兔BK通道β亚基多克隆抗血清的制备

目的:用小鼠制备抗兔BK通道β亚基的抗血清。方法:采用RT-PCR扩增编码兔BK通道β亚基胞内段的基因。在大肠杆菌中表达GST-β亚基融合蛋白。以从PAGE凝胶上切下的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗血清。用ELISA和Westernblot鉴定抗血清的特异性。结果:用RT-PCR扩增出约300bp的兔BK通道基因。序列分析显示,扩增的序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道的序列完全一致。在E.coliDH5α成功地表达Mr约为37000GST-β亚基融合蛋白。ELISA和Westernblot检测证明,针对GST-β亚基融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别GST-β,也可识别源于兔组织的β蛋白。抗血清的最高滴度达1∶128000。结论:克隆了编码兔BK通道β亚基胞内段的基因,并成功地获得可特异性识别新西兰大白兔BK通道β亚基的高滴度抗血清,为BK通道的进一步研究提供了物质基础。     

地方株HPV16L1基因免疫小鼠诱发的抗体反应

为了检测pcDNA-L1的表达，评价地方株HPV16L1基因诱导的体液免疫反应。我们采用PCR技术从宫颈癌组织中获得HPV16L1基因，以pGEM-Teasy为克隆载体构建重组质粒pGEM-T-L1，进行限制性核酸内切酶及核苷酸序列分析，再将L1基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3．1(-)中，构建重组pcDNA-L1，转染Cos-7细胞，通过IFA试验验证L1蛋白的表达。     

99Tcm-MIBI心肌断层显像对病毒性心肌炎的诊断价值

目的：探讨^99Tc^m-甲氧基异丁基异腈（^99Tc^m-methoxyisobutyl isonitrile,^99Tc^m-MIBI)心肌断层显像对病毒性心肌炎的诊断价值。方法对29例病毒性心肌炎患者及15例健康对照者进行负荷、静息^99Tc^m-MIBI心肌断层显像。结果13例（44．8％）表现为弥漫性放射性核素分布稀疏,15例（51．7％）表现为局灶性放射性核素分布稀疏。结论^99Tc^m-MIBI心肌断层显像对诊断病毒性心肌炎有临床实用价值。.     

带有蛋白转导结构域的bcr/abl癌蛋白片段表达及其跨膜转运

0　引言　人类免疫缺陷病毒 (human immunodeficiencyvirus,HIV) - 1编码的反式激活蛋白 TAT具有独特的跨膜运转方式 ,而且有转导速度快 ,效率高的特点 ,被称为蛋白转导结构域 (protein transduction domain,PTD) [1 ,2 ] .本研究用PCR扩增了慢性粒细胞白血病慢粒 bcr/ abl融合蛋白的基因片段 ,在其 5′端融合 PTD结构域的编码区后在大肠杆菌中进行了表达 .表达产物经纯化后 ,加入培养的 HL 6 0细胞 ,表达的蛋白可直接进入细胞内 .这一结果为用外源蛋白负载(L oading)免疫细胞提供了新的途径 .1　材料和方法1.1　 DNA重组　人工合…     

电脑验光与人工验光对比分析

电脑验光仪以方便快捷等优点已广泛应用于眼科临床[1],目前传统的人工视网膜验光仍广泛使用。我们对电脑验光与人工验光的结果进行对比分析,以探讨电脑验光的特点,找出电脑验光的应用规律。1　资料与方法1.1　病历选择　　1999年4月至1999年6月因视力不良就诊,眼科常规检查后无其它疾病,能合作的大于5岁患者83例(166眼)。1.2　方法　　人工验光前小瞳电脑验光。部分年轻患者扩瞳后电脑验光及人工验光。使用日本ＴｏｐｃｏｎＲ:Ｋ7100型电脑验光仪,每眼　　作者简介:孙　强(1969-),男,重庆市江北区人,医师,主要从事屈光、斜视、弱视方面的研…     

