pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体的构建及在PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体介导下转染肝癌细胞

目的:构建甲胎蛋白(AFP)启动子介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)重组真核表达载体,并检测其在AFP阳性肝癌细胞株的特异性表达.方法:PCR 扩增AFP 基因启动子、HSV-TK基因,将上述片段插入EGFP-N1载体的多克隆位点,构建pEGFP-AFP-TK重组表达载体,通过包裹PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体,经其介导,转染AFP 阳性肝癌细胞株HepG2 和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721, 利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法检测目的基因在2种细胞系中的表达.结果与结论:肝癌特异性真核表达载体pEGFP-AFP-TK构建成功.利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法可以检测到嵌合AFP启动子的pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体能够特异性在AFP阳性的肝癌细胞株表达,而在AFP阴性的肝癌细胞株中基本不表达.     

经尿道前列腺等离子双极汽化电切术治疗高龄前列腺增生症

目的探讨经尿道前列腺等离子双极汽化电切术治疗高龄前列腺增生症的安全性和有效性。方法回顾性分析经尿道前列腺等离子双极汽化电切术治疗高龄前列腺增生症46例的资料。结果本组46例高龄(80~95岁)前列腺增生症患者安全渡过围手术期,手术时间30~140(65±12.5)min;切除前列腺组织30~75(45.55±4.4)g;国际前列腺症状评分(IPSS)、最大尿流率(Qmax)与术前相比有明显改善,有显著性差异(P均<0.05)。结论经尿道等离子双极汽化电切术是治疗高龄前列腺增生症的安全有效的方法。     

自然杀伤细胞与肿瘤细胞之间的免疫编辑

自然杀伤细胞(nature killer cell, NK)是机体天然免疫的主要承担者，NK细胞表面表达的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulinlike receptor，KIR)和活化性受体NKG2D是调节NK细胞杀伤活性的主要受体。NK细胞通过其细胞表面的活化性受体和肿     

回盲部肠内囊肿型小肠重复畸形1例

消化道重复畸形是一类少见的先天性消化道疾病,发病率为0.025%～1.0%.我院2006年收治回盲部肠内囊肿型小肠重复畸形1例,现报告如下.……     

氯胺酮致急性小儿双眼球结膜水肿1例

氯胺酮静脉麻醉是小儿外科手术最常用的麻醉之一,我院近期出现氯胺酮致急性双眼球结膜水肿1例,现报告如下:……     

玉屏风散加减治疗寒冷性荨麻疹62例

寒冷性荨麻疹是荨麻疹的一种特殊类型,熟称“风疹块”。临床表现为先有皮肤瘙痒,随后出现风团。风团可在身体任何部位出现,呈苍白色。风团大小形态不一,可小如芝麻或米粒,大至巴掌,略高于周围皮肤。时隐时退,退后不留痕迹。本病特点是接触冷水或其它冰冷物之后,受冷部位出现瘙痒性水肿和风团,多发于暴露部位,如颜面和手部,口舌、咽喉等黏膜部遇冷食物或冷饮也可发生水肿。1临床资料62例均为门诊患者,其中,男12例,女50例,年龄16~58岁;病程最短3个月,最长4年。多数病例均经抗组胺药或H2受体拮抗剂治疗后疗效不佳而转中医治疗。2治疗方法玉屏…     

昆明市红云社区卫生服务中心辖区2004年常住人口死亡原因统计分析

昆明市红云社区卫生服务中心辖区内有6家企事业单位,3个农村居委会,常住人口27 000余人。为了更好地为社区居民提供有计划、有组织、有系统、有针对性的健康教育,减少致病危险因素,降低社区居民的发病率、死亡率,提高居民生存质量,我们对社区2004年1月1日~2004年12月31日常住人     

PTCA导丝逆行引导小鼠气管插管术

目的探索改进小动物气管插管的方法。方法40只C57BL／6小鼠，PTCA导丝经气管逆行至口腔．引导气管插管。结果40只小鼠成功行气管插管，未出现严重并发症。结论PTCA导丝逆行引导气管插管简单，有效，创伤小。     

无偿献血血液报废原因的分析与预防

目的探讨无偿献血血液报废的原因。方法对2003～2004年扬州市区无偿献血的血液报废原因进行回顾性统计和分析。结果扬州市区共采血23258例，报废血液804例，占3．46％。街头动员献血15519例，血液报废421例，报废率2．7l％；街头自愿献血7739例，血液报废383例，报废率4．95％；二者差异有非常显著性（X^2=77．7，P〈0．01）。ALT阳性399例，占报废率1．72％；脂肪血152例，占0．65％；过期血89例，占0．38％；HBsAg73例，占0．31％。结论加强献血前宣传教育，强化血液管理可减少血液浪费。     

稳定表达MRG15基因的人晶状体上皮细胞株的建立

目的:克隆人15号染色体上死亡相关因子(MORF4-re-latedgeneonchromosome15,MRG15)基因的编码区全长,构建真核表达载体,建立稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株,为MRG15在年龄相关性白内障(agerelatedcataract,ARC)发生中相关功能的研究奠定基础。方法:采用RT-PCR由人ARC晶状体前囊膜标本中扩增MRG15的编码区全长,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1( )中,采用脂质体法对培养人晶状体上皮细胞进行稳定转染,挑取单克隆,用Westernblot进行MRG15表达的鉴定。结果:测序证实,由ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15编码区全长序列正确。重组质粒pcDNA3.1( )-MRG15经酶切后释放出与理论长度相符的片段。培养人晶状体上皮细胞稳定转染挑取单克隆后,经Westernblot检测,30个克隆中有19个MRG15的表达量明显增高。结论:克隆了人MRG15的编码区全长,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1( )-MRG15,并建立了稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株。