视黄醇结合蛋白4在去势小鼠非酒精性脂肪性肝病模型中的表达及意义

目的探讨视黄醇结合蛋白4（RBP4）在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）去势小鼠中的表达变化及意义。方法将30只8周龄雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为高脂+去势组、去势组和对照组,每组10只;高脂饮食诱导小鼠NAFLD,手术切除双侧卵巢建立去势模型,20周后处死小鼠;称重、收集3组小鼠血清和肝脏组织。HE及油红O染色法观察肝组织形态学改变和肝细胞质内脂质沉积情况,NAS积分和Ishak标准评价肝脂肪变性和纤维化程度;ELISA法检测血清RBP4蛋白表达水平,免疫组织化学染色法观察肝组织RBP4蛋白表达水平,Westernblot法检测肝组织RBP4蛋白及脂肪酸合成酶（FAS）、固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）等肝组织脂质合成代谢相关蛋白相对表达量。结果与对照组比较,高脂+去势组小鼠体重、肝脏指数及NAS评分均明显升高（均P＜0.01）,血清和肝组织RBP4及FAS、SREBP-1c蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.01）。结论RBP4蛋白与高脂饮食诱导的NAFLD严重程度相关,可能通过肝脂质合成代谢途径参与绝经后NAFLD的发生。     

IL-2及IL-2Rα 基因多态性与汉族儿童支气管哮喘的关联

目的探讨IL-2（rs6822844）及IL-2Rα （rs2104286）基因多态性和汉族儿童支气管哮喘发生的关联。方法随机选取144 例支气管哮喘患儿为病例组,228 例健康儿童为对照组。用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）直接测序鉴定各位点基因型;同时采用qRT-PCR检测对照组IL-2Rα 各基因型外周血IL-2Rα信使核糖核酸（mRNA）相对表达量,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各基因型血浆sIL-2Rα水平。结果IL-2Rα （rs2104286）位点等位基因 A 在病例组分布频率（86.8%）高于对照组（79.4%）（oR=1.708,95%CI：1.113,2.629,p =0.010）,病例组中AA 基因型分布频率（75.0%）高于对照组（62.3%）（ OR=1.745,95%CI：1.058,2.884,p=0.021）;未发现IL-2Rα（rs6822844）位点有多态性分布。对照组中IL-2Rα （rs2104286）位点基因型个体外周血IL-2Rα mRNA相对表达量以及血浆sIL-2Rα水平均高于基因型（Z =-2.029和-2.361,=0.043 和0.018）。结论IL-2Rα （rs2104286）基因多态性可能与汉族儿童支气管哮喘发生相关,而且该位点基因型可影响其转录及表达。     

DRD2和DAT基因启动子区CpG岛甲基化状态与双相情感障碍的关联研究

目的探讨多巴胺受体D2型(DRD2)和多巴胺转运体(DAT)基因启动子区CpG岛甲基化状态与双相情感障碍的关联。方法运用甲基化特异性PCR和直接测序法对103例双相情感障碍患者(病例组)和100例健康体检者(对照组)DRD2和DAT基因启动子区甲基化状态进行检测,分析两组DRD2和DAT基因甲基化状态差异。结果双相情感障碍患者和正常人DRD2和DAT基因启动子区甲基化阳性率差异无统计学意义(χ2分别=0.63、0.35,P均>0.05);两组间DRD2和DAT基因启动子区甲基化率差异无统计学意义(t分别=1.54、1.52,P均>0.05)。双相情感障碍患者DRD2基因启动子区CpG岛内位点甲基化率在性别、年龄、家族史和临床分型中之间差异无统计学意义(t分别=0.66、1.09、1.65、1.67,P均>0.05);DAT基因启动子区CpG岛内位点甲基化率在性别、年龄、家族史和临床分型中之间差异无统计学意义(t分别=1.09、1.35、1.15、0.62,P均>0.05)。结论 DRD2和DAT基因启动子区CpG岛甲基化状态和双相情感障碍可能无明显关联。     

