知母皂苷涂膜剂的制备工艺研究

目的:优化知母皂苷涂膜剂的处方工艺。方法:采用L9(34)正交试验法,以聚乙烯醇、1,2-丙二醇、知母皂苷酶水解产物为考察因素,以成膜时间和外观性状为评价指标,对基质与药物的用量进行优化,筛选知母皂苷涂膜剂的最优处方工艺,并对制得的涂膜剂进行质量评价、含量测定和安全性评价。结果:筛选出知母皂苷涂膜剂的最佳处方为:聚乙烯醇1.5 g、丙二醇4 ml、知母皂苷酶水解产物10 mg,所制得的涂膜剂成膜时间短,成膜性好,质量稳定、符合规定,知母皂苷AⅢ含量为(0.27±0.10)mg/ml,且动物实验显示无毒、无皮肤刺激性。结论:该制备工艺简单,成膜性好,制得的知母皂苷涂膜剂质量可控,且安全无刺激。     

氧化铝柱层析制备高纯度栀子苷的工艺研究

目的:对氧化铝柱层析技术制备高纯度栀子苷的工艺进行研究。方法:以精制品中栀子苷(质量分数>90%)的转移率为指标,分别考察了氧化铝的种类、粒径、径高比、洗脱剂的种类和洗脱剂的用量等工艺参数,优选氧化铝柱层析技术纯化栀子苷的最佳工艺。结果:氧化铝柱层析工艺为:取适量层析用中性氧化铝(100～200目),装入玻璃柱中,径高比为5∶1,栀子苷粗提物的上样量为氧化铝用量的1/30,将其溶于少量蒸馏水中作为上样液,将上样液慢慢加入到氧化铝层析柱中,上样后用95%乙醇冲洗氧化铝柱,洗脱液用量为60倍柱体积。收集乙醇洗脱液,减压回收乙醇,干燥,得白色粉末状样品。结论:该工艺简便易行,效率高,可用于制备质量分数高于90%的栀子苷。     

壳多糖-胶原凝胶构建组织工程口腔黏膜固有层

背景：有研究探讨了以胶原/壳聚糖聚合物为支架材料构建组织工程人工皮肤的可行性。 目的：拟探讨以壳多糖-胶原凝胶支架材料与口腔黏膜成纤维细胞在体外构建人工固有层的可行性。 方法：口腔黏膜成纤维细胞取自成年鼠颊部、牙龈或腭部。以2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液、壳多糖等或2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液等按一定比例配置成凝胶溶液,将大鼠口腔黏膜成纤维细胞与上述凝胶溶液迅速混合制成口腔黏膜人工固有层,动态观察细胞生长状况和凝胶收缩情况。 结果与结论：胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物、壳多糖-胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物体外培养1 d,口腔黏膜成纤维细胞在支架材料中生长良好,细胞呈长梭形,排列无一定方向。随时间推移,口腔黏膜成纤维细胞逐渐增多,凝胶颜色变浅,厚度变薄,分别于2,3 d后发生收缩。结果证实,口腔黏膜成纤维细胞可在壳多糖-胶原凝胶形成的三维空间结构生长并分泌基质,形成类似黏膜固有层的致密结缔组织。壳多糖-胶原凝胶是构建组织工程化口腔黏膜固有层的合适材料。 关键词：口腔黏膜成纤维细胞;胶原;凝胶;壳多糖;组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.016     

同型半胱氨酸纤维蛋白原与冠心病的相关性分析

目的 探讨冠心病(CHD)患者血浆中的同型半胱氨酸(HCY)、纤维蛋白原(FG)与CHD类型及冠状动脉病变程度的相关性.方法 对拟诊为冠心病的138例患者行冠状动脉造影(CAG)检查[稳定性心绞痛35例(SAP组),不稳定心绞痛33例(UAP组),急性心肌梗死32例(AMI组),冠脉造影正常者38例(NC组)],测定患者血浆HCY,FG水平.结果 CHD各组患者血浆HCY水平与NC组相比非常显著增高(P＜0.01),AMI、UAP、SAP3组HCY水平依次降低,差异有统计学意义(P＜0.05);AMI组和UAP组患者血浆FG水平与NC组比较显著增高(P＜0.05),而SAP组与NC组比较差异无统计学意义.单支病变、双支病变、三支病变组血浆HCY、FG水平与NC组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),冠心病各组两两比较中单支病变与双支病变组HCY、FG水平差异无统计学意义,而这两组与三支病变间比较有非常显著差异(P＜0.01).结论 CHD患者HCY、FG水平与冠心病的病变程度和病变支数呈正相关.     

