日本血吸虫HGPRT编码基因的克隆与表达

目的 克隆和表达日本血吸虫大陆株次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)编码基因。方法依据GenBank日本血吸虫HGPRT开放阅读框(ORF)设计一对引物，上游和下游引物分别引入BamH I和Sal I酶切位点。以日本血吸虫大陆株（安徽株，简称Sjc-A）成虫总RNA为模板，反转录PCR (RT-PCR)扩增日本血吸虫大陆株HGPRT(SjcHGPRT)全长编码基因。经双酶切纯化的PCR产物与同样双酶切纯化的pET28a质粒DNA片段用T4 DNA连接酶连接，构建重组质粒pET28a-SjcHGPRT，转化感受态E．coli BL21，并大量扩增。重组质粒DNA经限制性内切酶双酶切、PCR、琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列测定进行鉴定。pET28a-SjcHGPRT/E．coli BL21I程菌用IPTG诱导表达，重组蛋白用SDS-PAGE和Western blot分析。结果 SjcHGPRT编码基因RT-PCR产物约700 bp，构建的pET28a-SjcHGPRT重组质粒DNA经限制性内切酶双酶切和PCR扩增产物于琼脂糖凝胶电泳均观察到相同大小的基因片段，根据核苷酸序列测序结果推导的氨基酸序列与报道的日本血吸虫大陆株（湖南株，简称Sjc-H）及曼氏血吸虫HGPRT分别有99%和83%的同源性。获得的重组蛋白(reSjcHGPRT)经SDS-PAGE和Western blot分析，分子量约30 kDa，并能被抗His-G-HRP抗体、日本血吸虫感染小鼠血清和日本血吸虫病人血清识别。结论 日本血吸虫大陆株(安徽株)HGPRT表达获得成功，并获得了纯化重组蛋白，为开展该分子功能和免疫原性研究奠定了基础。     

人文关怀在妇科体检护理中的临床效果

选取2013年10¹2月我院体检中心240例接受妇科体检的体检者,随机分为观察组和对照组各120例。对照组行常规体检,观察组体检过程中应用人文关怀,比较两组体检者服务满意度。结果观察组满意度为97.5%,对照组满意度为83.3%,观察组体检满意度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。妇科体检过程中应用人文关怀,有助于改善患者紧张、抑郁、焦虑的负面情绪,提高体检者满意度,值得在临床上应用和推广。     

一例红细胞生成性原卟啉病临床分析及FECH基因检测

收集1例红细胞生成性原卟啉病患者的临床资料及外周血,提取患者DNA,对FECH基因进行Sanger测序,与100名正常人进行对比。患者皮损多位于暴露部位,皮损粗糙、增厚,面部皮损呈蜡样光泽,手背部可见密集肤色粟粒大丘疹。患者尿液、粪便和血清Wood灯下呈浅粉色;外周血涂片检查电光源下见大量红细胞,荧光相见大量红细胞的红色荧光;组织病理示表皮角化过度,基底层色素增加,真皮内成纤维细胞增生,局部可见粉色团块状物质,弹力纤维变性;特殊染色：真皮内团块状物质PAS（+）;刚果红（±）。基因检测结果示：FECH基因c.181C>T（p.Q61X）杂合变异和IVS3-48C（T>C）。     

短时间接收大批手术伤员时野战手术室组织工作体会

我所在轮战期间,曾担负某行动的战伤救治任务,此任务时间性强,伤员集中,工作量大,加之野战条件下手术室设备简陋,器材数量有限,如何做好手术室的组织工作就成为保证抢救成功的关键问题。我们在短短13小时内,连续集中接收伤员42名,需要紧急手术者24名,均为重伤和中度伤伤员,共做手术24例次,其中胸部手术4例,剖腹手术3例(肝破裂修补缝合1例,脾破裂合并膈肌破裂行脾切除,膈肌缝合1例,小     

妇产科围术期短程应用抗生素的临床效果

目的 了解妇产科围术期短程应用抗生素的临床效果。方法 2003年（传统用药组）及2004年7至9月（短程用药组）各选取行予宫下段剖宫产患者120例，子宫次全切除患者35例，围术期分别使用传统给药方法与短程抗生素预防感染。结果 两组相比，患者的切口愈合率、愈合等级及其他感染率无显著性差异，而短程抗生素组抗生素用量、费用降低，护理工作量、护理强度大大减轻。结论 妇产科围术期短程应用抗生素的临床效果好，值得大力推广.     

抗菌药物在治疗和预防性应用的对比研究

目的 为降低抗菌药物应用提供依据，对抗菌药物在治疗和预防性应用进行了对比研究。方法 采用随机抽样的方法，对一所综合性教学医院1999年8月～2001年2月，住院患者抗菌药物应用现状进行了回顾性调查，按其用药目的分治疗组和预防组。结果 共调查了1597份病历，抗菌药物总的应用率为61．6％，预防性用药超过治疗性用药，两者之比为1：0．8；治疗组应用抗菌药物平均每例次为8．3d，预防组为6．0d。两组使用率最高的药物均为头抱噻肟；预防组手术疾患占81．1％，其中Ⅰ类切口占42．6％、预防用药以三代头抱为主，且术后用药时间超过7d者最多，占45．2％。结论 掌握预防用药的指征和方法是降低抗菌药物应用率的关键。