红景天苷对脑缺血再灌注大鼠的作用及机制

目的 研究红景天苷对脑缺血再灌注大鼠的作用及机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、红景天苷组(50 mg·kg-1)与红景天苷+PD98059组(50 mg·kg-1+1 mg·kg-1),每组15只.采用中动脉栓塞法造模,利用TTC染色检测大鼠脑梗死区域,TUNEL染色检测大鼠脑中神经元凋亡,Western...     

细胞外信号调节激酶信号通路对癫痫大鼠海马内HIF-1α表达的调控作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路是否参与调节癫痫大鼠海马内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达. 方法 208只21d龄SD大鼠按随机数字表法分为癫痫持续状态(SE)组(96只)、对照组(96只)和PD98059组(16只),SE组腹腔注射戊四氮(PTZ)溶液制作SE模型,对照组注射等剂量生理盐水,造模后0.5、1、1.5、6、12、24h采用RT-PCR、Western blotting分别检测2组大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2 mRNA和蛋白的表达;PD98059组大鼠腹腔注射PD98059,10min后腹腔注射PTZ溶液制作SE模型,造模成功后1h采用RT-PCR检测大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2mRNA的表达,造模成功后1.5 h采用Western blotting检测其相应蛋白的表达. 结果 与对照组比较,SE组大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2 mRNA及其蛋白的表达明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);其中ERK1/2 mRNA的表达高峰(1.112±0.126)在SE后1h,蛋白的表达高峰(1.127±0.155)在SE后1.5 h;而HIF-1α mRNA的表达高峰(0.589±0.090)在SE后1.5 h,蛋白的表达高峰(0.230±0.052)在SE后6h.与SE组相比,PD98059组大鼠海马内HIF-1αmRNA、ERK1/2 mRNA和蛋白的表达均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).SE组大鼠中,T-ERK 1/2与HIF-1αmRNA的表达呈正相关(r=0.688,P=0.000). 结论 戊四氮诱导发育期大鼠SE后ERK信号通路被激活,参与了海马内HIF-1α的表达调控.     

乳胞素对SD大鼠脑出血模型神经新生的影响及机制

目的 探讨UPS抑制剂乳胞素(lactacystin)对SD大鼠脑出血模型神经新生的影响及机制.方法 采用Ⅶ型胶原酶诱导SD大鼠脑出血模型,分为对照组(A组),乳胞素处理组(B组),每组各20只;造模成功后第1～7天B组腹腔注射1 mg/(kg·d)的乳胞素,A组腹腔注射等剂量生理盐水.第3周断头处死SD大鼠,以组织化...     

阿司匹林促进大鼠缺血脑组织脑源性神经营养因子的表达

目的:探讨不同剂量阿司匹林(Asp)对脑缺血/再灌注(CI/RP)损伤大鼠的神经保护作用及其对脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉CI/RP模型,对CI/RP后大鼠进行肢体神经功能缺损评分:1~3分的48只大鼠入选。入选大鼠分为对照组、Asp小剂量组(20 mg.kg-1)、Asp中剂量组(80 mg.kg-1)和Asp大剂量组(320 mg.kg-1),于CI/RP术后每日腹腔注射Asp或溶媒,并进行神经功能缺损评分,72 h后处死,测定脑梗死体积和BDNF免疫组化检测。结果:CI/RP后24、48和72 h各Asp组大鼠与对照组相比,神经缺损评分明显降低(P<0.05或P<0.01),梗死灶体积显著减小(P<0.01),缺血区域BDNF表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。对BDNF表达的作用Asp大剂量组的作用并不优于Asp小剂量组和中剂量组。结论:Asp可以减少CI/RP大鼠的脑梗死体积;促进内源性BDNF的表达可能是其神经保护的机制之一,Asp对BDNF表达的作用并非随Asp剂量的加大而增强。     

