痤疮丙酸杆菌介导的小鼠肝脏肉芽肿疾病模型建立及机制探究

目的建立小鼠肝脏肉芽肿模型及探讨其机制。方法痤疮丙酸杆菌(P．acnes)经尾静脉注射给C57BL/6J(B6)小鼠。在注射前、注射后1、6 h及1、2、3、5、7 d分别检测外周血F4/80~-B220~- CD11c~ 细胞含量及ALT(丙氨酸转氨酶)水平并作肝脏组织病理学检查。进而将外周血分离出来的F4/80~-B220~-CD11c~ 细胞经尾静脉注射给同种正常小鼠,建立过继转移模型,观察其ALT水平及肝脏组织病理学变化。结果注射P．acnes的小鼠外周血F4/80~-B220~-cD11c~ 细胞含量及ALT水平明显升高,病理学观察显示肝脏有大量炎症细胞浸润并形成肉芽肿。F4/80~-B220~-CD11c~ 细胞过继转移的小鼠ALT水平亦明显升高,肝脏病理切片发现有肉芽肿形成,与注射P．acnes的小鼠肝脏病理切片结果相一致。结论P．acnes能成功诱导建立小鼠肝脏肉芽肿模型,且P．acnes注射后升高的F4/80~-B220~-CD11c~ 细胞是诱导形成肝肉芽肿的主要因素。     

SIRS大鼠早期TNF-α和IL-6的变化及其在脾脏中的mRNA表达

目的 了解全身炎症反应综合征(SIRS)早期各时段血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的变化及其在脾脏中的mRNA表达，探讨SIRS失控演变过程中前炎症细胞因子发挥的作用。方法 制作SIRS实验动物模型，按时相不同分组，分别于2h、4h、6h和8h处死动物，用ELISA法测定血浆TNF-α和IL-6含量，RT-PCR技术检测大鼠脾脏组织中TNF-α、IL-6mRNA的表达。结果 2h后血浆TNF-α含量即开始明显升高，4h时到达峰值，其后6h、8h仍保持高水平；IL-6含量的变化与TNF-α则明显不同，呈逐步上升趋势。脾脏组织中TNF-α、IL-6mRNA的表达与以上结果相一致。结论 SIRS大鼠中，TNF-α是早期释放的炎症细胞因子且在血浆中全期呈高水平，它可能在SIRS发生和发展中起非常重要的作用，而IL-6峰值靠后，在SIRS早期IL-6不是引起损伤的主要炎症因子。     

克隆病的外科治疗(附16例报告)

克隆病的外科治疗（附１６例报告）苏州医学院附属第一医院普外科（２１５００６）汪良陈易人克隆病缺乏特征性表现，外科诊治有一定困难。我院自１９８０～１９９６年间经手术病理证实１６例。现报道如下。１临床资料本组男９例，女７例。年龄２６～７２岁。３例表现为短...     

Expression of X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein and Its Effect on Chemotherapeutic Sensitivity of Bladder Carcinoma

The expression of X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) gene and its effect on chemotherapeutic sensitivity in bladder carcinoma was explored. By using immunohistochemistry, the expression of XIAP was detected in 47 bladder carcinomas and 5 normal bladder tissues. The XIAP gene was transfected into bladder cancer cell line T24 by liposome and the positive clone was screened by G418. Cellular XIAP mRNA level was detected by RT-PCR. Low-dose mitocycin C was administered to induce the apoptosis of T24 cells. The in vitro growth of bladder carcinoma cells was analyzed by MTT colorimetry, and the apoptosis rate was assayed by TUNEL methods. It was found XIAP was moderately expressed in bladder carcinomas with the the positive rate being 78.73% (37/47), but the positive rate was not correlated with carcinoma stages and grades (P<0.05). XIAP mRNA level in transfected T24 cells was significantly increased by 3.8 times as compared with that in the cells not transfected with XIAP. After treatment with low-dose mitomycin C (0.005 and 0.05 mg/mL), the growth rate in XIAP no-transfected control group was increased by (11.60±0.25)% and (16.51±0.87)% (P<0.05), and the apoptosis rate was decreased by (10.1±0.2)% and (11.9±0.2%) (P<0.05) respectively as compared with XIAP transfected group. It was concluded that XIAP was expressed in most of bladder carcimoma samples. Overexpression of XIAP in T24 could significantly reduce the MMC-induced apoptosis of bladder carcinoma, suggesting its effect on the chemothera- peutic sensitivity of T24 cells.     

XIAP在膀胱癌中的表达及其与肿瘤增殖活性的关系

目的探讨XIAP在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达及其与TCC增殖活性的相关意义。方法应用免疫组织化学SABC技术检测47例TCC癌组织,6例正常膀胱黏膜组织中XIAP及增殖细胞核抗原Ki-67的表达水平。结果6例正常膀胱组织中仅有1例XIAP表达阳性(16．67%),而在47例TCC癌组织中有37例XIAP表达阳性(78．73%),与正常膀胱组织相比,膀胱癌组织中XIAP表达显著增高(P＜0．01)；复发的TCC癌组织中XIAP的阳性表达率(89．47%,17/19)明显高于初发的癌组织(71．43%,20/28)(P＜0．05)；但是,不同分级和分期的癌组织中XI- AP的表达差异无统计学意义(P＞0．05)；此外,XIAP表达阳性的TCC癌组织中具有较高的核增殖活性,其Ki-67标记指数为(37．51±15．85)%,明显高于XIAP表达阴性的TCC癌组织的(17．76±11．42)%(P＜0．05)。结论XIAP在TCC癌组织中呈高表达,其表达与肿瘤的分级和分期无明显相关,但是与肿瘤的核增殖活性相关,这可能与TCC发生的早期事件及药物耐受机制有关。     

