异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc~2 155细胞蛋白双向电泳图谱的差异分析

目的利用蛋白质组学方法,识别异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞(SM细胞)后差异表达的蛋白质,为进一步深入探讨异烟肼抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。方法观察不同浓度的异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌生长曲线,确定药物处理SM细胞的最佳时间和浓度,并提取在最佳处理时间和浓度条件下的SM细胞总蛋白,采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞的总蛋白质,用PDuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。结果在空白对照组检出159个蛋白斑点,在异烟肼处理组检出221个蛋白斑点,在相对分子质量30 000~90 000和pH值4.5~6.0范围内,异烟肼处理组蛋白斑点数均多于空白对照组。结论异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的蛋白质组具有差异,提示异烟肼处理后促进了某些特定基因的表达。     

蓬勃发展的西安老年大学

西安老年大学成立于1995年3月,十几年来经历了"创办起步、探索提高、蓬勃发展"三个阶段。现已初具规模,有分校23所,13个区县实现了"一片红",建立乡镇、街道和社区、村组老年学校80多所,四级办学网络在逐渐形成。目前共开设30多门专业课,360个教学班,1.6万多名学员(其中总校现有77个班,1926人)。     

双气囊小肠镜在小肠出血患者治疗中的应用价值及安全性研究

目的探讨双气囊小肠镜(DBE)在小肠出血(SBB)患者治疗中的应用价值及安全性,分析SBB患者的病因特点。方法收集2015年6月-2016年7月南京医科大学第二附属医院诊断为SBB的52例接受DBE检查的患者资料,回顾性分析诊治结果及并发症发生和随访情况。结果该研究共纳入患者52例(男28例,女24例),年龄16~82(51.0±17.0)岁,发病时间1~14(8.3±4.0)d。显性消化道出血37例,隐性消化道出血15例。经口进镜25例,经肛进镜21例,经结肠造瘘口进镜2例,口+肛4例。DBE的诊断率为76.9%(40/52),并发症发生率为5.8%(3/52),小肠镜检查阴性患者小肠再出血率16.7%(2/12)。5例小肠多发性息肉予以内镜黏膜切除术(EMR),2例小肠毛细血管扩张症给予氩离子凝固术(APC)。1例空肠癌伴胶囊滞留予以取出胶囊,14例(26.9%)接受手术治疗。SBB病因为肿瘤(n=9,17.3%)、溃疡(n=9,17.3%)、克罗恩病(n=7,13.5%)、息肉(n=5,9.6%),憩室/血管畸形(n=4,7.7%)等。SBB患者中位随访时间(8.3±2.0)个月,范围4~10个月,死亡2例,死因为小肠癌再出血。结论 DBE诊断SBB及行内镜下治疗安全有效,即使在困难病例Roux-en-Y术后。SBB病因以肿瘤、溃疡、克罗恩病较为常见,小肠镜检查阴性患者仍有小肠再出血可能,血管病变可能性大。     

大鼠静脉多次注射人脐带间充质干细胞安全性的研究

目的:观察多次静脉输注人脐带间充质干细胞(hu MSCs)对大鼠的毒性反应。方法:1贴块法培养hu MSCs;流式细胞仪鉴定第4代hu MSCs特异性表面抗原;标准试剂盒鉴定第4代hu MSCs向脂肪细胞和成骨细胞分化的潜能;2182~203g的SD大鼠分为对照组、0.9%氯化钠组和干细胞组,各8只,雌雄各50%。3干细胞组分别于第1、4和15天时经尾静脉注射(2.5×106)个/kg体质量的第4代hu MSCs,0.9%氯化钠组于同等时间注射与细胞悬液等量0.9%氯化钠液。4第3次注射转染RFP基因(中文)的hu MSCs后11天,腹主动脉取血,检测和比较血常规和生化指标;取脑、心、肺、肝及肾进行病理学检查;荧光显微镜观察器官组织中表达RFP的hu MSCs细胞分布情况,流式细胞仪检测骨髓中表达RFP的hu MSCs;ELISA检测血清γ-IFN、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10及IL-12含量。结果:1第4代hu MSCs特异性表面抗原CD73、CD90和CD105表达强阳性,纯度分别为98.7%、99.6%和98.6%,而CD34、CD45、CD11b、CD19、CD79a和HLA-DR的表达水平为阴性,CD14表达水平为23.1%;hu MSCs分化成脂细胞和成骨细胞的比例均为99%;2注射3次干细胞后实验动物全部存活,干细胞组部分血常规和生化指标与0.9%氯化钠组相比有差异,但与对照组相比,只有PLT明显降低、CHOL明显升高;3干细胞组脑、心、肺、肝、肾的形态和组织病理学无明显改变;(4)干细胞组的器官组织和骨髓中未检测到表达RFP的hu MSCs;(5)干细胞组血清IL-8水平明显升高。结论:多次尾静脉注射hu MSCs对大鼠没有明显的毒性反应。     

儿童肺炎支原体感染合并肺动脉血栓形成一例并文献复习

目的分析儿童肺炎支原体(MP)感染合并循环血栓形成病例血栓栓塞及抗磷脂抗体(a PL)谱特点,以期提高对MP感染合并血栓栓塞事件的认识。方法报道1例肺炎支原体肺炎(MPP)合并急性肺动脉血栓形成儿童病例,并复习相关文献,纳入符合MP感染导致血栓栓塞事件的儿童,分析其临床及a PL水平变化,探讨MP感染合并血栓栓塞事件与a PL之间的关系。结果我们报道1例MPP合并急性肺动脉血栓形成和循环a PL阳性的患儿,同时检索相关文献,纳入病例14例,男8例(61.5%),年龄(7.78±2.74)岁,所有病例入院时均有肺部炎症,动脉系统栓塞7例(50%):脑动脉3例、脾动脉2例、椎动脉1例、左颈内动脉1例、双侧腘动脉1例;静脉系统栓塞7例(50%):肺动脉4例、右心房1例、左腘静脉1例、右髂外静脉1例。14例患儿中9例(64.2%)检测抗a PL:9例检测a CL、6例检测LA、4例检测抗β2GI;9例检测a CL均阳性,6例检测LA中阳性5例,4例检测抗β2GI病例中阳性3例。所有患儿均接受静脉用阿奇霉素以及治疗量抗凝治疗(持续静脉应用普通肝素钠并口服华法林)。随访3个月后,患者均痊愈,所有抗磷脂抗体均转阴。结论 MP感染合并循环血栓栓塞事件时可伴随a PL阳性,但为短暂阳性,与儿童抗磷脂综合征不同。     

