分泌型PD-L1真核表达载体的构建、表达及其体外效应的初步研究

目的 构建分泌型PD-L1真核表达载体，并对其生物学活性进行初步研究。方法以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1（programmed death-1，PD-1）配体PD-L1的胞外段基因片段，定向连接于pcDNA3．1上构建真核表达载体pcDNA-PDL1；用脂质体将重组子导入NTT细胞，转染后的NTT命名为NITp。以Western blot鉴定重组蛋白的表达。MTT比色法检测NITp细胞培养上清对同种混合淋巴细胞培养反应的影响；用ELISA试剂盒检测NITp细胞培养上清对反应性T细胞分泌的细胞因子的影响。结果 RT-PCR得到约730bp目的基因片段，测序结果显示该目的基因与Gen-Bank上的序列相符；Western blot分析提示NTTp分泌性表达目的蛋白；NTTp培养上清可抑制混合淋巴细胞增殖，其效应呈剂量依赖性；反应性T细胞分泌的细胞因子检测结果显示，培养上清中IL-4、IFN-γ、IL-2水平降低，与正常对照组差异有统计学意义。结论 成功构建PD-L1基因真核表达载体pcDNA-PDL1，PD-L1蛋白对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用，并可在一定程度上抑制特异性T细胞的活化。     

老鹳草提取工艺优选及其对α-淀粉酶抑制作用的研究

目的：优选老鹳草中柯里拉京的提取工艺条件,并通过对α-淀粉酶活力的抑制作用初步判断柯里拉京的降糖作用。方法：以柯里拉京提取率为指标,采用单因素考察提取方法、提取溶剂和提取次数对老鹳草柯里拉京提取率的影响;在单因素试验的基础上,采用正交设计法优化老鹳草水提取工艺条件。结果：老鹳草水提取的最佳工艺条件为加水回流提取2次,用量8,6倍,提取时间1.5,1.5 h,在此条件下,老鹳草柯里拉京的提取率1.2%,影响老鹳草柯里拉京提取率的因素从大到小依次为：加水倍数>提取时间>浸泡时间。结论：通过对α-淀粉酶活力的抑制作用测定,表明老鹳草中柯里拉京有较好的降糖作用。     

以疼痛为首发症状的药物过敏性休克二例

我院急诊科 2002至 2003年收治 2例以疼痛为首发症状的药物过敏性休克,报道如下。例 1　男, 40岁,龋齿拔牙术后,常规抗感染治疗,青霉素皮试(皮试液含青霉素 200U/ml)阴性后,予青霉素 800万U加入生理盐水 250ml静脉滴注, 15min后,滴入约 50ml,患者自述注射部位疼痛,但无皮痒,注射部位无红肿及渗液,无皮疹,未处理,继续点滴。片刻后,患者述疼痛加重,并累及腰背部及双下肢,疼痛剧烈难忍,随后出现神志恍惚,皮肤湿冷并出现花斑,脉搏细弱,血压下降直至测不到,双肺呼吸音粗,无干湿啰音,诊断为青霉素过敏性休克。立即停用青霉素,平卧,吸氧,肌内…     

双屏散对反复呼吸道感染患儿汗证疗效研究

目的:以“双屏散”为平台论证“肝枢纽病机”在小儿反复呼吸道感染(RRTI)防治中指导作用。方法:随机将观察病例分成治疗组和对照组各50例,分别给予双屏散口服液及玉屏风散口服液,于疗程结束时及疗程结束后4个月时,观察并记录出汗情况(分度法与计分法相结合)。结果:两组患儿出汗均显著减少,但治疗组疗效较对照组更强、更持久(P<0.01)。结论:双屏散对RRTI异常出汗患儿止汗作用较玉屏风散更强、更持久,由此推论“双屏散”治疗RRTI有良好疗效与其有较强的止汗作用密切相关,同时亦提示在RRTI防治过程中重视“肝枢纽病机”能显著提高治疗效果。     

云南白药胶囊治疗血尿的临床疗效观察

我科2004年1月～2007年6月应用云南白药胶囊治疗肾小球疾病、结石(肾、输尿管、膀胱、尿道结石)、前列腺增生、尿路感染性疾病、过敏性紫癜、肾及尿路损伤、运动性血尿、血尿128例,取得了较好的疗效。现报道如下:     

