利用全基因组芯片初步筛选亚类垂体腺瘤特异性相关基因

目的 探讨人类垂体腺瘤发生、发展中相关基因的表达与功能.方法 应用人全基因组寡核苷酸芯片HG-U133A2.0检测8例垂体腺瘤组织(生长激素腺瘤、泌乳素腺瘤、促性腺激素腺瘤以及裸细胞激素腺瘤各2例)和2例混合的正常垂体组织的基因表达谱.差异表达基因进行筛选和生物信息学分析.芯片结果予以qRT-PCR验证.结果与正常对照组比较,与垂体腺瘤发生关联的基因功能上主要涉及分子结合、凋亡或肿瘤相关、代谢、信号传导、细胞周期、物质运输等多个牛物过程.数个差异基因的表达特异性与亚类腺瘤的发展相关.结论 垂体腺瘤的发生、发展是一多基因、多分子、多通路的网络调控过程.但对于各亚类腺瘤,其分子机制不尽相同.     

利用全基因组芯片初步筛选亚类垂体腺瘤特异性相关基因

目的 探讨人类垂体腺瘤发生、发展中相关基因的表达与功能.方法 应用人全基因组寡核苷酸芯片HG-U133A2.0检测8例垂体腺瘤组织(生长激素腺瘤、泌乳素腺瘤、促性腺激素腺瘤以及裸细胞激素腺瘤各2例)和2例混合的正常垂体组织的基因表达谱.差异表达基因进行筛选和生物信息学分析.芯片结果予以qRT-PCR验证.结果与正常对照组比较,与垂体腺瘤发生关联的基因功能上主要涉及分子结合、凋亡或肿瘤相关、代谢、信号传导、细胞周期、物质运输等多个牛物过程.数个差异基因的表达特异性与亚类腺瘤的发展相关.结论 垂体腺瘤的发生、发展是一多基因、多分子、多通路的网络调控过程.但对于各亚类腺瘤,其分子机制不尽相同.     

利用全基因组寡核苷酸芯片初步筛选无功能垂体腺瘤相关基因

目的探讨人无功能垂体腺瘤发生、发展中相关基因的表达与功能。方法应用人全基因组寡核苷酸芯片HG-U133Plus2.0分别检测4例无功能垂体腺瘤组织(2例促性腺激素腺瘤、2例裸细胞激素腺瘤)和正常垂体组织的基因表达谱,并对差异表达基因进行筛选和生物信息学分析。同时随机选择EDG3基因予以实时荧光定量PCR验证。结果与正常垂体组织相比,促性腺激素腺瘤中上调基因223条,下调基因678条;而裸细胞腺瘤中上调基因156条,下调基因665条;两者共同表达基因中上调基因50条,下调基因136条。共同差异表达基因的功能主要涉及分子结合、凋亡或肿瘤相关、代谢、信号传导、细胞周期、物质运输等多个生物过程。结论基因芯片技术有助于在分子水平上了解垂体腺瘤发病机制。     

泌乳素腺瘤基因表达谱的建立与分析

目的建立和分析泌乳素腺瘤的基因表达谱。方法应用人全基因组寡核苷酸芯片HG-U133A2.0检测2例泌乳素腺瘤组织和2例混合的正常垂体组织的基因表达谱,对差异表达基因进行筛选和生物信息学分析。结果成功建立正常垂体与泌乳素腺瘤的基因表达谱,筛选出与泌乳素腺瘤相关的上调基因313条,下调基因856条。这些差异基因功能聚类显示主要涉及分子结合、凋亡或肿瘤相关、代谢、信号传导、细胞周期等多个分子通路。结论基因表达谱的建立有助于分析、研究泌乳素腺瘤的分子机制。     

垂体泌乳素腺瘤小分子RNA的差异表达

目的检测小分子RNA（miRNA）在垂体泌乳素腺瘤和正常垂体组织中的差异表达，探讨miRNA在垂体腺瘤发生、发展过程中的作用。方法用miRCURY^TM锁核酸芯片检测6例垂体泌乳素腺瘤和6例正常垂体组织中miRNA的差异表达，一些差异表达的miRNA用实时定量PCR验证。结果垂体泌乳素腺瘤和正常垂体组织有35个miRNA差异表达，其中上调18个。下调17个。垂体泌乳素腺瘤和正常垂体的miRNA分类群聚图差异明显。结论垂体泌乳素腺瘤和正常垂体组织中存在荠异表达的miRNA．其可能与垂体泌乳素腺瘤的形成、增殖和侵袭性有关．     