兔外周血与骨髓源性内皮祖细胞培养鉴定及生物学特性的研究

目的:探索并建立兔内皮祖细胞(EPCs)的体外培养、鉴定方法。方法:采用密度梯度分离法分别从兔外周血和骨髓中分离出单个核细胞,接种于预包被明胶的培养瓶,并应用培养基(EBM-2)诱导培养,诱导分化为EPCs;在倒置显微镜下观察两种源性细胞生长过程;台盼蓝法测定细胞传代成活率;通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测比较两种源性获得的EPCs增殖情况;采用免疫荧光染色观察EPCs相关抗原CD34、CD31、CD133及vWF因子的表达。结果:两种源性EPCs均于培养3～4d完全贴壁,呈克隆样生长,7～9d形成类似成熟血管内皮细胞形态,细胞数量逐渐增多,细胞成活率均为95%。两种源性获得的第2代细胞生长曲线近似"s"形、MTT法显示3～5d细胞增殖较明显,外周血源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为96.48%和3.52%,骨髓源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为97.11%和1.84%。第2代EPCs进行免疫荧光鉴定结果显示:两种源性内皮祖细胞均阳性表达CD34、CD133、vWF因子,CD31弱阳性表达。结论:两种源性的EPCs均可高效获得且在体外稳定培养。与传统的骨髓源性EPCs相比较,从外周血源获得的EPCs是一种可靠、简便的培养方法,为组织工程学提供理想的细胞来源。     

原子力显微镜定量检测人骨髓间充质干细胞等效黏附力的实验研究

目的 建立原子力显微镜检测体外培养人骨髓间充质干细胞（hMSCs）黏附力的方法. 方法 对原子力显微镜施加不同垂直方向力所引起的体外培养hMSCs细胞宽度的变化进行测量,并根据力学原理推算细胞对抗垂直力的等效黏附力.设引起细胞宽度降低10%的垂直力为临界等效黏附力,引起细胞完全脱离培养基质面的垂直力为最大等效黏附力. 结果 培养24 h后,末包备培养皿中hMSCs细胞的临界和最大等效黏附力分别为0.8319和1.1092 nN,纤维黏连蛋白包备基质培养皿中hMSCs的临界和最大等效黏附力分别为0.5546和0.8319 nN.培养72 h后,2组细胞的等效黏附力没有改变. 结论 建立了原子力显微镜垂直方向力模式直接测量体外培养hMSCs等效黏附力的方法.     

结核分枝杆菌wbbL蛋白质可溶性表达及鉴定

目的 优化结核分枝杆菌wbbL基因在大肠埃希菌中的表达,获得大量可溶性产物并加以鉴定.方法 不同条件下诱导pET16b-wbbL质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达;建立外源重组蛋白质与分子伴侣在大肠埃希菌中的共表达体系,优化其表达条件;超声破碎诱导表达的大肠埃希菌,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物;免疫蛋白印迹(Western blotting)法对重组蛋白质进行鉴定.结果 共表达体系优化表达的蛋白质主要以可溶性形式存在,经0.5 g/L L-阿拉伯糖30℃诱导5 h、0.5 mmol/L异丙酸-D-硫代半乳糖苷30℃诱导2 h时,可溶性目的 蛋白的产量最多,占细胞蛋白总量的55.6%,且所表达的蛋白质为wbbL基因产物.结论 在大肠埃希菌中成功表达出大量可溶性结核分枝杆菌wbbL蛋白质,为研究其酶促反应动力学特征以及建立完善的筛选抗结核药物的酶反应体系提供了基础.     

外源性雌激素对青春期前雌性大鼠性发育的影响

为探讨外源性雌激素对青春期前雌性大鼠性发育的影响,将40只健康6周龄清洁级雌性SD大鼠随机分为两组,分别为雌二醇(40μg/kg)染毒组和对照(生理盐水)组,每组20只.采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为10ml/kg,每天1次,连续染毒2周.染毒24 h后,测定大鼠体重、身长、肥胖评定指数(Lee'指数)、乳头高度(第...     

双能CT对膝关节韧带损伤的诊断价值

目的 探讨影响老年颅内动脉瘤患者手术预后的因素.方法 回顾性分析30例手术治疗的老年颅内动脉瘤患者的临床资料.对可能的影响因素和手术结果进行单因素和多因素分析.结果 将患者按年龄(以70岁为界)、Hunt-Hess分级、动脉瘤部位(分为前循环和后循环)、动脉瘤大小(以直径1.5 cm为界)、是否合并高血压、手术时机(以72 h为界)分组后经单因素和多因素分析发现,患者Hunt-Hess分级、动脉瘤部位、手术时机与预后相关(P值分别为0.007、0.019、0.007),年龄、高血压、动脉瘤大小与预后无关(P值分别为0.502、0.697、0.500).结论 老年颅内动脉瘤患者的手术预后受多种因素影响,年龄不是颅内动脉瘤手术的禁忌证,宜早期手术.