0.36±0.043)和100μg/LTGF-β1组(0.37±0.050)明显高于对照组(0.126±0.052)(t=5.44,7.63,P<0.05)和100mLFCS/DMEM组(0.182±0.051)(t=5.97,5.88,P<0.05)。100mLFCS/DMEM组(0.38±0.034)于细胞培养第3天A值与对照组(0.20±0.035)比较增高(t=8.18,P<0.05)。镜下观察发现,10μg/LTGF-β1组和100μg/LTGF-β1组ASMC于培养第3天铺满96孔培养板,而100mL/LFCS/DMEM组细胞于第5天铺满培养板。结论:TGF-β1对气道平滑肌细胞的增殖具有明显的促进作用。     

Der p2重组BCG对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用

目的：观察胞壁型屋尘螨抗原Derp2重组卡介苗（Derp2rBCG）对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用.方法：实验分4组,小鼠分别给予生理盐水、BCG或Derp2rBCG处理,然后以Derp2为变应原建立哮喘模型,正常对照组给予生理盐水致敏及气道内滴入,取肺泡灌洗液、肺组织标本,观察肺部炎症细胞浸润、气道杯状细胞增殖及肥大细胞脱颗粒情况.结果：①Derp2rBCG下调了哮喘小鼠气道局部炎症;②Derp2rBCG减轻了哮喘小鼠肺组织中的炎症细胞浸润;③Derp2rBCG可以减轻哮喘小鼠气道粘液高分泌现象并下调杯状细胞数量;④Derp2rBCG减轻了哮喘小鼠气道中的肥大细胞脱颗粒现象.结论：Derp2rBCG是一种有效的哮喘免疫治疗方法.     

结合珠蛋白和铁蛋白在急性肺栓塞中的表达变化

目的研究急性肺栓塞时结合珠蛋白和铁蛋白的表达变化。方法采用RT-PCR方法检测急性肺栓塞大鼠模型肺组织中结合珠蛋白和铁蛋白mRNA水平的变化;采用Westernblot技术检测急性肺栓塞大鼠血清中结合珠蛋白和铁蛋白蛋白水平的变化;采用免疫散射比浊法测定58位肺栓塞/深静脉血栓(PE/DVT)患者和40例对照(对照组)血清中的结合珠蛋白和铁蛋白的蛋白水平。结果急性肺栓塞后大鼠肺组织中结合珠蛋白和铁蛋白mRNA水平逐渐升高,血清中结合珠蛋白和铁蛋白的蛋白水平也逐渐升高。PE/DVT病人血清中结合珠蛋白的蛋白浓度为2063·48±425·38mg/L,对照组为824·37±235·24mg/L(P<0·01);PE/DVT患者血清中铁蛋白的蛋白浓度为554·43±136·18μg/L,对照组为79·42±31·57μg/L(P<0·01)。结论急性肺栓塞后肺组织细胞增加了结合珠蛋白和铁蛋白的合成,导致这两种蛋白的血清水平明显升高,表明结合珠蛋白和铁蛋白对PE/DVT病人具有一定的诊断价值。