益肾降浊汤对高脂血症小鼠脑缺血再灌后能量代谢的影响

目的:探讨能量代谢障碍在缺血性神经元损伤中的作用及益肾降浊汤对高脂血症小鼠脑缺血再灌后能量代谢的影响。方法:在造成小鼠高脂血症基础上,进行反复脑缺血再灌注,制备智能障碍模型。采用高效液相色谱法和生物化学法分别测定脑细胞能量负荷值和脑组织琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase,SDH),细胞色素氧化酶(cytochromecoxidase,CCO),Na+-K+-ATPase活性。结果:模型组小鼠脑细胞能量负荷值,脑组织SDH,CCO,Na+-K+-ATPase活性均显著低于正常对照组(P<0.01),益肾降浊汤可提高模型小鼠脑组织SDH,CCO,Na+-K+-ATPase活性及脑细胞能量负荷水平(P<0.01)。结论:益肾降浊汤可改善高脂血症小鼠脑缺血再灌后能量代谢障碍。     

吗啡对原代培养大鼠海马神经元CCK受体mRNA表达的影响

目的探讨原代培养大鼠海马神经元上胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)受体CCK-AR及CCK-BR mRNA表达及吗啡对其表达的影响。方法采用新生大鼠海马神经元无血清原代培养技术,用吗啡(100μmol·L-1培养基)孵育3,6,12,18,24,36,48,72h,以及采用不同浓度吗啡(10,100,150μmol·L-1)孵育6、30h后,RT-PCR及测序方法观察CCK-AR及CCK-BR mRNA表达及吗啡对其表达的影响。结果RT-PCR结果显示,CCK-AR和CCK-BR mRNA在原代大鼠海马神经元上均有表达;CCK-AR mRNA RT-PCR扩增产物为218bp,CCK-BR mRNA RT-PCR扩增产物为444bp,经测序证实结果的可靠性;CCK-BR mRNA的表达量明显高于CCK-AR。吗啡作用后可使2种CCK受体mRNA表达上调。吗啡浓度及作用时间的不同对CCK-AR和CCK-BRmRNA表达的影响不同。结论原代大鼠海马神经元上有CCK-AR和CCK-BR,以CCK-BR为主;吗啡可使2种CCK受体mRNA表达上调。     

河北汉族人群D16S310基因座的遗传多态性研究

短串联重复序列 (ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ,ＳＴＲ)属微卫星ＤＮＡ序列 ,重复单位 2 7ｂｐ。ＳＴＲ位点在人类基因组中含量丰富 ,它不仅是绘制基因组物理图谱和遗传连锁分析的理想标记 ,也是法医遗传高信息基因座的丰富来源。Ｄ16Ｓ310短串联重复序列在人类自然群体的基因频率分布尚不清楚 ,为了解大陆人群Ｄ16Ｓ310基因座的遗传多态性 ,作者采用聚合酶链反应 (ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＰＣＲ)技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,并结合银染的方法 ,对中国河北省 2 0 9名汉族无关个体进行了调查 ,首次获得…     

CCK-8抑制LPS诱导的大鼠肺间质巨噬细胞TLR4及IL-1β的表达

目的观察八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对外源性脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活大鼠肺间质巨噬细胞(pulmonary interstitial macrophages,PIMs)Toll样受体4(Toll likereceptor4,TLR4)及IL-1β表达的影响,探讨CCK-8的抗炎作用机制。方法分离培养大鼠PIMs,经LPS、CCK-8及溶剂单独或共同孵育不同时间后,采用Northern blot、ELISA、RT-PCR技术检测TLR4 mRNA、IL-1β及IL-1β mRNA表达的变化。结果LPS(1mg／L)刺激可使PIMs中TLR4 mRNA表达明显增强;随着LPS孵育时间的延长,细胞中的IL-1β含量逐渐增多,24h达高峰,IL-1β mRNA表达水平同时明显升高;CCK-8可剂量依赖性抑制LPS诱导的大鼠PIMs TLR4 mRNA、IL-1β及IL-1β mRNA的表达。结论CCK-8对LPS激活的PIMs TLR4及IL-1β表达有负性调节作用,是CCK-8抗炎作用机制之一。     