侵袭性垂体腺瘤与非侵袭性垂体腺瘤的基因差异表达谱

目的 利用基因芯片研究侵袭性垂体腺瘤与非侵袭性垂体腺瘤的基因差异表达谱.方法 应用Illumina人全基因组基因表达芯片检测6例侵袭性垂体腺瘤以及6例非侵袭性垂体腺瘤组织的基因表达谱,并选择其中差异表达的两个基因进行逆转录一聚合酶链反应RT-PCR验证.结果 基因芯片筛选出差异表达基因153条,包括63条上调表达基因和90条下调表达基因,其中部分差异表达基因是细胞粘附、癌基因、信号传导等的相关基因.对上调基因CDH12(N-cadherin 2)和下调基因KLF4 (Kruppel-like factor 4)行RT-PCR验证结果与芯片结果相符.结论 侵袭性垂体腺瘤与非侵袭性垂体腺瘤的基因表达谱存在差异,其中差异表达基因SERPINE1 (serpin peptidase inhibitor,clade E,member 1)与KLF4可能通过作用于细胞生理过程在垂体腺瘤的侵袭性中发挥着一定作用.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在垂体腺瘤中的表达

目的 通过检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在人垂体腺瘤组织中的表达,探讨其在垂体腺瘤中的相关机制.方法 通过免疫组化法确定经手术切除的83例垂体腺瘤组织细胞来源;采用RT-PCR、适时定量PCR检测研究83例垂体腺瘤组织及6例正常垂体组织PPARγ的mRNA表达量,采用Western blot法检测组织PPARγ蛋白质表达水平,分析不同类型垂体腺瘤组织之间核酸及蛋白水平表达量的差异.结果 GH腺瘤17例、PRL腺瘤15例、ACTH腺瘤18例、多激素腺瘤(MCPAs)17例、无功能腺瘤(NFAs)16例及正常对照组6例;mRNA水平检测显示所有垂体腺瘤组织的表达量均高于正常对照组,其中GH腺瘤的表达量最高,与其他组比较P＜0.05;蛋白水平检测显示GH腺瘤、PRL腺瘤、ACTH腺瘤及MCPAs的表达量均高于正常对照组(P＜0.05),GH腺瘤的表达量最高,NFAs的表达量与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PPARγ转录及蛋白表达水平在人GH、PRL、ACTH及MCPAs垂体腺瘤组织中高表达,该基因与垂体腺瘤有一定的相关性,而无功能垂体腺瘤在核酸水平的表达量增高,蛋白水平的表达量不高,可能与激素的分泌水平有关;在GH腺瘤中的表达量最高,且与其他组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),说明该类肿瘤与PPARγ的关系最为密切,可能与生长激素能刺激PPARγ的表达有关.     

垂体腺瘤凋亡蛋白酶活化因子-1基因启动子区甲基化与其mRNA表达

目的研究凋亡蛋白酶活化因子-1（apoptotic protease activating factor-1,APAF-1）基因启动子区甲基化状态及其mRNA表达与临床特征的关系。方法用甲基化特异性聚合酶链反应（MS—PCR）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测32例垂体腺瘤组织和6例正常垂体组织APAnJ启动子区甲基化状态与其mRNA表达水平,分析APAF-1基因甲基化和mRNA表达与临床特征的关系。结果正常垂体组织APAF-1基因mRNA表达未见明显下降或升高,启动子区未发生甲基化。垂体腺瘤组织APAF-1基因mRNA表达下调率为56.3％（18例）,其表达显著性低于正常垂体组织（P=0．021,P〈0．05）。APAF-1基因启动子区甲基化率为43．8％（14例）。APAF—1 mRNA表达下调的垂体腺瘤组织中启动子甲基化率显著高于无表达下调者（P=O．009）。侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤之间APAF-1 基因mRNA表达及其甲基化率均无显著差异。结论垂体腺瘤组织APAF-1基因mRNA表达下调,APAF-1启动子区甲基化和其mRNA表达下调有关。在垂体腺瘤中,APAF-1基因启动子区甲基化可能是一个重要的分子改变,其在垂体腺瘤发生、发展中有重要意义。     

垂体腺瘤中雌激素受体基因的表达

目的　研究人垂体腺瘤中雌激素受体基因 (estrogenreceptorgene ,ER)mRNA与蛋白水平的表达及其与垂体腺瘤生物学特性的关系。方法　用免疫组化法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 ) ,检测 6 0例各种类型垂体腺瘤标本中ER蛋白的表达 ,比较不同类型垂体腺瘤ER蛋白表达的差异及ER蛋白表达与mRNA表达的差异。结果　泌乳素腺瘤、促性腺激素细胞瘤中均有ER蛋白表达 ,其表达与mRNA表达一致 ;无功能腺瘤中 2例有ER蛋白表达 ,其蛋白表达与mRNA表达不一致 ;其它类型垂体腺瘤未发现ER基因表达。结论　ER基因表达的检测可有助于评价PRL腺瘤的增殖活性及筛选抗雌激素治疗对象。ER基因的表达异常可能与PRL腺瘤及促性腺激素细胞瘤的发生、发展有关     

