多器官衰竭家兔肝、肺β受体的研究

对由失血性休克加喂菌所致多器官功能衰竭(2个以上器官)家兔的肝、肺β受体进行测定。正常兔肝组织细胞膜制剂与浓度逐渐增高的~3H-DHA结合显示逐渐饱和,求得最大结合容量(Bmax)为95.36±53.68fmol/mg蛋白,平衡解离常数(Kd)为1.55±0.64nM。致伤兔肝细胞膜β受体表现受体结合部位的最大容量     

转移生长因子和动脉粥样硬化

人和动物实验的很多证据发现动脉粥样硬化的发生和各种损伤诱导的血管内皮增生 ,均起因于内源性阻抑系统的功能丧失 ,从而限制了损伤的正常修复。其中最为关键的是转移生长因子 (ｔｒａｎｓｆｏｒｍ ｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＴＧＦ) β的作用。正常人的平滑肌细胞 (ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＳＭＣ)表达Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＴＧＦ β受体 ,而损伤斑块中的血管内皮细胞Ⅱ型受体表达显著降低 ,而Ⅰ和Ⅲ型基本不变。同时Ⅱ型ＴＧＦ β受体ｍＲＮＡ在损伤的血管内皮细胞表达也显著下降。如果导入Ⅱ型ＴＧＦ β受体则可以明显恢复Ｔ…     

大鼠窒息心脏骤停期间心脏和肺脏β肾上腺素能受体的变化

目的 :研究心脏停搏期间机体 β肾上腺素能受体的变化。 方法 :采用放射性配基结合分析方法 ,检测大鼠在窒息心脏停搏期间心、肺 β肾上腺素能受体 (β受体 )的变化。动物随机分为正常对照 (A)、手术对照 (B)、窒息 10min (C)、2 0min (D)和 30min (E) 5组。结果 :心、肺C组 β受体分别为 (34 5 1± 3 2 5 )fmol/mgpr和(2 89 4 6± 19 96 )fmol/mgpr。心、肺D、E组 β受体分别为 (4 0 96± 2 91)和 (6 4 4 4± 3 2 0 )fmol/mgpr及 (4 2 6 33± 12 0 8)和 (4 5 5 6 7± 2 8 77)fmol/mgpr,与C组比较 ,差异极其显著 (P <0 0 1)。心、肺各窒息组间受体亲和力无明显变化。结论 :在窒息心停早期 ,心、肺β受体数量无明显变化 ,随着心脏停搏时间延长 ,其数量明显增加。     

人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定

为了获得有免疫原性的人脂皮素－1（lipocortin-1,LC-1)蛋白,以便疫动物获得抗体,建立了免疫分析方法,而且更深入地探讨LC－1抗炎机制及其在临床上的应用。采用基因工程的方法进行重组人LC－1的原核表达并鉴定,主要结果如下：（1）从U937细胞中提取总RNA,以此为模板行反转录PCR,成功地扩增了1038bp的人LC－1cNDA基因,并将此基因全长克隆入pUC18载体,经测序分析证实克隆序列与文献报道的序列基本一致。（2）成功地构建了原核表达质粒pBV220/LC-1并在大肠杆菌中实现表达,经SDS－PAGE电泳和Western免疫印迹分析,证实重组菌产生37kD的表达产物,且此蛋白可与LC－1抗体特异结合,实现了人LC－1基因的克隆及原抗表达,获得了有免疫学活性的LC－1,为LC－1的基础研究和临床应用奠定了基础。     

25-羟基维生素D化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立一种竞争法定量检测人血清血浆中25-羟基维生素D[25-(OH)D]的免疫分析方法.方法 本研究以磁颗粒-链酶亲和素-生物素为固相分离系统,样本中加入解离剂使维生素D结合蛋白(vitamin D binding protein,VDBP)变性而使25-(OH)D游离出来,用生物素标记25-(OH)D,用吖碇酯标记一株抗-25-(OH)D的绵羊单抗,溯源到国际标准品,建立25-(OH)D定量免疫分析方法.结果 此分析方法空白限不高于1.0 ng/mL;批内不精密度不超过5％,批间不精密度不超过10％;在线性范围为6～200 ng/mL;与金标准方法LC-MS/MS相比,相关性在0.97以上,偏差在±30％内,无系统偏差.结论 该25-(OH)D化学发光定量检测方法,性能优异,适合临床推广使用.     