自拟益肾汤辅助治疗对早期糖尿病肾病患者血清CTGF水平的影响

目的:观察自拟益肾汤辅助治疗早期糖尿病肾病(EDN)对患者血清结缔组织生长因子(CTGF)水平的影响及作用机制。方法:选择我院EDN患者134例,遵循密封信封法将其分为中药组(n=67,在西药基础上加以自拟益肾汤治疗)和西药组(n=67,仅给予西药治疗),观察其疗效,比较其症状积分、肾纤维化相关指标、血脂指标及肾段动脉血流指标。结果:中药组总有效率显著高于西药组(P0.05);治疗后,两组神倦气乏、五心烦热、食少纳呆、口干咽燥及肢体浮肿等症状积分均显著下降(P0.05),且中药组各症状积分均低于西药组(P0.05);治疗后,两组CTGF、MMP-9、HA、LN、PCⅢ、CIV均显著下降(P0.05),且中药组上述指标均低于西药组(P0.05);治疗后,两组患者TC、TG及LDL-C均显著下降(P0.05),HDL-C均显著升高(P0.05),且中药组上述指标变动幅度均大于西药组(P0.05);治疗后,两组患者PSV、EDV均显著升高(P0.05),RI、PI均显著下降(P0.05),且中药组上述指标变动幅度均大于西药组(P0.05)。结论:自拟益肾汤可有效显著改善EDN患者的症状,抑制肾脏组织纤维化,降低血脂,改善血流。     

MSTI基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响

目的：探讨MST1（mammalian sterile 20-like kinase1）基因对人乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响。方法：构建含有标签蛋白FLAG的MSTI质粒pCMV-FLAG-MST1；将构建好的pCMV-FLAG-MST1质粒在脂质体lipofectamine2000的介导下转染MCF-7细胞，通过Western印迹法分析MST1在MCF-7中的表达情况；分别在转染后12、24、36和48h通过MTF法观察MST1对细胞增殖的影响；转染后36h加入5-溴-2’脱氧尿嘧啶（bromodeoxy uridine，BrdU），通过其掺入比率显示MST1对细胞增殖的影响；转染后36h加入顺铂，作用14h后通过AnnexinV检测其对细胞凋亡的影响。结果：成功构建pCMV—FLAG-MST1质粒；MTT及BrdU检测显示，转染pCMV—FLAG-MST1质粒后MCF-7细胞增殖明显受到抑制；AnnexinV检测结果提示，高表达MST1后，细胞的凋亡率相对增高。结论：在乳腺癌细胞MCF-7中高表达MST1，不仅可以抑制细胞增殖，还可以促进细胞凋亡。     

浅谈胫腓骨开放性骨折的早期处理126例

随着工农业，交通及高层建筑等事业的发展，交通事故的日益增多，临床上开放性损伤极为常见，我院自1998年～2007年共收治胫腓骨开放性骨折126例，经治获得满意疗效，现分析如下：1临床资料本组资料126例，均为外伤引起的胫腓骨开放性骨折，其中男94例，女32例，年龄17～68岁。致伤原因：车祸92例，坠落伤10例，压砸伤10例，挤压碾挫伤6例，爆炸伤1例，生活伤（普通跌伤）6例，枪弹火器伤1例。根据损伤机制，软组织损伤程度，     

高膳食纤维饮食对鼻咽癌患者血清中的抗氧化酶活性的影响

目的观察高膳食纤维饮食对鼻咽癌患者血清中抗氧化酶系统的影响。方法对60例鼻咽癌患者(鼻咽癌组)和30名健康体检者(对照组)进行分组,分别给予高脂和高膳食纤维饮食,3个月后对血清中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平进行检测。结果健康组间血清中的SOD活性、GSH-Px活力及ROS差异无统计学意义,鼻咽癌组间各项指标间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01),不同病理类型间,未分化癌患者组血清中ROS和GSH-Px活性与另两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论鼻咽癌患者体内自由基代谢紊乱,抗氧化损伤能力显著下降,在治疗同时配合高膳食纤维饮食可以提高患者机体的抗氧化能力,对提高疗效具有重要意义。     

三维正脊仪治疗腰椎间盘突出症的护理配合

运用三维正脊仪治疗腰椎间盘突出症是近年来非手术疗法中较好的一种正脊治疗 ,它通过牵拉椎间盘使髓核回纳达到脊柱的生理曲度。护理不到位 ,极易复发 ,我科 2 0 0 0 - 0 4～ 2 0 0 0 - 0 9对 32例患者行正脊治疗 ,并融入周密的护理 ,效果满意。现介绍如下 :1　临床资料1 .1　一般资料 32例中 ,男 2 0例 ,女 1 2例 ;年龄 30～ 5 0岁。椎间盘突出平面腰椎 4～ 5者 2 5例 ,腰椎 5骶 1者 3例 ,腰椎 3～ 4者 4例 ,均为单一平面 ,其中侧凸 1 1例 ,后凸 2 1例 ,均以腰腿痛、下肢放射痛为主要症状 ,直腿抬高试验均为阳性 ,其中间歇性跛行 1 0例 ,单…