柴胡葛根有效部位对脂多糖诱导家兔发热模型的解热作用研究

目的 研究柴胡、葛根药对有效部位分用、合用对脂多糖诱导雄性家兔发热模型的解热作用.方法 采用水提-壳聚糖澄清-大孔树脂纯化法,制备了葛根总黄酮有效部位;采用醇提-大孔吸附树脂纯化法和水蒸气蒸馏法从柴胡中提取柴胡总皂苷和柴胡芳香水;将36只雄性家兔随机分为模型组、葛根总黄酮组、柴胡有效部位组、柴葛合用组、对乙酰氨基酚(阳性对照)组及柴胡注射液组,采用脂多糖0.5 μg/kg耳缘静脉注射建立家兔发热模型,研究葛根总黄酮及柴胡有效部位配伍前后的退热作用.以平均发热曲线及体温反应指数为指标,观察葛根总黄酮及柴胡有效部位配伍前后的退热作用.结果 柴葛合用时,退热效果显著(与模型组比较,P＜0.01),持续时间长(与柴胡组比较,P＜0.05).结论 柴胡葛根有效部位合用时解热效果佳.     

调节骨髓间充质干细胞向皮肤创面迁移过程中的血小板衍生生长因子

背景：血小板衍生生长因子具有创伤修复作用,对其研究大部分集中于骨组织的修复,在皮肤创伤愈合中的修复作用研究较少。 目的：观察血小板衍生生长因子在皮肤创伤愈合过程中调控骨髓间充质干细胞向创面迁移促进创面愈合的作用。 方法：培养大鼠骨髓间充质干细胞,免疫荧光检测细胞表面标记物CD34、CD44。选取健康雄性SD大鼠30只,随机分为5组,各组大鼠尾静脉注射PKH26标记的骨髓间充质干细胞。注射1周后,于大鼠背部正中线划长为3 cm的切口,制备皮肤创伤模型。造模后即刻于皮肤创伤处多点注射不同质量浓度血小板衍生生长因子干预药物,对照组注射等体积的生理盐水。注射14 d后留取皮肤创面组织进行相关指标检测。 结果与结论：荧光显微镜下观察血小板衍生生长因子能够剂量依赖性诱导骨髓间充质干细胞向皮肤创伤组织处迁移和聚集,进而促进皮肤创伤修复。Masson染色结果显示,随着血小板衍生生长因子干预质量浓度的增加,创面炎性细胞浸润减轻、胶原纤维数量不断增多。Western blot检测结果显示,血小板衍生生长因子能够抑制皮肤创伤组织基质金属蛋白酶1的表达,促进基质金属蛋白酶组织抑制因子1的表达,抑制胶原降解,发挥间接促愈合作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

骨髓间充质干细胞促进皮肤创伤愈合及细胞因子在愈合过程表达研究

目的    探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）促进皮肤创伤愈合作用及细胞因子在愈合过程中的表达变化。方法    本研究于2013年7月至2014年10月在沈阳万类生物技术实验室完成。体外分离、培养大鼠BMSCs,镜下观察细胞生长形态,取第3代BMSCs进行实验。流式细胞仪检测细胞表面标记物鉴定BMSCs。选择健康雄性SD大鼠48只,随机分成2组。于大鼠尾静脉注射PKH-26标记的BMSCs,1周后进行皮肤创伤模型制备,实验组于大鼠背部正中线划长3 cm的纵行切口,对照组不做创伤处理。荧光染色观察不同时间点正常皮肤及创面组织BMSCs数量、分布情况,HE染色观察不同时间点正常皮肤及创面组织病理变化情况。ELISA检测大鼠尾静脉血中不同时间点基质细胞衍生因子（SDF-1）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL-1β）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）的含量变化。结果    镜下观察培养第三代的BMSCs细胞形态为均一梭形,贴壁生长。BMSCs移植能够加速创面愈合,ELISA结果显示,BMSCs移植后血清中SDF-1α、TNF-α、IL-1β、bFGF和PDGF的含量随着创伤愈合进程呈先上升后下降的趋势。结论    BMSCs能促进大鼠皮肤创伤愈合。     