高灵敏电化学发光法特异性测定人血清抗甲状腺球蛋白抗体

目的 通过竞争法一步法原理,建立一种检测人血清抗甲状腺球蛋白抗体(anti-TgAb)的电化学发光免疫分析(ELICA)方法.方法 将样本、三联吡啶钌标记抗体和生物素标记甲状腺结合球蛋白(thyroglobulin,Tg)抗原三者共同孵育形成抗体-抗原复合体,再加入链霉亲和素包被的磁微粒与该复合物共同孵育形成钌标记抗体-生物素抗原-链霉亲和素磁颗粒复合物,通过磁场固定洗涤去除游离物质;然后加入三丙胺得到相对光子强度(relative light units,RLU).检测该方法的灵敏度、线性范围、精密度、准确度及稳定性,并与罗氏公司的anti-TgAb检测试剂盒进行对比.结果 anti-TgAb的最低检测限为5 IU/mL,线性范围为10～1000 IU/mL,准确度为0.900～1.100,批内变异和批间变异均小于5％.与罗氏公司anti-TgAb检测试剂盒的相关系数r=0.996(n=50),稳定性测试(37℃,8d)中,各项性能指标变异程度均符合标准[线性相关系数r=0.9998,准确度低值0.94,准确度高值0.93,批内精密度(CV)高值3.77％,低值4.34％].结论 该方法各项性能指标(灵敏度、精密度、准确度、稳定性等)均能达到临床检测要求,可供临床检测使用.     

不同液体复苏对大鼠急性失血后早期肺损伤的影响

目的：比较临床常用液体用于创伤性失血性休克液体复苏后肺组织损伤程度的影响，为创伤失血性休克实施理想的液体复苏治疗提供依据。方法：比较急性失血大鼠以不同液体复苏后血清细胞因子水平、肺通透性指数变化及肺组织形态学改变。结果：ＬＲ组血清ＴＮＦα，ＩＬ－６水平高于其它各组，病理检查肺泡腔同液最明显，胶体复苏组ＢＡＬＦ中蛋白含量明显高于晶体组。结论：急性失血以不同液体复苏后早期即出现程度不同的肺损伤；ＴＮＦ     

失血性休克再灌注损伤时血浆磷脂酶A2及其水解产物的变化

目的和方法：采用家兔失血性休克／再灌注（Ｓ／Ｒ）模型，以放射免疫法分析了动物血清中磷脂酶Ａ２及其活性产物血栓素（ＴＸＢ２）、前列环素（ＰＧＩ２）在损伤过程中的变化规律，同时观察了氯喹及其同类化合物磷酸萘酚喹、抗氧化剂黄芪酮对Ｓ／Ｒ损伤后上述ＰＬＡ２活性产物的影响。结果：氯喹可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值恢复于接近正常；磷酸酚喹和黄芪酮也可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值显著低于Ｓ／Ｒ损伤组：ＨＣＯ－３和ｔＣＯ２也得以接近于正常水平。结论：Ｓ／Ｒ过程中ＴＸＢ２的增高导致的ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值改变可能对循环有重要影响；氯喹类化合物及环氧化物酶抑制剂可能通过抑制ＰＬＡ２活性及降低ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值，促进全身循环和呼吸系统功能恢复正常     

TNF致伤对无菌大鼠肝组织β受体和磷脂酶A_2活性的影响

肿瘤坏死因子(TNF)对许多肿瘤组织具有破坏作用。在严重烧伤病人感染期血浆中测出较正常人增高5—10倍的TNF,提示TNF可能是一种直接的毒性因子。我们采用无菌大鼠18只,雌雄不限,体重200至220g,