索拉非尼联合紫杉醇对肝癌huh-7细胞的作用研究

[摘要]：目的 探讨索拉非尼联合紫杉醇(PTX) 对肝癌细胞huh-7的杀伤作用。方法 用MTT法检测索拉非尼、紫杉醇单药及其联合对huh-7细胞的增殖抑制,同时采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果 索拉非尼单药及PTX 单药对huh-7均有明显抑制作用,两药联合具有协同作用( P <0.05)。索拉非尼主要使细胞阻滞于G1期,PTX则使细胞阻滞于G2期和M期。两药联用后同时阻滞于G1 及G2/M期。联合组凋亡率明显高于单药组( P<0.05),差异有统计学意义。结论 索拉非尼和PTX对肝癌huh-7细胞有增殖抑制及促凋亡作用, 两药联合表现为协同或相加作用。     

血清SCCA、CYFRA21-1、TPS在宫颈鳞癌的表达及对化疗疗效评价的意义

目的检测血清鳞状细胞癌抗原（SCCA）、细胞角蛋白19片段抗原21-1（CYFRA21-1）、组织多肽特异性抗原（TPS）在宫颈鳞癌的表达,分析其在化疗疗效评价中的意义。方法宫颈鳞癌患者31例,健康对照组30例,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平,并比较3项指标在两组人员中的差异及在宫颈癌患者组中化疗前后的变化。结果①宫颈癌组血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平明显高于健康对照组（P〈0.01）。宫颈鳞癌患者中,血清SCCA、CYFRA21-1、TPS诊断敏感性分别为70.00%、48.00%、86.21%,特异性均为100%。TPS诊断敏感性明显高于SCCA、CYFRA21-1（P〈0.05）。SCCA和TPS联合及三者联合诊断敏感性提高,分别为96.43%、95.83%。②SCCA在不同临床分期表达差异均无统计学意义（P〉0.05）,在中或高分化组表达明显高于低分化组（P〈0.05）,与有无淋巴结转移无关（P〉0.05）。CYFRA21-1、TPS在Ⅲ＋Ⅳ期表达明显高于Ⅰ＋Ⅱ期（P〈0.05）,与肿瘤分化程度无关（P〉0.05）。对有无淋巴结转移,CYFRA21-1的表达差异无统计学意义（P〉0.05）,而TPS表达差异有统计学意义（P〈0.05）。③化疗有效（CR＋PR）的患者中,化疗后血清SCCA、TPS较化疗前明显下降（P〈0.05）,CYFRA21-1化疗后下降,但差异无统计学意义（P〉0.05）。化疗后病情稳定（SD）或进展（PD）的患者中,化疗前后血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平均无明显差异（P〉0.05）。结论 SCCA、CYFRA21-1、TPS检测对宫颈鳞癌的诊断具有一定意义,SCCA、TPS水平变化在化疗疗效评估方面具有一定指导作用。     

介入超声在肝肾脓肿治疗中的应用价值

目的探讨介入超声在肝肾脓肿诊治中的应用价值及特点。方法 60例患者均经介入超声抽取病灶脓液进行检验确诊,脓液抽取至液体清明或红色血液为止,并注入抗生素保留治疗。结果 54例肝脓肿患者中,28例经1次穿刺治愈,16例2次穿刺治愈,10例3次及以上抽脓后治愈;6例肾脓肿患者中,3例经1次穿刺后治愈,2例经2次穿刺后治疗,1例3次穿刺。穿刺3次及以上患者的平均年龄、病程、脓肿直径均明显高于穿刺1、2次患者（P〈0.05）。结论介入超声诊断和治疗肝肾脓肿具有较好的临床效果,临床发现年龄偏大、病程较长、脓肿较大的患者需多次治疗才能达到理想治疗效果,故应提前与此患者做好沟通和心理护理,避免因为不能有效复诊而耽误或加重病情。     

溶酶体组织蛋白酶L对人宫颈癌细胞HeLa迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨溶酶体组织蛋白酶L(Cathepsin L)是否通过上皮-间充质转化(EMT)影响宫颈癌细胞的侵袭及迁移能力.方法 利用荧光定量PCR来检测人宫颈癌细胞HeLa、CaSki以及HeLa229中Cathepsin L的表达水平;设计并合成靶向Cathepsin L的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染Cathepsin L表达最高的宫颈癌细胞HeLa以构建稳定低表达Cathepsin L细胞株,通过Western blot和定量PCR来验证shRNA的干扰效率,拟将Cathepsin L-shRNA和空白对照载体转染HeLa细胞,并将构建好的稳定细胞株命名为HeLa/shRNA,空白组和对照组分别为HeLa和HeLa/Con.通过Transwell法检测干扰后细胞的迁移及侵袭能力,Western blot法检测EMT相关指标E-cadherin和N-cadherin以及其上游信号分子Snail、WNT-5a的变化.结果 Cathepsin L-shRNA转染后,能够有效抑制HeLa细胞中Cathepsin L的表达;Transwell法检测结果显示,Cathepsin L干扰组细胞侵袭及迁移能力显著低于阴性对照组(P ＜0.001).Western blot法检测结果发现,Cathepsin L干扰组细胞的E-cadherin表达增加,N-cadherin的表达降低;此外,Cathepsin L干扰组细胞的Snail、WNT-5a表达较对照组显著下降.结论 运用RNA干扰技术能够有效沉默HeLa细胞的Cathepsin L基因,并诱导其迁移侵袭能力的下降,其可能的机制是通过调节EMT的上游信号分子Snail、WNT-5a的表达来调控EMT,从而影响宫颈癌细胞的迁移及侵袭.提示Cathepsin L在宫颈癌的发生发展中起重要作用,抑制Cathepsin L的表达可能成为一种治疗宫颈癌的新方法.     