肺炎支原体培养和药物敏感试验在小儿呼吸道感染疾病中的应用

肺炎是我国儿童常见的疾病,是导致小儿病死的首位原因,肺炎支原体(mycop lasm a pneumon iae,MP)是其常见病原体之一[1]。MP是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物,没有细胞壁,专性细胞内寄生,但能在人工培养基上生长。国内最常用的检测方法是ELISA法和荧光定量聚合酶链反应(FQ     

肝素酶在胃癌组织中表达的临床意义探讨

目的:探讨肝素酶表达在胃癌发生、发展中的作用。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定42例胃癌和26例非癌组织中肝素酶的表达情况。采用χ2检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果:胃癌中肝素酶呈阳性表达26例(61.9%);非癌组织中呈弱阳性表达1例(3.8%)。RT-PCR和FQ-PCR的检测结果均相同。胃癌TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期肝素酶mRNA表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);肝素酶表达与浆膜浸润、淋巴结转移或远端转移呈相关性(P<0.05)。结论:肝素酶可能促进胃癌浸润和转移,在胃癌的转移途径中,参与淋巴道转移而非血道转移。肝素酶可作为预测胃癌复发、转移的分子标志物之一。     

慢性乙型肝炎病毒感染者病毒基因型分布及其与肝纤维化和肝细胞癌的关系

目的 调查浙江省杭州地区慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者的HBV基因型分布,并分析基因型与肝纤维化和肝细胞癌的关系.方法 回顾性分析2007年6月至2012年6月在杭州市第一人民医院就诊的190例慢性HBV感染者的血清学、病毒学指标和临床病理学资料.190例患者根据病理及相关检测分为慢性乙型肝炎(CHB)组(62例)、肝硬化组(60例)和肝细胞癌组(68例).HBV基因型测定采用多重PCR扩增,基因亚型测定采用PCR扩增结合限制性片段长度多态性(RFLP)方法.采用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 190例慢性HBV感染者中,B基因型感染61例(32.1％),C基因型感染126例(66.3％),3例为B、C基因混合型感染.其中,B基因型全部为B2亚型,C基因型中C2亚型占绝对优势(97.6％,123/126).B基因型在CHB组的比例(46.8％,29/62)高于肝硬化组(20.0％,12/60)和肝细胞癌组(29.4％,20/68)(x2=8.73和4.16,P＜0.01或＜0.05);C基因型在肝硬化组和肝细胞癌组的比例高于CHB组(x2=9.54和4.17,P＜0.01或＜0.05).三组患者中感染C2基因亚型的血清透明质酸(HA)水平高于感染B2基因亚型的患者(t=2.685,2.433和2.015,P＜0.01或＜0.05).CHB患者中感染C2基因亚型者比感染B2基因亚型者有更高的肝纤维化分期(x2=6.726,P=0.010),而肝脏炎症分级差异无统计学意义(x2=0.601,P＞0.05).肝细胞癌患者中,感染B2基因亚型者肿瘤直径≥5 cm的比例更高(x2=7.231,P＜0.01),感染C2基因型者伴肝硬化更常见(x2 =4.910,P＜0.05).结论 浙江省杭州地区CHB患者以C2和B2基因亚型为主.感染C2基因亚型的患者可能更易发展为严重肝纤维化,而感染B2基因亚型的患者和大肝癌相关.     

