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目的构建中国境内携带荧光素酶报告基因的B、B′C及AE亚型的HIV-1假病毒,研究该假病毒在检测病毒嗜性及中和抗体试验中的初步应用,为HIV-1的研究搭建一个方便、快捷且安全的平台。方法通过RT-PCR将3种亚型膜蛋白全长扩增,转化到表达质粒,构建膜蛋白质粒,与HIV骨架质粒共转染293T细胞,获得假病毒颗粒。假病毒感染GHOST细胞后,通过测定荧光值(RLU)来确定假病毒的感染效率、辅助受体使用情况及评价中和抗体作用。结果携带荧光素酶报告基因的HIV-1假病毒感染CD4+CCR5+CXCR4+GHOST细胞后,经检测被感染细胞的荧光值显著大于阴性对照组,证明假病毒能够在体外有效地感染GHOST细胞;利用辅助受体抑制剂方法确定了假病毒毒株的嗜性;假病毒感染GHOST细胞可被同亚型血清中和作用所抑制,抑制率随血清稀释度增加而减小。结论获得了携带荧光素酶报告基因的HIV-1假病毒,并初步证实了该假病毒可应用于病毒嗜性及中和抗体试验。 相似文献
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目的:建立自体人类免疫缺陷病毒 (Human Immunodeficiency Virus, HIV) 感染的CD4 T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合症 (Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS) 患者γδ T 细胞对自体HIV感染和未感染的CD4 T细胞的杀伤作用。方法:分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞 (PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4 T细胞,加入植物血凝素(Phytohemagglutinin, PHA)和白细胞介素-2 (interleukin-2, IL-2) 共同培养,建立自体HIV感染的CD4 T细胞模型。流式细胞术检测HIV-p24+ CD4 T细胞的比例。乳酸脱氢酶 (Lactate dehydrogenase, LDH)法测定γδ T 细胞的细胞毒作用。结果:培养到第10 d时,HIV-p24+CD4 T细胞的比例达到最高值。AIDS患者的γδ T 细胞能够杀伤自体HIV感染和未感染的CD4 T细胞(细胞溶解率分别为71.1 ± 9.7和24.2 ± 18.2)。而健康志愿者γδ T 细胞对自体的CD4 T细胞没有杀伤作用(细胞溶解率为4.3 ± 10.1)。结论:AIDS患者γδ T 细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4 T细胞,为采用γδ T 细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据。 相似文献
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目的 分析北京市男男性接触(men who have sex with men,MSM)人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)早期感染者CD4+T细胞及其亚群的动态变化规律.方法 选择HIV阴性对照组12例和HIV急性期感染者18例,均来自于北京佑安医院所建的MSM队列和HIV急性期感染者队列.取HIV急性期感染者随访第4,12,24和48周外周血,监测CD4+T细胞的变化.流式细胞术检测CD4+T细胞表面CCR7和CD45RA分子的表达.结果 与HⅣ阴性对照组相比,HIV急性期感染者CD4+T细胞的数量、效应记忆CD4+T细胞(effector memoryT cell,Tem)的比例和绝对数均显著减少,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).CD4+ Tem绝对数的变化与CD4+T细胞绝对数呈显著正相关(r=0.5768,P=0.0001),而与血浆病毒载量呈负相关(r=-0.2962,P=0.0296).结论 效应记忆性CD4+T细胞数量的下降也可作为HIV早期感染者疾病进展的早期预测指标. 相似文献
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2020年,新型冠状病毒肺炎疫情全球大流行,导致8000万人患病,170万人死亡。脊髓灰质炎疫情继续扩大,阻碍了全球消灭脊髓灰质炎的目标。非洲埃博拉疫情被扑灭。登革热疫情较上一年明显缓解。年底欧洲和亚洲暴发H5N8禽间禽流感疫情。本文对2020年重要传染病疫情事件进行回顾。 相似文献