人工合成拟Smac多肽增强膀胱癌细胞化疗敏感性的实验研究

背景与目的: Smac是目前发现的惟一能直接同时抑制多个IAPs家族成员活性的凋亡相关蛋白,其N端的4个氨基酸残基AVPI(Ala-Val-Pro-Ile)是重要的促凋亡结构域,我们通过人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacN7,探讨其对膀胱痛化疗药物敏感性的促进作用.方法: 噻唑蓝(MTT)检测SmacN7融合多肽对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T24细胞的相对存活率的影响;Annexin V/PI双标流式细胞术检测T24细胞的凋亡:Western印迹检测SmacN7融合多肽与MMC联用后T24细胞内XIAP、Caspase-3的表达;同时检测Caspase-3活性及SmacN7融合多肽与MMC联用对T24细胞的杀伤作用.结果: SmacN7融合多肽能穿透细胞并与内源性XIAP结合,增加低剂量MMC诱导的T24细胞凋亡并呈时间和浓度依赖性;并能显著降低细胞内xlAP的表达水平,增强Caspase-3的表达及活性;在24 h和48 h,SmacN7 MMC组与单用MMC组相比,T24细胞的存活率分别降低55%和72.7%.结论: 人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacNT能促进化疗药物诱导的膀胱癌T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强膀胱癌细胞对MMC的化疗药物敏感性.     

生长激素对阻塞性黄疸大鼠肠黏膜的保护作用及机制

目的 研究生长激素(GH)对阻塞性黄疸大鼠肠黏膜的保护作用和机制。方法 将大鼠随机分为假手术组、胆总管结扎组和胆总管结扎 生长激素组3组。两周后测定3组大鼠门静脉和体静脉血液的内毒素水平；对肠系膜淋巴结(MLNs)和肝脏进行细菌培养；用RT-PCR测定肠粘膜胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA的表达水平；取末端回肠组织观察肠黏膜病理变化。结果 胆总管结扎两周后大鼠发生内毒素和细菌移位，肠黏膜正常结构受损。使用GH后肠黏膜IGF-1 mRNA表达水平增高，上述病变显著减轻。结论 阻塞性黄疸使大鼠肠黏膜屏障功能受损，使用GH可上调IGF-1 mRNA的表达，对阻黄大鼠肠黏膜起保护作用。     

成熟型Smac真核表达载体的构建及其在膀胱癌T24细胞中的表达

目的 构建成熟型Smac基因真核表达载体．探讨成熟型Smac基因促进肿瘤细胞凋亡的可能性。方法 以Xba Ⅰ和Bam HⅠ双酶切质粒pET15b-Smac．回收酶切释放基因片断．定向插入以Xba Ⅰ和BamHⅠ双酶切的真核表达质粒pcDNA3．1（-）中．构建含有成熟型Smac基因的真核表达载体pcDNA-MT Smac．测序鉴定重组的质粒。构建的质粒转染膀胱癌T24细胞．在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导下以原位未端转移酶标记法（TUNEL）检测凋亡率。结果 以T7引物测序证实得组的质粒pcDNA-MT Smac含有成熟型Smac基因。空白对照组、50ng／ml TRAIL处理组、转染Smac组和转染Smac后50ng ml TRAIL处理组的凋亡率分别为1．6％、20．2％、1．7％和35．7％．未经TRAIL诱导．T24细胞及转染了成熟型Smac的T24细胞间凋亡率差异无显著性意义（P〉0．05）．然而作TRAIL的诱导下．转染了成熟型Smac的T24细胞凋亡率明显高于术转染细胞．其差异有级显著性意义（P〈0．01）。结论 成功构建了含有成熟型Smac基因的真核表达载体．并证实该基因可以促进TRAIL诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡．为研究成熟型Smac基因促进肿瘤细胞凋亡提供了实验依据。     

Th17/Treg及其相关细胞因子在结肠癌中的表达并与肿瘤分期的相关性

研究结肠癌患者肿瘤组织中Th17细胞、Treg细胞及患者外周血中相关细胞因子的表达水平,探讨其表达与肿瘤分期的相关性及可能机制。运用流式细胞分析(FACS)技术检测30例结肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中Th17细胞及Treg细胞的比例;采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测20例结肠癌患者外周血中Th17、Treg相关细胞因子IL-23和IL-10的表达水平。结果显示结肠癌肿瘤组织中Th17细胞和Treg细胞的比例明显高于癌旁正常组织(P<0.05),进展期肿瘤组织中Treg细胞的比例高于早期(P<0.05),而Th17细胞的比例较早期无明显差异(P>0.05),进展期肿瘤组织中Th17/Treg细胞的比例比早期偏低(P<0.05)。结肠癌患者外周血中IL-23、IL-10的mRNA水平升高,与健康对照组差异明显(P<0.05),且进展期与早期结肠癌IL-10mRNA的表达水平差异显著(P<0.05),而IL-23mRNA在两组间无明显差异(P>0.05)。随着结肠癌病程的进展,肿瘤组织内Th17细胞及Treg细胞的比例逐渐升高,且Treg细胞比Th17细胞升高更加明显。相关细胞因子IL-23和IL-10在患者外周血中的变化趋势和Th17、Treg细胞在肿瘤组织中的变化趋势相一致,提示Th17、Treg细胞在结肠癌的表达可能与肿瘤免疫微环境中相关的细胞因子调节有关。