缺血再灌注损伤不同时期小鼠脑组织基因表达谱的研究

目的探讨缺血再灌注损伤不同时期小鼠脑组织基因表达的变化。方法建立脑缺血再灌注损伤C57BL/6小鼠模型,用BiostarM蛳20s型表达谱芯片检测脑缺血再灌注损伤后48h、10d的小鼠脑组织基因表达的变化情况。结果脑缺血再灌注损伤后48h时,DNA合成、修复、转录相关基因(ORC基因)表达上调,有利于脑缺血再灌注损伤后脑组织修复;细胞信号和传递蛋白相关基因(PP1基因)表达下调,能稳定内皮细胞屏障,减轻脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注后10d时,HBVXIP基因表达下调,可促进细胞凋亡,加重脑细胞损伤,可能与延迟性神经元坏死有关。结论应用基因芯片技术能够探索脑缺血再灌注损伤的分子生物学机制。     

Effects of hyperbaric oxygen on TF、TNF-α in the rabbit model of steroid-induced avascular osteonecrosis of femoral head

Objective To investigate dynamic changes in serum TF and TNF-α in the rabbit model of steroid-induced avascular osteonecrosis of femoral head ( SANFH) and also to explore the mechanism of SANFH, as well as effects of hyperbaric oxygen ( HBO) on SANFH. Methods Seventy-eight New Zealand male rabbits were randomly divided into 3 groups:the normal control (group N) (7 animals), the model group (group M) (41 animals) and the HBO group (group H) (30 animals). The model group was subdivided into the immediate model group (the M0 group) (10 animals), the two-week model group (the M2 group) (10 animals), the four-week model group (the M4 group) (10 animals) and the six-week model group (the M6 group) (11 animals). The HBO group was further divided into the 2-week HBO therapy group (HBO2) (7 animals), the 4-week HBO therapy group (HBO4) (11 animals) and the 6-week HBO therapy group (HBO6) (12 animals). Through injection of endotoxin and methyl-prednisolone, rabbits in the group HBO2, HBO4 and HBO6 received HBO therapy 1 hour daily from the second day of the experiment. The durations of HBO therapy were 2 weeks ( HBO2), and 4 weeks respectively. The animals were sacrificed after blood samples were taken at respective blood collection time. Then, levels of TF, TNF-α in the serum were measured and the histological changes in the femoral heads were observed. Results Levels of TF and TNF-α in group M0 increased significantly, when compared with those of group N (P ＜0. 05 or P ＜0.01), while for the HBO subgroups the expression of TF and TNF-α measured at the same time points all decreased, when compared with that of the model subgroups (P＜0. 05 or P ＜0.01). To elaborate, TF levels in group M2 and M4 were much higher than those in group HBO2 and HBO4 ( P＜0. 01 ). TF level in group M6 was higher than that in group HB06 ( P ＜ 0.05). TNF-α in group M0 also increased significantly, when compared with that in group N( P ＜0.01). TNF-α levels in group M2 and M6 were also much higher than those in group HBO2 and HBO6 ( both P ＜0. 01 ). TNF-α in group M4 was higher than that in group HBO4 (P＜0.01). Histological examination revealed that tissues of the femoral heads in group N were normal, osteonecrosis and thrombus could be noted in group M2 and M4, hyperplasia fibrosis could be found in group M6, and osteonecrosis in HBO2 and HB04 groups seemed less severer than that in M2 and M4 groups, no thrombi in HBO2, HBO4 groups were noted, and growth of new bones were detected in HBO4 and HBO6. Conclusions The levels of TF and TNF-α levels increased in the rabbit model of SANFH, inducing blood coagulation. Thrombosis at the femoral heads was one of the causes of SANFH. HBO therapy could inhibit the release of TF and TNF-α, thus improving the abnormality of blood coagulation and enhancing treatment of osteonecrosis.     

