沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活p38MAPK和NALP3信号通路调控THP-1细胞IL-1β分泌的研究

目的研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制,为阐明Ct致病机制提供实验依据。方法将原核表达重组体pGEX-6p/pORF5转化大肠埃希菌,表达并纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切后制备不含GST标签的pORF5蛋白;用不同浓度的pORF5蛋白体外刺激THP-1细胞,ELISA测定不同时间IL-1β水平;分别用NALP3siRNA、ASC siRNA、Caspase-1抑制剂和p38抑制剂预处理THP-1细胞,再用pORF5蛋白刺激THP-1细胞24h,ELISA测定IL-1β含量,Real-time PCR测定IL-1β和NALP3炎性体mRNA的表达,Western blot分析Caspase-1的表达及p38磷酸化水平。结果 pORF5蛋白以剂量和时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β,24μg/ml pORF5蛋白刺激24h时IL-1β的表达水平达到峰值(495.1±55.5pg/ml);pORF5蛋白能促进THP-1细胞中NALP3炎性体mRNA的表达;NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂预处理THP-1细胞后,IL-1β分泌量分别降低37.7%、71.3%和40.1%;p38抑制剂能降低NALP3炎性体mRNA及IL-1β分泌量(P0.01),但抑制NALP3炎性体后p38磷酸化水平未受影响(P0.05)。结论 pORF5质粒蛋白通过激活p38MAPK和NALP3信号通路共同调控IL-1β的产生和分泌。     

仿制药盐酸胍法辛缓释片的制备及体外评价

目的 制备仿制药物盐酸胍法辛缓释片并探究仿制缓释制剂处方开发思路。方法 根据CFDA颁布的仿制药研究和评价相关指导原则为导向,结合原研药品处方的分析,对仿制药的体外药物释放、稳定性和工艺进行单因素研究。结果 用筛选得到的最佳处方完成盐酸胍法辛缓释片商业化批量的生产,可实现仿制药与原研药品在多种介质下释药曲线相似,同时满足小规格品种的BE豁免需求。结论 自研药物盐酸胍法辛缓释片处方设计合理,制剂制备工艺可行。     

桡动脉置管在危重患儿监护中的应用

总结了20例危重新生儿应用桡动脉置管的体会。桡动脉置管为新生儿的有创血压监测及采集血标本创造了重要的条件,为重症监护及抢救提供了临床指导。桡动脉置管前做好Allens′试验,置管后保持其固定通畅,预防感染及出血,加强肢体血运的观察及患儿疾病本身并发症的观察。新生儿有创监护的护理中要多观察尽量少接触,减少人为的感染几率,减少并发症发生是置管成功的关键。     

单腔深静脉导管用于极低体质量儿外周静脉置管成功1例报道

目前,因美国B-D公司生产的1.9Fr外周中心静脉导管在国内缺货,且无其他替代品,在很大程度上给低体质量儿的静脉营养造成一定影响。我科于2005年12月采用22G单腔深静脉导管成功为1例极低体质量儿进行了外周静脉置管术,成功留置至出院,未发生并发症。现将操作方法及护理体会报道如下。1病例介绍患儿,男,1 h,胎龄31 5周,剖腹产娩出,体质量1.13 kg,为双胎之大,双胎之小生后即死亡。孕母患慢性高血压并子痫前期(重度),胎盘早剥。生后1 min Apgar评分3分,经吸痰、气管插管、气囊加压给氧、静注肾上腺素1 mg等抢救,5min评分5分,30 min评分6分,反应…     

