代谢型谷氨酸受体在脑损伤后的表达及意义

目的：探讨弥漫性脑损伤（DBI）后大脑皮质代谢性谷氨酸受体（mGluRs)的变化及其意义。方法：SD大鼠随机分为对照组和DBI组,采用Marmarou加速性DBI模型,在伤后不同时间取样行原位杂交和病理学研究。结果：与对照组相比,DBI组大脑皮质I、Ⅲ组mGluRs(除mGluR6外）阳性神经元表达在伤后12小时开始增加,24小时增加显著（P＜0．01）。病理研究提示,DBI后24小时大脑皮质神经元损伤严重（P＜0．01）,与mGluRs表达变化的时间吻合。结论：I、Ⅲ组mGluRs作用不同,分别具有神经元损害和保护作用;脑损伤后,I组mGluRs表达增加,参与DBI引起的神经元损伤,Ⅲ组mGluRs表达增加,具有神经元保护作用,这为阐明DBI的损伤机制及运用mGluRs激动剂和（或）拮抗剂治疗提供了理论依据。     

二次脑损伤后大鼠脑皮层mGluR2 mRNA的变化

目的：研究弥漫性脑损伤(diffuse brain injury,DBI）及其合并二次脑损伤（secondary brain insults,SBI）后大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体2亚型（mGluR2）的变化及其意义。方法：SD大鼠140只随机分为正常对照、假手术、DBI与DBI合并SBI4组。在Marmarou弥漫性脑损伤模型的基础上，制成SBI模型，于伤后1，3，6，12，24，48和72h进行HE染色和mGluR2 mRNA的原位杂交研究。结果：与正常对照组相比，假手术组阳性神经元数无明显改变。结果：与正常对照组相比，假手术阳性神经元数无明显改变（P＞0．05）；DBI组脑皮层mGluR2 mRNA在伤后12h表达开始减少，48h降至最低（P＜0．05）；DBI合并SBI组mGluR2 mRNA表达于伤后6h即开始减少，24h降至最低（P＜0．05）。结论：在DBI及其合并SBI过程中，mGluR2 mRNA表达降低。mGluR2参与了DBI和SBI的病理生理过程，可能与脑保护有关。     

Cloning and sequencing of the fragment of angiostatin K(13) gene

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｓｅｃｕｒｅａｎｔｉｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｃｙｔｅｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｒａｇｍｅｎｔｏｆｈｕｍａｎａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１３）ｇｅｎｅ－Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＡｓｔｈｅｔｅｍｐｌａｔｅｏｆｌｅｕｋｏｃｙｔｏｔｉｃｃＤＮＡ,ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｒａｇｍｅｎｔｏｆｈｕｍａｎａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１３）ｃＤＮＡｗａｓａｍｐｌｉｆｉｅｄｂｙＰＣＲ,ｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏｔｈｅｖｅｃｔｏｒｐＧＥＭ３Ｚｆ,ａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏ…     

抑癌基因PTEN诱导人脑胶质瘤SHG—44细胞凋亡

目的 研究外源性PTEN基因对人脑胶质瘤细胞系SHG－44凋亡的影响,探讨PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法 以携有人PTEN基因的真核表达载体体外转染SHG－44细胞,筛选阳性转染的细胞克隆并扩增培养。以原位杂交和免疫组化染色法检测PTEN基因的表达。采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳,检测转染PTEN基因后SHG－44胶质细胞的凋亡。观察导入入PTEN基因对SHG－44细胞裸鼠致瘤能力的影响。结果 获得PTEN基因稳定转染的胶质瘤细胞SHG－44,并检测到PTEN基因和蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表面。流式细胞仪显示,细胞周期从G1期到S期发生抑制,并在G1期峰前出现1个明显的凋亡峰（12．9％）。细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特朋的梯状条带。转染空载体及未转染的SHG－44细胞未见的凋亡表现。转染PTEN基因后,SHG－44细胞对裸鼠瘤能力明显降低。结论 将外源必PTEN基因导入SHG－44肿瘤细胞后,可诱导细胞凋亡,这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的重要机制之一。     