高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠血清蛋白脂质蛋白质抗原、抗体的影响

目的 观察急性一氧化碳中毒(acute carbon monoxide poioning,ACOP)大鼠血清中蛋白脂质蛋白质(proteolipid protein,PLP)抗原、抗体的变化,探讨免疫机制在ACOP中的作用以及高压氧(HBO)治疗可能的作用机制.方法 202只大鼠按随机数字表法分为3组:染毒组(CO组),高压氧组(HBO组),常压氧组(NBO组).采用静态一氧化碳吸入法建立ACOP大鼠模型.染毒前及染毒后即刻、100 min和3、7、10、20 d取腹主动脉血,用ELISA法测定血清PLP抗原、抗体的含量.结果 染毒后即刻CO组、HBO组和NBO组PLP抗原及抗体均较染毒前升高(P＜0.05).HBO组100 min时PLP抗原低于CO组(P＜0.05);3、7 d时PLP抗体低于CO组(P＜0.05);3、10 d时HBO组PLP抗体低于NBO组(P＜0.05);7、20 d时NBO组PLP抗体低于CO组(P＜0.05).结论 ACOP后大鼠存在自身免疫反应及髓鞘损伤,及时、规律的HBO治疗可减轻髓鞘损伤.     

高压氧对脑梗死患者血浆蛋白C与蛋白S的影响

目的观察高压氧(HBO)对脑梗死患者血浆蛋白C(PC)与蛋白S(PS)的影响,探讨HBO治疗脑梗死的作用和机制.方法将脑梗死急性期患者分为常规治疗组及HBO治疗组,用酶免法分别测定两组患者治疗前及治疗后血浆蛋白C与蛋白S水平,观察HBO治疗前后的变化.结果脑梗死急性期治疗前两组患者血浆PC、PS水平均明显下降,治疗后HBO治疗组患者血浆PC、PS水平明显高于常规治疗组,并且恢复正常,而常规治疗组患者血浆PC、PS水平仍低.结论HBO可促进脑梗死患者血浆PC、PS水平恢复正常,减轻神经系统损伤,对脑梗死有治疗作用.     

心肺复苏后脑功能障碍与高压氧治疗

Neumar等[1]2008年提出的心脏骤停后综合症(post cardiac arrest syndrome,PCAS)是一个独特而复杂的病理生理学过程,它包括:(1)心脏骤停后脑损伤,(2)心脏骤停后心肌功能障碍,(3)全身性缺血/再灌注反应,(4)持续诱因性病变(引起心脏骤停的未解除的病理过程).日渐增多的研究表明,心脏骤停后综合征的每个组份均具有潜在的可治疗性. 一、心脏骤停后脑功能障碍 心脏骤停(cardiac arrest,CA)后脑功能障碍是死亡的常见原因.CA复苏后脑血流动力学变化是影响脑复苏的重要因素,脑灌流不全影响CA复苏后脑功能恢复.正常血压下CA(≥10 min)复苏后脑灌流不全的再灌流过程分为4期[2]:(1)多灶性无再灌流:CA复苏后即刻发生,它与脑微循环改变和低灌流压有关,通过升高血压而提高脑灌流压,此期是可以逆转的;(2)短暂全脑反应性充血:持续15 ～ 30 min,可能与脑血管麻痹有关,同时颅内压(intracranial pressure,ICP)轻微短暂升高;(3)延迟性、持续全脑多灶低灌流:CA后2～12 h明显,此期ICP维持正常.     

一氧化碳中毒临床治疗指南(三)