降低麦白霉素效价测定可信限率的研究

探讨降低麦白霉素效价测定可信限率的方法。在上层培养基中加入定量的 2 ,3,5 -氯化三苯基四氮唑 (TTC) ,于 35～ 37℃培养 14～ 16h后取出。此法可增加培养基的深度 ,基本上消除外圈的影响。并可降低测量结果的可信限率     

过敏性鼻炎儿童居住环境和饮食习惯中的危险因素分析

目的 探讨儿童过敏性鼻炎的居住环境和饮食习惯中可能的危险因素,为过敏性鼻炎的防治提供建议和指导.方法 选择有过敏性鼻炎症状,并且过敏原皮肤点刺试验阳性的168名学龄儿童为研究对象(过敏性鼻炎组),以1:2比例配对的方法,选择336名同期参加调查,性别和年龄匹配,无鼻、眼、气管和肺以及皮肤过敏症状,无过敏性疾病家族史的儿童为对照组.两组同时填写呼吸道过敏性疾病调查问卷,内容包括居住环境、饮食习惯等共23个因素.结果 Logistic回归分析显示,在16个居住环境因素中,以前是否饲养宠物、家里有无空调、地板类型、取暖装置,一同居住人数、房屋面积等6个变量进人回归方程;在7个日常饮食习惯的因素中,只有"进食鱼类多少"1个变量进入回归方程.结论 居住环境在儿童过敏性鼻炎的发生中起重要作用,大量进食鱼类与儿童过敏性鼻炎的发生密切相关,应加强对家庭居住环境的清洁卫生,尽量降低空气中尘螨密度,注意合理饮食结构,以期降低过敏性疾病的发生率.     

人树突状细胞SOCS1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建人树突状细胞（hDCs）信号传导通路抑制因子1（SOCS1）基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体。方法根据人树突状细胞SOCS1基因（NM-0037）,筛选出一个靶序列,设计并合成包含正反义靶序列的互补单链寡核苷酸,与经BamH和Xho酶切后的慢病毒载体质粒pRNA-Lenti-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）（含U6启动子和EGFP）连接产生pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒重组质粒,与慢病毒包装混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒,收集病毒上清,采取系列稀释法测定慢病毒滴度。然后转染hDCs,通过荧光显微镜观察细胞转染情况,利用荧光实时定量PCR和Westernblot检测干扰组、阴性对照组、空白对照组SOCS1的表达情况。结果将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功。荧光实时定量PCR及Westernblot检测显示慢病毒重组质粒感染hDCs后,与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA组mRNA和SOCS1蛋白的表达量显著降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论构建的pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒载体可有效地抑制hDCs的SOCS1的表达,为进一步研究DCs增强抗肿瘤免疫应答效应奠定基础。     

无精及严重少精症患者Y染色体微缺失分析

目的 探讨Y染色体微缺失与汉族先天性男性不育患者睾丸大小、性激素水平的关系.方法 采用多重PCR技术检测209例非梗阻性无精子症患者及122例严重少精子症患者AZFa、AZFb和AZFc 3个区域的6个序列标签位点;对照组为70例已正常生育且精液质量正常的男性.结果 331例男性不育患者中发现了23例Y染色体微缺失,发...     

载脂蛋白E基因型多态性与SAH后血管痉挛的相关研究

目的:探讨载脂蛋白E基因(Apolipoprotein E,APOE)多态性与自发性蛛网膜下腔出血(Subaraehnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛(Cerebral vasospasm,CVS)的相关性.方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(Polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测185例SAH患者,测定APOE基因型多态性,通过TCD评定SAH患者出血后的CVS情况.分型结果与CVS及相关临床资料等分别进行X~2检验和Logistic回归分析.结果:185例SAH患者中,32例APOE ε4携带者中有21例(占65.7%)发生CVS,153例非ε4携带者中有56例(占36.7%)发生CVS,ε4携带者的CVS发生率明显高于非ε4携带者(P=O.022);单因素和多因素Logistic回归均提示ε4是CVS的危险因素.结论:APOEε4等位基因是SAH患者发生CVS的危险因素.     

ZD6474对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的探讨ZD6474对肝癌细胞HepG2的杀伤作用及作用机制。方法甲基噻唑基四唑实验(MTT法)测定ZD6474对HepG2细胞的增殖抑制;通过流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 ZD6474对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用(P<0.001)。ZD6474导致肝癌细胞发生G_0/G_1期阻滞。结论 ZD6474能显著抑制肝癌HepG2细胞的体外增殖,可能与导致肝癌细胞G_0/G_1期阻滞相关。