转位分子蛋白对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的 利用相对分子质量为18000的转位分子蛋白(TSPO)的特异性配体1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰(pk11195)研究TSPO对人脑胶质瘤U251增殖的影响及机制,为人脑胶质瘤的治疗寻找新的靶点. 方法 体外常规培养U251细胞,应用100、50、25、12.5、6.25 μmol/L pk11195作用2h后MTT比色法检测细胞的增殖活性,同时设对照组(加入等量溶剂);台盼蓝染色法检测对照组和50、6.25 μmol/L pk11195组细胞死亡率的变化;Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting和免疫荧光法检测细胞TSPO的表达;2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)探针法和GSH试剂盒分别检测细胞内活性氧(ROS)和GSH的水平;曲氟胸苷(JC-1)染色法检测线粒体膜电位;荧光素酶法检测细胞内ATP含量. 结果 MTT检测显示50、25μmol/L pk11195组细胞存活率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);台盼蓝染色显示50 μmol/L pk11195组细胞死亡率、GSH水平低于对照组和6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/L pk11195组细胞凋亡率、TSPO的表达量较对照组降低,且50μmol/L pk11195组低于6.25 μmol/Lpk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/Lpk11195组ATP的含量高于对照组,且50 μmol/Lpk11195组高于6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05).pk11195组ROS水平较对照组降低,而细胞膜电位增高. 结论 TSPO具有促进U251细胞凋亡、抑制其增殖、类似于抑癌基因的作用.     

胶质瘤CD133阳性和阴性U87细胞蛋白质组学分析

目的 通过对人脑胶质瘤U87细胞中CD133+和CD133-细胞进行配对研究,寻找差异性蛋白.方法 通过磁珠选择分离U87中CD133+和CD133-细胞,利用双向凝胶电泳(2D - PAGE)检测上述细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.通过质谱( MALDI -TOF - MS)对蛋白点进行鉴定,建立两种细胞差异性蛋白文库.结果 CD133+和CD133-细胞配对比较,蛋白质组学检测结果中,差异有统计学意义(P＜0.05)的2D - PAGE蛋白点共有73个,＞1.5倍差异蛋白点有46个,＞2倍差异蛋白点有27个,＞3倍差异蛋白点有8个.在CD133+ U87细胞中,有10个蛋白表达增多(上调),63个蛋白表达下降(下调).共得到44张高质量质谱肽质量指纹图谱(PMF),鉴定了35种蛋白质.结论 CD133+和CD133-细胞是同一细胞株中两种不同的细胞,蛋白方面存在的差异,将成为进一步研究它们相互关系的重要靶点.     

氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的探讨氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞体外增殖的影响。方法用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测不同浓度的氯丙咪嗪对U251细胞增殖活性的影响。根据结果,选取二个不同浓度组检测细胞形态学的变化、台盼兰染色细胞死亡计数、细胞凋亡染色、流式细胞术检测等。结果依据MTT实验结果,选取氯丙咪嗪57μmol/L和28.5μmol/L两个浓度进行台盼兰染色、细胞形态学、细胞凋亡染色和流式细胞术检验。结果证实,氯丙咪嗪对U251细胞有明显的抑制作用。结论氯丙咪嗪具有明显的抑制胶质瘤U251细胞增殖的功能,促进其凋亡,可作为胶质瘤化疗的备选药物。     

院前GCS中运动评分与重型颅脑外伤患者预后的关系

目的： 分析Glasgow 昏迷分级（GCS）中运动评分与重型颅脑外伤（severe traumatic brain injury, sTBI）患者死亡率及愈合结果之间的关系,探讨运动评分应用于院前评估的可靠性。方法： 回顾性分析sTBI患者出院病历,统计患者到达急诊室时的GCS评分。预后指标包括ICU死亡率,存活者（生存时间超过1个月）ICU时间、出院时的Glasgow结果分级（GOS）、伤后第6个月的GOS。结果： 本组患者共140例,65例（46.4%）在ICU治疗期间死亡,入院时总GCS评分及睁眼、言语和运动评分与ICU死亡率之间均存在显著性相关,评分越低,死亡率越高,其中最为相关的是总GCS、运动评分。生存时间超过1个月的患者中,运动评分与出院时GOS和伤后第6个月GOS之间均存在显著性相关,评分越高,愈合结果越好。结论： GCS中运动评分与sTBI患者死亡率和愈合结果之间存在显著性相关,可以替代总GCS,作为院前评估指标。
［关键词］     

胶质瘤U251细胞中CD133表达及干细胞特性分析

目的： 探讨CD133⁺细胞的生物学特性,分析CD133作为胶质瘤干细胞标记的可行性。方法： 利用免疫荧光染色检测U251细胞中CD133、巢蛋白（nestin）、神经元特异性烯醇化酶( NSE )、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达,分析CD133⁺细胞与CD133^－细胞中巢蛋白、NSE、GFAP阳性细胞存在的差异。结果： U251中CD133⁺细胞比例为0.060±0.003,在CD133⁺细胞中,巢蛋白阳性细胞,NSE和GFAP阴性细胞比CD133^－中明显增多;在CD133^－细胞中,也存在巢蛋白阳性细胞,数目较CD133⁺中明显减少,相反巢蛋白阴性细胞,NSE和GFAP阳性细胞明显增多。结论： 胶质瘤U251细胞存在CD133⁺细胞,在CD133阳性和阴性细胞中,均存在干细胞样细胞,但是在CD133⁺细胞中此类细胞更多。     

CT血管造影在脑动脉瘤破裂急性期的应用

CT血管造影(CTA)是诊断脑动脉瘤的重要方法之一,与数字减影血管造影(DSA)相比,具有简易、可靠、快速及创伤小的特点,有比较高的敏感性和特异性,可行三维立体成像,且对动脉瘤形态的描述优于DSA;在动脉瘤破裂急性期在一定程度上可独立诊断并指导外科治疗。     

彩色多普勒超声在神经外科术中导航的临床研究

目的探讨彩色多普勒超声在神经外科术中导航的临床价值。方法实验组为30例术前CT与MR诊断颅内病变的患者,并且在彩色多普勒超声监视下完成手术,从有效性、安全性与诊断准确率方面与对照组比较。结果本组30例病例均能在超声引导下发现病灶,在有效性与安全性与对照组比较,有统计学意义,术中超声能比CT与MR更准确显示病灶的细微结构。结论彩色多普勒超声技术在神经外科术中有其独特的优势,它具有使用简单,实时显示,准确定位,无放射性等特性,能提高颅脑手术成功率并且降低手术并发症发生。     

胶质瘤U251细胞化疗过程中MGMT表达改变与耐药的关系

目的探讨胶质瘤U251细胞中MGMT表达与卡莫司汀（BCNU）和替莫唑胺（TMZ）化疗耐药的关系。方法细胞生长情况用MTT进行评估,细胞周期采用流式细胞仪检测,MGMT表达用western-blot检测。结果 U251细胞对BCNU和TMZ存在耐药现象。在化疗过程中,处于G0/G1期细胞比例明显增加,MGMT表达无显著变化。结论利用BCNU和TMZ对U251进行化疗过程中,不能通过消耗MGMT,来达到逆转耐药现象的目的 。