7.糖皮质激素:有快速、强大而非特异性的抗炎作用,在炎症初期抑制毛细血管扩张,减轻血管内皮细胞的水肿和血管内膜炎症,从而改善脑的血液循环;其次,能提高中枢神经系统的兴奋性,减轻对神经细胞的损伤;此外糖皮质激素的抗炎作用有促进肺间质液体吸收,促进肺泡Ⅱ型细胞分泌表面活性物质缓解支气管痉挛,抑制肺纤维化等多种功能;还可有效抑制体内自由基的生成,对脂质过氧化反应具有剿灭作用.COP后应用糖皮质激素是否能够减轻神经损伤、恢复神志及预防迟发脑病尚未得到共识.有学者认为,ACOP后患者中枢神经系统存在的脱髓鞘病变可能与免疫反应有关.近期国内有一项RCT研究认为[35],与对照组(单纯高压氧)相比,糖皮质激素+ HBO组患者平均昏迷时间无显著差异,在30 d时,糖皮质激素+HBO组迟发脑病发生率大大降低.另一项RCT研究[36]结果显示,糖皮质激素组与对照组相比可以降低迟发脑病的发生率,高压氧+糖皮质激素效果最优.ACOP患者往往出现应激性上消化道溃疡出血,糖尿病患者使用时可致血糖升高,应限制其使用.     

对一氧化碳中毒迟发性脑病相关因素的研究

目的 观察一氧化碳中毒（COP）后大鼠脑组织一氧化氮合酶（NOS）、外周血内皮细胞计数、血小板体积变化、血小板CD61表达、多形核白细胞粘附分子（CD11b/CD18)表达、海马神经细胞凋亡细胞百分比及线粒体膜电位的改变。方法 Wistar大鼠共16只随机分成正常对照组及一氧化碳中毒组各8只,制作COP动物模型,用流式细胞仪测定大鼠脑组织一氧化氮合酶（NOS）、外周血内皮细胞计数、血小板体积变化、血小板CD61表达、多形核白细胞粘附分子（CD11b/CD18)表达的动态变化,海马神经细胞凋亡细胞百分比及线粒体膜电位的改变,用分光光度法测定血浆组织型纤溶酶原激活剂（tPA)和抑制剂（PAI）。结果 COP后NOS水平降低,血小板活性增高,纤溶系统变化不明显。细胞粘附分子表达增加,线粒体膜电位降低,凋亡细胞数增加。结论 COP后血小板活必增高,细胞粘附分子表达增强,导致脑微小动物血栓形成趋势并引起白细胞浸润造成脑组织损伤,是COP迟发性脑病的重要发病因素之一。     

高压氧对家兔随意皮瓣血管内皮生长因子和缝隙连接蛋白的影响

目的 探讨高压氧对家兔随意皮瓣毛细血管增殖作用的机制.方法 建立家兔背部随意皮瓣模型,予高压氧治疗,观察第3天和第7天时对照组和高压氧组皮瓣中毛细血管密度及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、缝隙连接蛋白(CX43)的含量变化情况.结果 高乐氧组皮瓣毛细血管密度(第3天11.63±2.94,第7天13.84±3.49)明显高于对照组(第3天9.13±2.00.第7天10.51±3.01)(第3天时P<0.05,第7天时P<0.01);第3天和第7天时高压氧组皮瓣VEGF(第3天5.50±1.68,第7天5.81±1.64)表达明显高于对照组(第3天4.55±1.06,第7天4.63±1.24)(分别为P<0.01);高压氧组皮瓣CX43(第3天4.08±0.88,第7天4.60±0.97)表达明显高于对照组(第3天3.28±0.68,第7天3.60±1.01)(第3天时P<0.01,第7天时P<0.05).结论 高压氧治疗促进家兔随意皮瓣毛细血管增殖的作用机制之一可能是通过增加皮瓣组织中VEGF、CX43的表达而促进新生毛细血管形成.     

高压氧对大鼠脑缺血再灌注后碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响

目的 探讨高压氧对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体(FGFR)表达的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠80只,随机分为模型对照组和高压氧暴露组.2组再各分5组,分别为腩缺血1 h再灌注后1、3、5、7、14 d组,每组8只.应用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),进行高压氧暴露,免疫组化检测bFGF和FGFR的表达.结果 脑缺血再灌注后1 d,神经细胞即出现bFGF和FGFR的表达,3 d达高峰,后逐渐减弱,至14 d时仍有表达;高压氧暴露组神经细胞bFGF和FGFR表达的变化趋势与对照组相似,但是同一时间点均明显高于对照组.结论 高压氧通过促进bFGF和FGFR表达,可能激活内源性神经保护机制.