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101.
102.
103.
目的 构建人天然Fab段抗体库,并用从膀胱尿路上皮癌组织中提取纯化的gp96筛选抗gp96特异性抗体,为恶性肿瘤的免疫治疗提供新方法 .方法 取4个健康献血员新鲜血液各200 ml,分离淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成cDNA,设计多对引物,以PCR扩增抗体轻链和重链Fd段cDNA.轻链PCR产物和噬粒载体pComb3经Sac Ⅰ和Xba Ⅰ酶切,由T4 DNA连接酶连接,电穿孔转化感受态大肠杆菌XL1-Blue,扩增后提取噬粒,构建轻链库.轻链库和重链Fd段PCR产物经Xho Ⅰ和Spe Ⅰ酶切,以同样方法 连接后转化XL1-Blue,加入辅助噬菌体VCSM13,产生噬菌体抗体全库.提取噬粒酶切鉴定轻链库和全库有无插入片段.分别以噬菌体全库和提取的噬粒为模板,以轻、重链不同引物组合进行PCR扩增.应用亲和层析和离子交换层析从膀胱癌组织中提取纯化gp96,并以此为抗原对构建的抗体库进行3轮筛选.结果 提取的淋巴细胞总RNA及逆转录合成的cDNA质量好,部分重链Fd片段、部分κ轻链和λ轻链cDNA得到扩增.Fab全库库容达6.6×106,酶切和PCR显示有插入片段.用从膀胱尿路上皮癌组织中提取出的gp96进行3轮筛选,抗体库得到68倍的富集.结论 本研究构建的人天然Fab段噬菌体抗体库可为进一步筛选特异性抗体、肿瘤免疫治疗打下基础. 相似文献
104.
泪道激光联合双路泪道插管治疗泪道阻塞 总被引:1,自引:0,他引:1
我科对102例(130眼)行Nd:YAG泪道激光联合双路泪道插管术,现报告如下。 相似文献
105.
白内障超声乳化及人工晶状体植入术治疗闭角型青光眼 总被引:2,自引:0,他引:2
我科采用超声乳化术白内障吸除联合人工晶状体植入术(phacoemulsification and intraocutar lens implantation, PHACO + IOL)治疗白内障合并青光眼84例,效果满意,现报告如下。1资料和方法1.1资料2005年1月至2006年12月我科采用超声乳化白内障合并治疗闭角型青光眼患者84例(106眼),其中男性33例,女性51例;年龄50~78岁,平均(65.8±5.6)岁。急性发作就诊者52例(均为单眼), 相似文献
106.
患者 ,男 ,65岁。因进行性排尿困难半个月于2 0 0 0年 7月 7日入院。体检 :前列腺增大 ,其上界触诊不清 ,质较硬 ,表面光滑。入院后查前列腺特异抗原为 0 ,癌胚抗原 <1 5μg/L。经直肠 B超检查前列腺47mm× 39mm× 36mm,内部回声不均 ,可见多个钙化灶 ,前列腺右上方见 88mm× 75mm囊实性相间包块 ,内部血流不明显 ,边界清 ,精囊显示不清。诊断 :盆腔混合性包块 (疑来源于精囊腺 )。CT检查示盆腔膀胱后方囊实性肿块 ,实性部分及壁可见明显强化 ,内可见分隔样组织 ,挤压膀胱及结肠移位 ,下方与前列腺、精囊关系密切 ,考虑来源于精囊的恶性肿… 相似文献
107.
目的通过构建人天然F ab段噬菌体抗体库为恶性肿瘤的免疫治疗提供新方法。方法取4个健康献血员新鲜血液各200m l,分离淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成cDNA,设计多对引物,以PCR扩增抗体轻链和重链Fd段cDNA。轻链PCR产物和质粒载体pCom b3经SacⅠ和X baⅠ酶切,由T 4 DNA连接酶连接,电穿孔转化感受态大肠杆菌XL 1-B lue,扩增后提取质粒,构建轻链库。轻链库和重链Fd段PCR产物经X hoⅠ和SpeⅠ酶切,同样方法连接转化XL 1-B lue,加入辅助噬菌体VCSM 13产生噬菌体抗体全库。酶切鉴定轻链库和全库有无插入片段。结果提取的淋巴细胞总RNA质量好,部分重链Fd片段、部分κ轻链和λ轻链cDNA得到扩增。F ab全库库容达5.4×106,酶切证实有插入片段。结论本研究构建的人天然F ab段噬菌体抗体库可为进一步筛选特异性抗体及从肿瘤组织中提取肿瘤抗原用于免疫治疗奠定基础。 相似文献
108.
资 料 和 方 法临床资料 :84例均为我科住院病人 ,男 6 2例 ,女 2 2例 ,年龄 5 0~ 85岁 (平均 5 9.2 7± 8.73)岁 ,随机分为治疗组和对照组。所有患者均经详细询问病史、神经系统检查及头颈核磁共振确诊 ,均符合 1995年全国脑血管病会议通过的脑血管疾病诊断的修订标准。治疗方法 :治疗组 46例 ,男 32例 ,女 14例 ,年龄 5 1~ 85岁 (平均 6 1.18± 6 .15岁 ) ,给予金钠多注射液 40 ml(德国威玛舒培博士药厂生产 )溶于生理盐水 2 5 0 ml中缓慢静滴 ,每日一次 ,15次为一个疗程。对照组 38例 ,男 30例 ,女 8例 ,年龄5 0~ 83岁 (平均 5 9.… 相似文献
109.