在线微载体肝细胞荧光示踪研究

目的拟探讨SYTO/EB在微载体细胞培养中活体细胞原位示踪的应用价值。方法采用活细胞核酸染色剂(SYTO13)和溴化乙啶(EB)2种核酸染色剂对微载体生长的细胞进行双重染色,荧光显微镜下通过颜色不同判断细胞的活力状态并计算出活力百分比。以间接活力测定的四氮唑盐法同时对肝细胞进行活力的检测,并将结果进行比较。结果 2种方法测定的结果均可显示微载体生长的肝细胞。但SYTO/EB法更灵敏,可精确计数。结论 SYTO/EB测定微载体肝细胞的活力快速、灵敏且简便,并可原位观察细胞的活力,不失为一种可取的微载体活力检测方法。     

“不可思议”的藤类药材(二)

正清热通络类药材1.雷公藤雷公藤为卫矛科植物雷公藤的干燥根或根的木质部,又名"断肠草"。中医认为,其性寒,味苦、涩,有大毒,入肝、肾经,具有活血化瘀、清热解毒、消肿散结、杀虫止血等功效。鉴于雷公藤有毒,在入汤剂时用量应控制在10.0～15.0克(因其根中毒性成分较大,故带根皮者减量),文火煎1～2小时以减轻毒性;研粉服用时用量为1.5～4.5克;外用适量。内脏有器质性病变及     

可逆性后部白质脑病1例

患者,男,64岁,以"反复记忆障碍1年,发作性短哲性意识障碍1个月"为主诉2008年2月10日人院.患者于入院前1年,时有记忆丧失,迷失方向,行头颅MRI正常.     

16例双腔右心室合并室间隔缺损的手术治疗

双腔右心室（ＤＣＲＶ）多合并室间隔缺损（ＶＳＤ），本文对ＤＣＲＶ合并ＶＳＤ的发病、病理、手术矫治进行讨论。强调流出道疏通要彻底，ＶＳＤ修补要确切，避免误将右心室狭窄孔当作ＶＳＤ修补。     

一例精神分裂症伴重度营养不良的护理

精神分裂症临床症状多样复杂,几乎包括了精神科的全部症状和症状群,但是没有任何一个病例能表现出精神分裂症的所有症状。不同时期和不同类型的精神分裂患者有不同的表现,但无论如何精神分裂症自身临床表现具有其特征性,具有思维、情感、行为意向的不协调和脱离现实环境的特点,为护理工作带来很大的困难。     

荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞体内示踪方法

背景：利用荧光染料标记活细胞体内示踪的方法较多，但是应用荧光染料浓度差异实现不同细胞体内示踪的方法目前仍不成熟。 目的：观察不同浓度荧光活性染料CFSE标记的小鼠脾细胞体内示踪情况，建立稳定的单染料差异浓度标记活细胞的体内示踪方法。 方法：取C57BL/6J及BALB/c小鼠脾脏制备脾细胞单细胞悬液，分别用不同浓度CFSE染色后制备1∶1混合细胞悬液；锥虫蓝染色鉴定细胞活性；将染色的混合细胞输注BALB/c小鼠后不同时间点，流式细胞仪检测小鼠外周血两种荧光细胞的比例。 结果与结论：CFSE标记的小鼠脾细胞活力良好，荧光显微镜下见全部细胞标记后均发绿色荧光，形态正常，CFSE标记阳性率为95%。CFSE染色时，在浓度相差20倍时流式直方图才显示为两个完全独立的峰，即CFSE低浓度用0.3 μmol/L，高浓度用6 μmol/L。异基因的C57BL/6J脾细胞在输注1 d后就快速消失，而同基因BALB/c脾细胞能够在BALB/c小鼠外周血中长期存在，但是两种细胞荧光强度均未见降低，说明荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞进行体内示踪是一种稳定的示踪方法。     

25例脑血管患者家庭病床健康教育探讨

近几年随着人们生活水平的不断提高,一些危害健康的疾病居高不下,尤其在偏僻农村,在人为的生活作用下,脑血管病的死亡率与致残率极高,是人类健康的头号杀手,即使幸存者有2/3遗留不同程度的肢体瘫痪、失语、吞咽困难,重者长年瘫痪在床,给病人和家庭带来极大痛苦。面对这种现状,2005年9月至2007年11月,笔者对搜登站镇半拉山村25例脑血管患者进行家庭病床健康教育,已经初见成效。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠晚期糖化终末产物和骨质疏松的影响

非酶糖化反应在正常肌体即缓慢进行,产物随年龄增长而增加,老化过程能加速晚期糖化终末产物(AGEs)的形成,AGEs与骨质疏松密切相关,能启动或加重骨质疏松[1],故抑制蛋白的非酶糖化是防止骨质疏松的重要环节。研究发现大豆异黄酮能抑制AG-Es在卵巢切除大鼠主动脉积累[2],改善妇女更年期症状、防治心血管疾病[3]。本实验采用去卵巢动物模型,模拟绝经后状态,旨在研究大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的影响及相关生化指标的变化,探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。1材料和方法1.1材料及试剂Ⅶ型胶原酶为美国sigma公司产品,Hepes为G…     

黄芪提取物对冷冻保存原代人胎肝细胞的保护作用

目的:观察黄芪提取物(AE)对原代人胎肝细胞经冻存复苏后活性变化的影响,以探索改善人肝细胞冻存效果的新方法。方法:采用二步灌注法分离人胎肝细胞,细胞分别加入由不同浓度AE配制的五种冻存保护剂(Ⅰ:10%DMSO;Ⅱ:5%DMSO 2 mg/L AE;Ⅲ:5%DMSO 20 mg/L AE;Ⅳ:5%DMSO 60 mg/L AE;Ⅴ:5%DMSO 100 mg/L AE),冷冻保存1个月。1个月后快速复苏,进行细胞活率、形态学及基本功能检测。结果:人胎肝细胞在经不同保护剂冻存复苏后,其活率、形态学及功能表现有所不同,其中Ⅳ、Ⅴ组复苏后细胞的存活率和24 h贴壁率,与Ⅰ组无显著差异(P>0.05),但显著高于Ⅱ、Ⅲ处理组(P<0.05);Ⅳ组复苏后细胞的白蛋白与天门冬氨酸转氨酶浓度测定、氯化铵转化实验结果显著优于其它各组(P<0.05)。结论:AE可对原代人胎肝细胞冷冻保存有保护作用,其中60 mg/L是最佳浓度;AE与二甲基亚砜联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用。     

缺血预处理对小型猪肝移植的影响

目的 通过分析小型版纳猪供肝经过缺血预处理后产生的保护效应,为缺血预处理的临床应用提供理论依据.方法 将实验用小型版纳猪25只随机分成正常对照组、缺血再灌注组、缺血预处理组.通过速率法检测血清AST、ALT的活性变化,采用HSP70免疫印迹法检测HSP70的表达量,观察光镜和电镜下细胞形态学损害.结果 缺血预处理组HSP70表达量明显增加(P＜0.01),由光镜和电镜下的病理可以看到缺血预处理组的急性排斥反应和缺血再灌注损伤明显减轻,术后血清AST、ALT在缺血预处理组和缺血再灌注组与正常对照组相比均明显增加(P＜0.01),但缺血预处理组比缺血再灌注组明显减少,减少有显著性差异(P＜0.01).结论 经过2个循环10 min的缺血预处理,对供肝产生了明显的保护效应.缺血预处理对HSP70的表达起正性调控作用.