沙眼衣原体pORF5 蛋白通过激活PI3K / Akt 信号通路抑制细胞凋亡

目的:探讨沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5 蛋白对细胞凋亡的影响,并进一步分析其分子机制,为阐明Ct 致病机制提供实验依据。方法:pGEX-6p/ pORF5 重组质粒转化XL1-blue 大肠杆菌,IPTG 诱导表达GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B 纯化及蛋白酶切除GST 标签后得到pORF5 蛋白。用不同浓度的pORF5 蛋白刺激HeLa 细胞,Western blot 检测不同时间Bax 和Bcl-2 的表达水平以及PI3K/ Akt 磷酸化水平,Hoechst 33342 及流式细胞技术分析细胞凋亡情况;HeLa 细胞经PI3K/ Akt 特异性抑制剂LY294002 预处理1 h 后,再用pORF5 蛋白刺激24 h,测定细胞凋亡率,并进一步分析凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2 的表达水平及PI3K/ Akt 磷酸化水平。结果:凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2 的表达变化与pORF5 蛋白浓度呈现一定的浓度和时间依赖性,当pORF5 蛋白浓度达10 μg/ ml 时,Bax 表达下调,Bcl-2 的表达上调,当升高至15 μg/ ml 时,Bax 和Bcl-2 的表达量变化最明显;15 μg/ ml 的pORF5 蛋白刺激HeLa 细胞24 h,Bax 和Bcl-2 表达变化最明显;流式细胞检测结果显示:pORF5 蛋白刺激组较TNF鄄琢处理组和未处理组细胞凋亡率分别降低了27.3% (P<0.01)和8.4% (P<0.05);Akt 在pORF5 蛋白刺激15 min 后发生磷酸化,30 min 后磷酸化水平达到峰值,用PI3K 抑制剂LY294002 预处理Hela 细胞后,发现Akt 的磷酸化显著减少,Bax 蛋白表达明显上调,Bcl-2 表达明显下调;LY294002 处理组细胞凋亡率相比于对照组增加了13.0% (P<0.01)。结论:pORF5 蛋白通过激活PI3K/ Akt 信号通路调节Bcl-2 和Bax 蛋白的表达抑制细胞凋亡。     

外周动静脉全自动换血治疗新生儿高胆红素血症的护理

总结45例应用外周动静脉全自动换血方法治疗新生儿高胆红素血症的护理经验.换血治疗前详细评估患儿的病情,准备好换血用物,以熟练的穿刺技术成功留置动脉留置针是全自动换血治疗成功的关键;换血过程中注重换血通路的观察,熟练掌握各种仪器的使用方法,以便能及时排除换血过程中出现的报警故障,密切观察患儿病情变化,并于换血前后留取血标本;换血后予患儿继续蓝光治疗,密切关注黄疸程度,并保证患儿喂养的量与次数.本组患儿换血效果显著,全部治愈出院.     

线粒体融合蛋白2改善高脂诱导的骨骼肌细胞胰岛素抵抗机制的研究

目的 探讨线粒体融合蛋白2 （Mfn2）是否通过减轻氧化应激改善大鼠骨骼肌细胞IR.方法 建立高脂诱导骨骼肌细胞IR模型（PA组）,以Mfn2基因重组腺病毒转染细胞（PMfn2组）,观察细胞内葡萄糖摄取率、超氧化物歧化酶总活力（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、活性氧簇（ROS）及MDA的改变. 结果 （1）与正常对照（NC）组相比,高脂（PA）组葡萄糖摄取率降低（P＜0.01）,T-SOD及CAT活性降低,ROS、MDA含量增加（P＜0.05）;（2）与PA组相比,Mfn2基因重组腺病毒转染（PMfn2）组T-SOD及CAT活力均增加（P＜0.05）;ROS水平、MDA含量降低（P＜0.05）;GSH-Px活力无明显改变. 结论 上调高脂干预后骨骼肌细胞的Mfn2水平可减轻细胞氧化应激,改善IR.     

石家庄市职业性公交车司机健康状况调查及性别、年龄差异分析

目的 评估石家庄市公交司机的健康状况及不同性别和年龄其健康状况是否存在差异.方法 选取2020年于体检中心体检的石家庄市公交公司职业性公交司机为研究对象,并对体检的异常指标或检出疾病进行统计分析,采用χ2检验分析男性和女性不同年龄段公交司机健康状况是否存在差异.结果 公交司机患病率或指标异常检出率前十位分别是超重和肥胖...     

尿酸对老年膝骨关节炎病人软骨GLUT9、URAT1表达的影响

目的 探讨老年膝骨关节炎病人血清UA水平与软骨组织中UA转运蛋白的相关性。方法 收集2018～2019年就诊于河北省人民医院骨科的老年膝骨关节炎(KOA)病人30例。以所有入选者UA中位数水平(254.6 μmol/L)将病人分为血清UA<254.6 μmol/L组(A组)和UA≥254.6 μmol/L组(B组),检测并比较2组软骨组织中葡萄糖易化转运蛋白9(GLUT9)和尿酸盐转运蛋白1(URAT1)的mRNA和蛋白的表达水平。结果 与B组相比，A组病人的体质量、BMI较小，VAS评分较低，差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示，VAS评分与UA水平呈正相关(r=0.396,P<0.05)。B组病人关节软骨中GLUT9、URAT1的mRNA和蛋白表达水平均较A组明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UA水平的升高可能通过增加软骨中GLUT9及URAT1蛋白的表达，使软骨细胞内UA水平升高，诱导软骨细胞氧化损伤，从而参与KOA的发病。