与应激相关的杏仁核结构和功能变化研究

现代社会中,每个人都会面临来自家庭、工作以及社会等各个方面的压力。有研究表明75%-90%的内科疾病都与应激有关。因此研究应激的机制及其相关疾病具有十分重要的意义。在应激中,处于大脑拓扑结构学中心的杏仁核复合体因在情感、认知、记忆等功能上发挥重要作用而与应激反应有着密切关系。本文主要介绍了与应激相关的杏仁核结构和功能相关改变情况,并从基因表达、表观遗传修饰、神经-内分泌-免疫网络和细胞结构、水含量与脉管系统四个方面阐释了有关机制研究情况。最后,简要介绍了与应激及杏仁核相关的疾病。     

磁力双牙合垫矫治器早期功能矫治骨性Ⅱ类错牙合的临床研究

目的寻求早期骨性Ⅱ类错牙合更有效的矫治方法.方法对16例替牙期Ⅱ1患者将Clark的Twinblock矫治器改良,去除口外弓、头帽,将磁力引入口内矫治器中,即磁力双牙合垫矫治器,作治疗前后的X线头影测量对比分析,疗效与Twinblock组比较,并进行统计学分析.结果与Twinblock有同样的功能矫治效果,统计结果显示,磁力矫治器组B-CFH,|-NA角,|-SN角增大明显,有统计学意义.结论磁力双牙合垫矫治器能取得确切的功能矫治效果,更适合低角及上切牙角度正常的Angle Ⅱ1患者.     

聚合酶链反应与限制性片段长度多态性分析检测沙门菌

沙门菌是常见的人畜共患致病菌 ,有 2 32 4个血清型。在我国发现 2 6个菌群 ,16 1个血清型 ,人群中最常见的是伤寒杆菌 (Ｓ ,ｔｙｐｈｉ) ,肠炎沙门菌(Ｓ ,ｅｎｔｅｒｉｔｄｉｓ)等 10余种 ,临床上常见的为肠炎型 ,口服此型细菌污染的食物引起中毒 ,潜伏期短 ,发病急。目前对沙门菌的检测仍沿用传统分离培养及血清学方法 ,不仅繁琐 ,需要 4～ 7天才能出报告 ,而且检出率低 ,已不适于临床的快速诊断。因此 ,建立快速而特异的检测方法具有重要的流行病学意义和临床应用价值。本文在传统聚合酶链基础上 ,引入限制性内切酶片段长度多态性分析法 …     

DNA多态性分析凝胶干胶保存法及其法医学应用价值

目的：探讨凝胶干胶保存法及其在法医学中的应用价值。方法：采用饱和酚／氯仿抽提法提取血祥DNA，STR—PCR进行扩增，6％变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳，聚丙烯酰胺凝胶经银染显色后，采用玻璃纸处理制成干胶。结果：将银染后的聚丙烯酰胺凝胶及时进行拍照同时将其制成干胶，用Marker做对照通过测量DNA带的位置发现所得干胶同原始胶及拍照获取胶的结果一致。结论：通过玻璃纸干胶保存法可使原始资料永久而真实的保存，此方法对法医物证的保存具有极其重要的意义。     

八肽胆囊收缩素对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB活性变化的影响及其受体机制

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对肿瘤坏死因子α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB的影响,以及CCK-A/B受体是否参与这一过程。方法:实验于2003-02/2004-02在河北医科大学法医学教研室分子生物学实验室完成。取大鼠滑膜细胞株RSC-364经肿瘤坏死因子α(10 μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6 mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育:①孵育3h,用反转录-聚合酶链反应技术检测细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达。②孵育1h,用电泳迁移率检测核因子κB相对活性。③孵育30 min,用Western blot检测胞浆IκB蛋白表达的相对水平。结果:①细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达:RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体,肿瘤坏死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受体和CCK-B受体mRNA的表达分别上调148%和173%(P<0.01)。肿瘤坏死因子α和CCK-8(10-8～10-6 mol/L)联合孵育细胞,CCK-A受体和CCK-B受体mRNA表达与肿瘤坏死因子α组相比分别增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P<0.05,0.01)。②核因子κB相对活性:肿瘤坏死因子α组明显高于对照组(294.45±36.48,0,P<0.01);肿瘤坏死因子α CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组高于肿瘤坏死因子α组(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P<0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙谷胺减弱(400.79±39.06)。③IκB蛋白表达的相对水平:肿瘤坏死因子α组明显低于对照组(139.43±30.76,220.79±34.58,P<0.01),肿瘤坏死因子α CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组低于肿瘤坏死因子α组(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16.13,P<0.05),并可被丙谷胺所抑制(137.22±20.33,P<0.01)。结论:CCK-8对肿瘤坏死因子α诱导的RSC-364核因子κB活性具有正向调节作用,并能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在类风湿性关节炎发病过程中可能具有调控作用,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现。