应用多孔高密度聚乙烯为支架的一期全耳廓再造

目的探讨多孔高密度聚乙烯(Medpor)生物植入体的组织相容性。寻找外形理想，手术简便的外耳再造新方法。方法以Medpor为耳廓支架，掀起耳后皮瓣及耳后筋膜瓣，将支架植入两者之间，并按合适的解剖位置固定于耳后乳突区骨膜上。耳后及筋膜组织瓣创面植皮。结果自1998年3月～2000年12月，应用Medpor为支架一期再造耳廓8例，2例发生支架部分外露，经修补后未再发生外露现象，其余病例形态满意。结论Medpor生物植入体组织相容性良好。以它做为支架再造耳廓，可免除患者胸部切取肋软骨造成的痛苦和畸形，且形态良好。但该植入体价格贵，质地硬是其不足之处。     

绝经后妇女雌孕激素连续联合补充治疗一年对乳腺的影响

长期 (5年以上 )性激素补充治疗 (ＨＲＴ) ,乳腺癌危险性有所增加 ,相对危险性 (ＲＲ)为 1 2 6[1] 。因此 ,ＨＲＴ中乳腺的监测倍受关注。有报道 ,ＨＲＴ使用的近期 (1～ 2年 )约有17%～ 3 0 %的妇女Ｘ线平片检查乳腺密度增高[2 ] 。而超声下乳腺结构的改变报道很少。本研究就此进行探讨。一、资料与方法1.研究对象 :为 1997年 3～ 9月在我院就诊的绝经后妇女 ,60例 ,平均年龄 5 8 7岁 (48～ 64岁 ) ,平均绝经 8 3年(1～ 2 1年 ) ,身体健康 ,知情同意 ,由非研究方提供的随机表随机分组进入安慰剂和ＨＲＴ组 ,两组间各参数比较 ,差异均无显著…     

腺苷对模拟缺血再灌注豚鼠心室肌细胞动作电位的影响及其离子机制

目的　研究腺苷 (Ado)在模拟缺血缺氧时对豚鼠心室肌细胞动作电位 (AP)、L 型钙电流 (ICa.L)和ATP敏感性钾电流 (IK .ATP)的影响。方法　在离体豚鼠心室肌和酶解法分离的单个豚鼠心室肌细胞上 ,分别应用细胞内微电极和全细胞膜片钳技术记录动作电位和电流。结果　在模拟缺血缺氧状态下 ,Ado剂量依赖性的增大动作电位时程 (APD)的缩短 (P <0 0 5 ) ;抑制再灌注后APD恢复 ,而表现出迟后恢复。在缺血缺氧状态下 ,ICa.L受到抑制 ,Ado并不加重心肌细胞缺血缺氧时ICa.L的减小 ,而再灌注后ICa .L的恢复比较缓慢 ,但同对照组比较无差异。Ado可加速缺血缺氧时IK .ATP的激活 ,Ado(10 0 μmol·L-1)组在缺血缺氧时和再灌注后IK .ATP较对照组均明显增大。结论　在缺血缺氧状态下 ,Ado可增大APD的缩短 ,抑制再灌注后APD的恢复 ,其机制主要在于在缺血缺氧状态下Ado增大了IK .ATP。     

一次修补单侧Ⅲ度腭裂前部唇侧裂隙30例分析

单侧先天性Ⅲ度腭裂修补多为两大瓣法，对腭前部裂隙修补，通常采用两侧粘骨膜做一瓦合组织瓣进行修补。两大瓣法修补单侧腭裂，术后能关闭硬软腭裂隙，延长软腭，缩小咽腔，修补后的软腭能灵活运动。但术后Ⅲ度腭裂腭前部唇侧裂隙尚未修补，常需进行二次修补手术。笔者以鼻侧犁骨、齿槽突粘骨膜连续翻转瓣加齿槽突唇侧裂隙Z形交叉瓣对腭裂前部唇……     

野生型P53、P16基因联合抑制人胃癌细胞HGC27生长的实验研究

背景与目的:探讨逆转录病毒介导的野生型P53、P16基因协同抑制人胃癌细胞生长的作用.材料与方法:用脂质体转染法将携有野生型P53基因、P16基因的逆转录病毒载体pLNCX,转染人未分化胃癌细胞系HGC27,对转染后细胞进行生长曲线、MTI生长抑制率、Southern杂交、流式细胞术分析,观察其生物学特性变化.结果:野生型P53、P16蛋白的过表达对胃癌细胞系均呈现出生长抑制作用;野生型P53基因与P16基因联合导入HGC27细胞,对细胞生长抑制、促使凋亡效果高于单种基因转染.结论:野生型P53、P16基因联合治疗效果高于利用个别基因的治疗效果.