妊娠期高血压疾病患者外周血凋亡相关因子浓度变化研究

目的探讨妊娠期高血压疾病患者外周血凋亡相关因子浓度的变化情况。方法选择我院妊娠期高血压疾病38例作为妊娠期高血压组,选择同期正常妊娠期妇女24例作为正常妊娠组;另根据病情严重程度将妊娠期高血压疾病患者分为妊娠期高血压组(14例)、轻度子痫前期组(14例)和重度子痫前期组(10例)3组。所有研究对象均行剖宫产术,术前检测并比较妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组及不同程度妊娠期高血压疾病3组间外周血血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、胎盘生长因子(placenta growth factor,PLGF)及GATA-3浓度。结果妊娠期高血压疾病组外周血中VEGF及PLGF浓度均低于正常妊娠组,GATA-3浓度高于正常妊娠组,两组比较差异均具有统计学意义(P0.05);不同程度妊娠期高血压疾病3组随病情严重程度增加外周血中VEGF及PLGF浓度逐渐降低,GATA-3浓度逐渐升高,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。相关性分析结果显示轻度子痫前期组及重度子痫前期组外周血GATA-3浓度与VEGF浓度均呈负相关(r=-0.681,P=0.044;r=-0.741,P=0.041)。结论外周血中凋亡相关因子浓度失衡是妊娠期高血压疾病发病的相关因素。     

5-脱氧杂氮胞苷调控p16基因表达对人宫颈癌HeLa细胞增殖及调亡的影响

目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-CdR)对人宫颈癌HeLa细胞增殖和调亡的作用及其可能机制。方法:应用不同浓度的5-Aza-CdR处理HeLa细胞,甲基化特异PCR(MSP)法检测处理前后p16基因甲基化状态,应用RT-PCR方法检测p16基因mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:人宫颈癌HeLa细胞p16基因启动子区呈高甲基化状态,经过5-Aza-CdR处理后,p16基因启动子区呈去甲基化状态,其mRNA重新表达,细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。结论:5-Aza-CdR能够逆转p16基因甲基化状态,调控p16基因表达,并有效抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和诱导细胞调亡。     

冷冻影响肝癌细胞HLA和B7分子表达的实验研究

目的：探讨冷冻治疗后机体免疫功能提高的机制。方法：应用流式细胞仪检测人肝癌细胞经0℃或－20℃冷冻后，HLA和B7分子表达率和平均荧光强度的变化。结果：0℃组与对照组比较，HLA－Ⅰ分子和B7－2分子的表达率和平均荧光强度均无明显变化；HLA－Ⅱ分子和B7－1分子的表达率增高，平均荧光强度增强。－20℃组与对照组比较，HLA－Ⅰ、HLA-Ⅱ、B7-1和B7－2分子的表达率均增高，平均荧光强度均增强。－20℃组和0℃组比较，HLA－Ⅱ和B7－1分子的表达率和平均荧光强度均无显著性差异；HLA－Ⅰ和B7－2分子表达率均增高，平均荧光强度均增强。结论：0℃和－20℃冷冻可增强人肝癌细胞HLA和B7分子的表达，这可能是冷冻治疗提高机体免疫功能的机制之一。     

DEHP体外影响大鼠睾丸间质细胞Bax和Bcl-2基因表达的实验研究

目的 通过对原代培养的大鼠睾丸间质细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)染毒,探讨DEHP体外对大鼠睾丸间质细胞Bax和Bcl-2基因表达及凋亡的影响.方法 体外分离和原代培养未成熟大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的DEHP(10、50、100nmol/L)染毒24h.荧光定量PCR法检测间质细胞Bax和Bcl-2基因mRNA表达,Weastern blot检测间质细胞Bax和Bcl-2蛋白表达,流式细胞术检测间质细胞凋亡率.结果 与对照组相比,DEHP各组睾丸间质细胞Bcl-2基因mRNA和蛋白表达下降(P＜0.05),Bax基因mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05),细胞凋亡率增加(P＜0.05),呈浓度依赖关系.结论 DEHP可通过抑制Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达诱导大鼠睾丸间质细胞凋亡,进而影响间质细胞功能.     

邻苯二甲酸二乙基己酯对体外培养大鼠睾丸支持细胞氧化应激的 影响

目的对体外培养的大鼠睾丸支持细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)染毒,探讨DEHP对体外培养大鼠睾丸支持细胞氧化应激和细胞凋亡的影响。方法体外分离和原代培养大鼠睾丸支持细胞,不同浓度的DE-HP(10、50、100 nmol·L-1)作用于支持细胞24 h,应用流式细胞术检测支持细胞凋亡率和细胞内活性氧(ROS),应用紫外分光光度计测定细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果与对照组相比,DEHP各剂量组大鼠睾丸支持细胞MDA含量和ROS增高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),且呈浓度依赖关系。结论 DEHP可通过激活细胞氧化应激而诱导大鼠睾丸支持细胞凋亡,进而影响支持细胞功能。     

RNAi沉默STAT3基因对人宫颈癌SiHa细胞定植和侵袭的影响

目的：探讨信号转导因子与转录激活因子3（STAT3）短发夹RNA（shRNA）真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞定植和侵袭能力的影响。方法：针对人STAT 3的基因设计并合成编码小干扰RNA（siRNA）的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建STAT 3基因shRNA真核表达质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blot）法分别检测STAT 3基因的mRNA及蛋白表达水平;软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测SiHa细胞的定植和侵袭能力。结果：构建的STAT 3基因shRNA真核表达载体成功地转染人宫颈癌SiHa细胞,细胞STAT3蛋白及mRNA表达均下降（P ＜0.05）;SiHa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少（P ＜0.05）。结论：STAT 3基因shRNA真核表达载体通过下调STAT 3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力。     

低氧对体外培养绒毛组织瘦素及其受体表达的实验研究

【目的】探讨低氧对体外培养的绒毛组织瘦素及其可溶性受体表达的影响。【方法】孕早期的绒毛组织分两组培养:常氧对照组和缺氧组。应用RT-PCR方法检测肥胖基因和瘦素受体基因mRNA表达水平,应用酶联免疫吸附ELISA法检测培养液中瘦素和可溶性瘦素受体水平。【结果】与常氧组相比,缺氧组绒毛组织的肥胖基因mRNA表达水平增加,瘦素受体基因mRNA表达水平下降;缺氧组绒毛组织产生的瘦素增加,可溶性瘦素受体减少。【结论】缺氧可以诱导绒毛组织肥胖基因表达,下调瘦素受体基因表达。缺氧可能是子痫前期胎盘组织瘦素高表达的原因。     

缺氧诱导因子1α在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的差异表达

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白及其mRNA在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的表达的差异。方法:应用Westernblot检测10例妊高征和10例年龄匹配的正常妊娠的胎盘组织中HIF-1α蛋白表达的水平;应用实时定量PCR,检测两种组织中HIF-1αmRNA表达的水平。结果:与正常妊娠胎盘组织相比较,妊高征胎盘组织中HIF-1α蛋白和mRNA的表达水平明显增加(P<0.05)。结论:HIF-1α在妊高征胎盘组织中表达增高,可能与妊高征的病因及病理生理有关。