壳多糖-胶原凝胶构建组织工程口腔黏膜固有层

背景:有研究探讨了以胶原/壳聚糖聚合物为支架材料构建组织工程人工皮肤的可行性.目的:拟探讨以壳多糖-胶原凝胶支架材料与口腔黏膜成纤维细胞在体外构建人工固有层的可行性.方法:口腔黏膜成纤维细胞取自成年鼠颊部、牙龈或腭部.以2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液、壳多糖等或2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液等按一定比例配置成凝胶溶液,将大鼠口腔黏膜成纤维细胞与上述凝胶溶液迅速混合制成口腔黏膜人工固有层,动态观察细胞生长状况和凝胶收缩情况.结果与结论:胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物、壳多糖-胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物体外培养1 d,口腔黏膜成纤维细胞在支架材料中生长良好,细胞呈长梭形,排列无一定方向.随时间推移,口腔黏膜成纤维细胞逐渐增多,凝胶颜色变浅,厚度变薄,分别于2,3 d后发生收缩.结果证实,口腔黏膜成纤维细胞可在壳多糖-胶原凝胶形成的三维空间结构生长并分泌基质,形成类似黏膜固有层的致密结缔组织.壳多糖-胶原凝胶是构建组织工程化口腔黏膜固有层的合适材料.     

组织工程口腔黏膜固有层修复皮肤缺损的初步研究

目的探讨两种组织工程口腔黏膜固有层移植修复皮肤缺损的效果.方法分别以胶原凝胶和壳多糖-胶原凝胶为网架与体外培养的Wistar大鼠口腔黏膜成纤维细胞构建胶原凝胶口腔黏膜固有层(fibroblast-populated collagen lattice,FPCL)、壳多糖-胶原凝胶口腔黏膜固有层(fibroblast -populated chitosan collagen lattice,FPCCL),用BrdU标记其中的成纤维细胞后,移植修复同种异体大鼠背部全层皮肤圆形缺损.将36只21～25周龄Wistar大鼠分为FPCL组、FPCCL组及创口仅覆盖纱布的对照组,每组12只.术后行大体观察创面愈合情况;4、7、14和21 d 3组创面直径测量;组织学及免疫组织化学染色观察其组织修复情况.结果术后大鼠创面均无感染,创面结痂在14及17 d自然脱落,创面逐渐愈合,被新生表皮覆盖,术后21 d新生皮肤光滑,颜色与正常皮肤接近,无体毛.术后各时间点3组创面直径均逐渐变小,差异有统计学意义(P＜0.01),14 d以后,创口大小较稳定.术后7 d,FPCL组受植创面比FPCCL组受植创面和对照组创面小(P＜0.01).组织学观察:术后7 d,3组创面未完全表皮化;14、21 d,FPCL组、FPCCL组受植区完全表皮化,有钉突,对照组无明显钉突,表皮已分层,基底细胞层完整,最表面有角化物;真皮中新生胶原纤维细,含毛细血管.免疫组织化学染色显示,FPCL组、FPCCL组术后各时间点阳性成纤维细胞出现在肉芽组织的细胞密集处和新生真皮中,与新生肉芽组织共同参与了皮肤缺损的修复重建,未出现免疫排斥现象.结论口腔黏膜成纤维细胞作为修复皮肤缺损的种子细胞是可行和有效的,壳多糖胶原凝胶在限制受植区创面收缩变小方面优于单纯胶原凝胶.FPCL和FPCCL两组新生皮肤的质量优于对照组,两种组织工程口腔黏膜固有层作为皮肤缺损区永久性真皮替代物是可行和有效的.     

多指标综合评分法优选栀子炭炮制工艺

目的:用多指标综合评分法优选栀子炭炮制工艺。方法:用正交试验法考察炮制温度、炒制时间等影响因素,以栀子炭的性状、栀子苷和鞣质含量、凝血作用效果为指标,综合评分优选炮制工艺条件。结果:炮制温度时实验结果有显著性影响,为了达到炒炭存性的目的,炒炭温度不能高于200℃。栀子炭的最佳炮制工艺为A_1B_2C_2,即200℃,炒10 min,喷水少许后,再炒1 min至干。结论:用综合评分法优选出的栀子炭炮制工艺能较好地保证炮制品的质量。