叶酸代谢基因多态性与出生缺陷的关系

随着我国新生儿出生死亡率明显降低,出生缺陷问题日益突出。在降低新生儿出生缺陷发生率的众多研究中,发现叶酸吸收代谢途径基因多态性与出生缺陷发生存在明显相关性。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)677C>T多态性与神经管缺损发生明显相关已取得较为一致的结论。但MTHFR 677C>T、MTHFR 1298A>C在唇裂/腭裂、先天性心脏病、唐氏综合征的发生中所起的作用结论尚不统一,并且较少涉及叶酸代谢通路中甲硫氨酸合成酶(MTR)2756A>G、甲硫氨酸合成还原酶(MTRR)66A>G、还原型叶酸载体-1(RFC-1)80A>G多态性与出生缺陷的研究。就叶酸来源、吸收代谢途径及代谢途径关键基因多态性与出生缺陷的相关性进行综述。     

EGF+61基因多态性与肝硬化的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)G61A位点(EGF+61)多态性与肝硬化发生、发展的关系.方法 运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测中国人群中147例肝硬化患者和227例正常对照者中EGF+61位点的基因型,分析其基因型及等位基因的分布频率.结果 EGF+61位点AA基因型及A等位基因在正常对照者中的分布频率均高于肝硬化患者(7.0% vs 6.1%,30.4% vs 27.2%),但其差异均无统计学意义(P＞0.05).EGF+61位点AA基因型及A等位基因在不同的Child-Pugh分级的肝硬化中的分布频率及规律不一,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在中国人群中,EGF+61位点的基因多态性与肝硬化的发生和发展无密切相关性.     

慢性乙型肝炎患者血清病毒载量与IFN-γ和IL-4含量关系探讨

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者血清病毒载量与IFN- γ和IL-4的关系,为CHB治疗提供理论依据.方法荧光定量聚合酶链反应( FQ-PCR)检测HBV DNA含量和酶联免疫吸附法(ELISA)检测IFN-γ和IL-4含量.按HBV DNA含量 (拷贝/ml)把CHB患者分为高病毒载量组(≥107/ml),中载量组(106～105/ml)和低载 量组(＜105/ml).结果 CHB患者与正常对照组比较:IFN-γ显著降低( t＝4.20,P＜0.01),IL-4显著增高(t＝6.36,P＜0.01).高、中、低 载量组之间比较:IFN-γ、IL-4含量有显著差异(分别F＝3.65,P＜0.05,F＝4.89 ,P＜0.05).IFN-γ在高载量组最低,低载量组最高;IL-4在低载量组最低,高载量 组最高.结论 CHB患者存在一定程度TH1/TH2型细胞的失平衡,以TH 2型细胞因子表达占优势,并随着病毒载量增高而加重.因此,调节TH1/TH2 型细胞平衡有助于清除HBV和治疗CHB.     

IL-2、IL-2Rα及IFN-γ基因多态性与汉族儿童支气管哮喘的关联

目的探讨IL-2(rs6822844)、IL-2Rα(rs2104286)及IFN-γ(rs2430561)多态性位点与汉族儿童支气管哮喘的关联。方法选取144例汉族支气管哮喘患儿为研究组,并以性别、年龄配对的228例汉族无支气管哮喘儿童作为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测IL-2(rs6822844)、IL-2Rα(rs2104286)及IFN-γ(rs2430561)的等位基因及基因型;采用实时荧光PCR检测对照组IL-2Rα各基因型外周血IL-2RαmRNA相对表达量,采用ELISA检测其各基因型血浆sIL-2Rα水平。结果IL-2Rα(rs2104286)位点等位基因A在研究组分布频率（86.8%）高于对照组（79.4%）（OR=1.708,95%CI：1.113~2.629,P=0.010）;研究组中AA基因型患者分布频率（75.0%）高于对照组（62.3%）（OR=1.745,95%CI：1.058~2.884,P=0.021）;未发现IL-2(rs6822844)位点有多态性分布,IFN-γ(rs2430561)位点等位基因及基因型频率在两组中分布差异均无统计学意义（P=0.182、0.205、0.421）。研究组中IL-2Rα(rs2104286)位点AA基因型个体外周血IL-2RαmRNA相对表达量以及血浆sIL-2Rα水平均显著高于AG基因型（P=0.043、0.018）。结论IL-2Rα(rs2104286)位点可能与汉族儿童支气管哮喘发生相关,而且该位点可能影响其转录表达。