膀胱移行细胞癌UroplakinⅡmRNA反义结合位点的筛选

目的筛选膀胱移行细胞癌(TCC)高表达基因UroplakinⅡ(UPⅡ)的反义结合位点(AAS).方法合成20聚随机寡核苷酸文库,与全长UPⅡcRNA杂交,RNase H酶切割后,经引物延伸、放射自显影、RNADraw软件分析,筛选UPⅡmRNA的AAS,合成反义寡核苷酸(AS-ODN),转染RT4细胞株18 h后,RT-PCR检测UPⅡmRNA水平.结果筛选出4个具有茎环结构的AAS(558～577 bp、552～571 bp、217～236 bp、97～116 bp),AS-ODN对UPⅡmRNA的封闭效率分别为29.3%(P＜0.01)、82.7%(P＜0.01)、71.3%(P＜0.01)、70.9%(P＜0.01).结论随机寡核苷酸文库/RNase H酶切割法能在体外筛选出UPⅡmRNA的AAS,为研究UPⅡ生物学功能、TCC靶向生物治疗奠定了基础.     

绒毛膜促性腺激素免疫靶向治疗与细胞表面工程技术

人绒毛膜促性腺激素β亚基（human chorionic gonadotrophin β subunit，hCGβ亚基）除了在正常的妊娠滋养层细胞中分泌外，在许多恶性肿瘤细胞中也大量分泌，称为异位hCG（eetopic human churionic gonadotrophin，eetopie hCG）。异位hCG与恶性肿瘤发生、发展的关系受到人们关注，以异位hCG为靶抗原的肿瘤疫苗正成为肿瘤生物治疗新的研究热点。细胞表面工程技术的应用为免疫靶向治疗提供了更加广阔的空间。     

DNA甲基转移酶3b催化区保守序列shRNA真核表达载体构建

目的构建针对基因DNA甲基转移酶3bmRNA催化区保守序列的shRNA真核表达载体，并对其克隆进行鉴定。方法以DNMT3bmRNA序列为靶基因设计3条shRNA和一条阴性对照HK，应用基因重组技术将其克隆到真核表达载体PGensil-1中，构建真核表达载体P-DNMT3b-shRNA1、P-DNMT3b-shRNA2、P-DNMT3b-shRNA3、P-HK。将重组质粒转化到大肠杆菌DH5α中，接种于LB平板后分别挑取5个单克隆菌落进行扩增，经筛选后对提取质粒进行测序鉴定。结果重组质粒经SalI酶切鉴定得到大小2个基因片段，大片段约为4．55kb，小片段约为440bp，与设计相同；四组重组质粒经测序鉴定显示插入完全正确。结论成功构建了P-DNMT3b-shRNA（1、2、3）及HK真核表达载体，为下一步实验奠定了基础。     

胰高血糖素瘤1例

胰高血糖素瘤(glucagonoma)临床极为罕见，发病率0．5／1000万。临床医师对此病的认识甚少，极易发生误诊。现报告1例误诊6年最后病理确诊的病例。     

前列腺干细胞抗原和前列腺癌

前列腺癌 (ＰＣａ)是临床常见的恶性肿瘤之一。在美国 ,ＰＣａ是导致死亡的第二大肿瘤疾病。在中国 ,ＰＣａ的发病率也呈明显上升趋势。前列腺肿瘤标记物如ＰＡＰ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ等已应用于临床ＰＣａ的诊断与监测。前列腺干细胞抗原 (ＰＳＣＡ)是新近发现的一种ＰＣａ特异性标记物 ,由于它过表达于绝大部分ＰＣａ组织及骨转移灶中 ,一经发现就引起了人们对其结构、分布及其临床应用的兴趣。本文对ＰＳＣＡ的性质、结构及其与ＰＣａ的关系作一综述。1　ＰＳＣＡ的来源及结构ＰＳＣＡ基因于 1 997年由Ｒｏｂｅｒｔ等〔1〕从ＬＡＰＣ 4异种…     