脑胶质细胞瘤体内侵袭性的实验研究

目的 探讨胶质瘤的体内侵袭和转移特性。方法 利用体外转染有绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因的大鼠Ｃ６脑胶质瘤细胞移植模型,将携有增强型绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）基因的pＥＧＦＰ－N３质粒体外转染Ｃ６细胞,筛选能稳定表达ＧＦＰ的瘤细胞克隆,并做流工细胞仪和电镜检测。将阳性转染和未转染瘤细胞以立体定向法植入ＳＤ大鼠脑实质仙,建立大鼠移植瘤模型。４周后处死大鼠并作脑连续石蜡切片,相邻切片分别行苏木素－伊红（ＨＥ）及免疫组织化学染色和荧光显微镜（激发光波长为４８８mm)检测。对移植瘤细胞行原代培养,以检测荧光基因在体内的保存情况。结果 阳性转染的Ｃ６瘤细胞的ＥＧＦＰ在大鼠脑内获得稳定表达,在荧光显微镜下较易于区分肿瘤与非肿瘤区,并能发现侵袭至远处的单个瘤细胞,其敏感性及特异性明显优于ＨＥ染色或免疫组化方法。结论 ＧＦＰ基因体外转染Ｃ6胶质瘤细胞并行大鼠脑内移植,是一种较好的研究脑胶质瘤侵袭性的体内实验模型。     

Inhibitory effects and mechanism of rhBMP-2 on the proliferation of SHG44 human glioma cells

Bone morphogenetic protein (BMP) has been denominated by its artivity of inducing bone formation. Re-cently, it was found to be a multifunctional factor andhave a key role in the regulation of elnbmpis andembryo deVelopment, hssue and cell ~ation andPndiferation. BMP could also inhibit many kinds of tumorcell growth and induce their apoptOSisL',']. the of BMPgenes were successop cloned and ~ssed in aam,such as BMP-2, BMP4 and BMP-7. The bone ~C Pmtein-2 is a htllnan P~ exPansed in vi…     

外源性血管抑素K(1-3)基因在人脑胶质瘤中的表达意义

目的 探讨外源性血和抑素Ｋ（１－３）基因「ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ９１－３）,ＡＫ（１－３）」在人脑胶质瘤中的表达及其作用。方法 应用ＰＣＲ法,使人Ｉｇｋａｐｐａ链分泌信号肽序列Ｓ中装在ＡＫ（１－３）基因上－ＳＡＫ（１－３）;构建ＳＡＫ（１－３）基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１－３）。经脂质体法将其转染入ＳＨＧ４４人脑胶质瘤细胞,行Ｇ４１８筛选获得转基因瘤细胞克隆,比较转基因和内皮细胞抑制     

谷氨酸释放抑制剂riluzole对弥漫性脑损伤的保护作用

探讨谷氨酸释放抑制剂２－氨基－６－三糖甲氧苯噻唑对大鼠弥漫性脑损伤的保护作用及其机制。方法在自由落体致生脑损伤模型的基础上,通过测定脑组织含水量、谷氨酸、ＴＸＢ２,６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α,ｃＡＭＰ,ｃＧＭＰ等水平变化,以及应用硝酸镧标记电镜分析观察血脑屏障的通透性改变,评价ｒｉｌｕｚｏｌｅ对弥漫性脑损伤的保护作用。结果应用ｒｉｌｕｚｏｌｅ组大鼠在脑创伤后早期脑组织含水量和谷氨酸水平明显下降;ＴＸ     

绿色荧光蛋白转染胶质瘤细胞的体内实验研究

 目的　利用体外转染绿色荧光蛋白 (Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因的胶质瘤细胞建立大鼠移植模型 ,并探索利用该模型研究肿瘤体内侵袭的可行性。方法　携有EGFP基因的 p EGFP- N3质粒体外转染 C6胶质瘤细胞 ,筛选稳定表达 GFP的细胞克隆并以立体定向法植入 SD大鼠脑实质内建立肿瘤移植模型。 4周后处死大鼠并制作连续石蜡切片 ,相邻切片分别作 HE、免疫组化染色和荧光显微镜检测。结果　GFP于体内稳定表达 ,在荧光显微镜下可较容易区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞 ,并能检测到侵袭至远端的单个肿瘤细胞 ,其检测效率明显高于HE和免疫组化染色。结论　EGFP基因体外转染 C6胶质瘤细胞并建立大鼠脑内肿瘤移植模型 ,是研究胶质瘤体内侵袭的有效模型和方法。