无功能垂体腺瘤的垂体相关转录因子表达与临床特征分析

目的 探讨垂体相关转录因子在无功能垂体腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法 收集2013~2019年手术切除的无功能垂体腺瘤组织151例,采用组织芯片技术检测5个垂体相关转录因子（Pit-1、SF-1、GATA2、Tpit、ERα）的表达。结果 5个转录因子均阴性36例,Pit-1阳性91例,SF-1阳性11例,GATA2阳性9例,ERα阳性4例;生长激素（GH）细胞腺瘤53例,多激素细胞腺瘤42例,零细胞腺瘤36例,促性腺激素（GnH）细胞腺瘤11例,促甲状腺激素（TSH）细胞腺瘤9例,各类无功能垂体腺瘤病人的年龄和Ki-67指数无统计学差异（P>0.05）,TSH细胞腺瘤体积最小、侵袭性比例最低（P<0.05）,多激素细胞腺瘤、GnH细胞腺瘤和零细胞腺瘤体积较大（P<0.05）,零细胞腺瘤P53阳性率最低（P<0.05）。5个转录因子阳性表达以40~59岁病人多见（P<0.05）;Tpit阳性表达以男性多见（P<0.05）,其余4个转录因子以女性多见（P<0.05）。Pit-1阳性病人血清GH、TSH水平明显增高（P<0.01）,ERa阳性病人血清泌乳素水平明显增高（P<0.05）,GATA2阳性病人血清TSH水平明显增高（P<0.01）,血清促肾上腺皮质激素水平与5个转录因子表达水平无明显关系（P>0.05）。结论 垂体相关转录因子可以为临床诊断无功能垂体腺瘤提供新依据,而且其阳性表达与无功能垂体腺瘤病人的临床特征有密切联系。     

Clinical features and immunohistochemical changes of pituitary apoplexy

The clinical features of 426 pituitary adenomas were retrospectively analyzed, focusing on the factors that affect the development of pituitary apoplexy. Immunohistochemical analysis was used to define the different hormone types of the tumors and the expression of various immunologic targets, including the pituitary tumor transforming gene, basic fibroblast growth factor-2, matrix metalloproteinase-9, tissue inhibitor of metalloproteinase-1, and proliferating cell nuclear antigen. Of the 426 patients, 83 presented with pituitary apoplexy (19.48%). Among them, 43 patients (43/83, 51.82%) developed apoplexy in the absence of any obvious precipitating factor. Clinical manifestations included headaches (80/83, 96.38%), vision loss (69/83, 83.13%), pituitary function change (51/83, 61.45%), visual field defects (41/83, 49.39%), and nausea and vomiting (34/83, 40.96%). Male patients and patients with functional adenoma had a higher probability of developing apoplexy. Complicated immunological expression patterns were found in adenomas associated with pituitary apoplexy, with adenomas of different hormone types identified.     

Signalling Pathway Mediated by CXCR7, an Alternative Chemokine Receptor for Stromal-Cell Derived Factor-1α, in AtT20 Mouse Adrenocorticotrophic Hormone-Secreting Pituitary Adenoma Cells

Stromal cell-derived factor (SDF)-1 and its receptor, CXCR4, have been identified in both neurones and glia of many brain areas. Previous studies have mainly focused on the role of SDF-1 and CXCR4 in modulating the hypothalamic-pituitary axis and their possible involvement in the development of pituitary adenomas. An alternative SDF-1 receptor, CXCR7, has recently been identified, but it has not been studied in the context of pituitary adenomas. The present study aimed to investigate the distribution and function of CXCR7 in pituitary adenomas. The expression of CXCR7, normalised to β-actin, was assessed by tissue microarray analysis of 62 adenomas, including 23 growth hormone (GH)-producing adenomas, 22 nonfunctioning adenomas, seven prolactin (PRL)-producing adenomas, six adrenocorticotrophic hormone-producing adenomas and four thyroid-stimulating hormone-producing adenomas. In vitro functional studies used RNA interference (RNAi) and cDNA microarray analysis to evaluate the CXCR7 signalling pathway in AtT-20 mouse pituitary adenoma cells treated with recombinant mouse SDF-1α and transfected with RNAi against Cxcr7 or control RNAi. In tissue microarray analysis, prominent expression of CXCR7 was observed in GH-producing adenomas and PRL-producing adenomas, and in macroadenomas (P < 0.05). Intracellular signalling via CXCR7 up-regulated Bub1, Cdc29 and Ccnb1, and down-regulated Asns, Gpt, Pycr1, Cars and Dars. The present study demonstrates that the SDF-1α/CXCR7 signalling pathway regulates genes involved in cell cycle control, amino acid metabolism and ligase activity, which comprise targets that are distinct from those of CXCR4.