线粒体促凋亡蛋白促进化疗药物诱导膀胱癌细胞凋亡的分子学机理研究

目的　探讨线粒体促凋亡蛋白 (Smac)促进化疗药物诱导膀胱癌细胞凋亡的分子学机理。　方法　脂质体介导Smac基因转染膀胱癌T2 4细胞 3d后 ,低剂量丝裂霉素诱导凋亡启动 ,MTT比色分析检测癌细胞生长活性 ,流式细胞术检测细胞凋亡 ;免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应检测Smac、XIAP、caspase 3的表达。　结果　各组癌细胞在低剂量丝裂霉素诱导下均出现凋亡 ,0 .0 5mg/ml、0 .0 0 5mg/ml丝裂霉素处理的T2 4细胞凋亡率分别为 18.84 %、10 .72 % ,转染Smac后经 0 .0 5mg/ml、0 .0 0 5mg/ml丝裂霉素处理的T2 4细胞凋亡率分别为 33.5 2 %、2 6 .2 4 % ,差异有显著性意义 (P1<0 .0 5、P2 <0 .0 1) ;同组凋亡相关基因XIAP表达下降、caspase 3表达上调 ,其表达差异均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。　结论　Smac在癌细胞中的活化表达可以明显增强细胞在刺激信号下的凋亡 ,其作用机理是通过抑制凋亡抑制蛋白IAPs ,解除了对凋亡下游效应半胱氨酸蛋白酶caspase的抑制活性。     

新型冠状病毒感染肺炎防控期间良性前列腺增生诊疗工作指南

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在我国已被列为乙类传染病,并按照甲类传染病管理。此外,COVID-19疫情也被世界卫生组织宣布为全球大流行。良性前列腺增生(BPH)引起的下尿路症状(LUTS)是老年男性最常见的临床症状之一。大多数LUTS/BPH老年患者常伴有基础疾病,更易感染新型冠状病毒。在抗击COVID-19疫情的斗争中,提高LUTS/BPH患者的医疗保障水平,加强LUTS/BPH患者的互联网医疗、门诊和住院管理具有十分重要的意义。为了进一步提高LUTS/BPH临床实践的相关性和有效性,根据国家卫生健康委员会的指导方案和最新的临床研究成果,我们编写了LUTS/BPH在预防和控制COVID-19流行中的诊断和治疗指南,供泌尿外科医务人员参考。     

膀胱移行细胞癌中候选肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA水平定量分析及其与肿瘤分级的关系

目的：研究肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA在不同级别膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜中的表达差异．并探讨其与肿瘤分级,临床分期的关系。方法：分别抽提不同级别的膀胱移行细胞癌组织标本和正常膀胱黏膜组织标本的总RNA,经RT为cDNA后,采用qRT—PCR法检测USP22 mRNA的表达情况。结果：正常膀胱黏膜组织中USP22的表达明显低于膀胱肿瘤组织,几乎不表达;不同级别膀胱肿瘤组织中,低度恶性潜能的乳头状尿路上皮癌和低级尿路上皮癌中USP22的表达要明显高于其在高级尿路上皮癌中的表达;特别是Ⅲ级膀胱移行细胞癌组,USP22的表达仅略高于其在正常膀胱黏膜中的表达。结论：USP22可能是正常干细胞向肿瘤干细胞恶变的关键凋节分子,可能成为一个新的诊断移行上皮癌侵袭性的有效指标。干扰其蛋白质合成将成为一个抗肿瘤生长的新靶点。     

以树突状细胞为基础的肿瘤免疫治疗进展

肿瘤的免疫监视机制，即宿主免疫系统如何预防肿瘤的发生、发展，这个长期存在争议的问题最近再度引起各国学者的关注。在小鼠实验中观察到淋巴细胞和与免疫系统密切相关的分子如γ干扰素（IFN-γ）等，一起参与对某些肿瘤的预防；在鉴定大量能被T细胞识别的人类相关或特异性肿瘤抗原，以及在分离肿瘤转移灶抗原特异性T细胞的研究中也得到了支持免疫监视的证据。此外，研究发现在某些肿瘤中，T细胞的浸润与患者显著提高的生存率有关。这些均提示免疫治疗或疫苗有望应用于肿瘤的治疗。大量研究已显示荷载肿瘤细胞裂解物、肿瘤抗原蛋白、多肽或DNA的肿瘤疫苗联合注射细胞因子或辅助剂可以产生免疫和临床效应，但这些免疫效应通常较弱，临床上更是很少能达到完全和持久的效应。