丝氨酸/苏氨酸激酶通路参与促红细胞生成素保护帕金森病大鼠的实验研究

目的观察促红细胞生成素(EPO)对帕金森病(PD)模型大鼠的保护作用并探讨其机制。方法实验大鼠分为3组,1 PD组:6-羟基多巴(6-OHDA)定向注射至右侧前脑内侧束建立PD模型;2 EPO组:在模型制备前持续1周给予腹腔注射EPO 10 000 U·kg-1·d-1;3假手术组:大鼠脑内立体定向注射生理盐水。采用ELISA法检测大鼠脑脊液EPO含量变化,术后3周评估大鼠行为学改变,免疫组化学、免疫荧光及蛋白印迹法分别检测酪氨酸羟化酶(TH)、EPO受体(EPO-R)及丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)磷酸化(Ser473)的表达。结果 1 EPO组脑脊液内EPO含量[(416.59±9.34)μU·L-1]增加,与假手术组[(2.20±1.92)μU·L-1]比较,差异有统计学意义(P0.05);2 EPO组的行为学改善,黑质多巴胺能神经元的丢失减少,黑质EPO-R的表达增加,与PD组及假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05);3 EPO组黑质Akt磷酸化(Ser473)的表达明显增加,与PD组及假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EPO腹腔注射可以改善PD大鼠的运动症状,与EPO增加PD大鼠的磷酸化Akt(Ser473)表达可能有关。     

ERK1/2信号通路对缺血后适应大鼠皮层的作用

目的研究脑缺血大鼠缺血后适应模型中大脑皮质的ERK1/2通路表达特点及应用ERK1/2特异性抑制剂PD98059后对缺血后适应神经保护作用的影响,研究缺血后适应是否通过ERK1/2信号通路介导对急性缺血性脑梗死再灌注后的神经保护作用。方法将20只SD大鼠随机分为假手术组、缺血2h再灌注组、缺血2h后适应组以及PD98059+缺血2h后适应组(PD+2h后适应组),每组5只,用线栓法建立急性大脑中动脉闭塞的缺血性脑梗死模型,4组分别进行不同形式的实验。对比4组大鼠再灌注1h、24h的神经功能评分及再灌注24h后的梗死体积。每组另增加15只大鼠,分别于再灌注后2h、6h、24h留取缺血大脑皮质;Western blot检测再灌注2h、6h、24h后总T-ERK1/2、P-ERK1/2表达。结果 PD+2h后适应组与缺血2h再灌注组神经功能缺损评分高于缺血2h后适应组,脑梗死体积大于缺血2h后适应组。缺血后适应组再灌注2h、6h、24h后P-ERK1/2表达明显高于缺血2h再灌注组及PD+2h后适应组;以上表明,缺血后适应通过ERK1/2信号通路减轻大鼠缺血性脑损伤,应用P-ERK1/2的阻滞剂PD98059后,阻断了缺血后适应的脑保护作用。结论通过对本实验研究数据的分析后发现,缺血后适应对大鼠急性缺血性脑梗死具有神经保护作用,应用ERK1/2特异性抑制剂PD98059后,缺血后适应神经保护效应减弱,说明缺血后适应对急性缺血性脑梗死再灌注损伤的保护作用与MAPK/ERK信号通路具有深层次紧密关系。     

新型GLP-1/GIP双受体激动剂DA3-CH对大鼠癫痫持续状态后海马神经元凋亡的影响

目的探索新型胰高血糖素样肽-1/葡萄糖依赖性促胰岛素样肽(GLP-1/GIP)双受体激动剂DA3-CH对匹罗卡品诱导的大鼠癫痫持续状态(SE)后海马神经元凋亡的影响,进而探讨其神经保护作用。方法将108只体质量为250～300g的健康成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NS组,n=12)、癫痫持续状态模型组(SE组,n=48)、DA3-CH干预组(SE+DA3组,n=48),SE组和SE+DA3组分别据造模成功后观察指标的不同时间点(SE后12h、1d、3d、7d)分为4个亚组(每个亚组n=12)。腹腔注射匹罗卡品(30mg·kg~(-1))诱导SE模型,造模成功后,SE+DA3组大鼠每日进食前给予腹腔注射DA3-CH(101nmoL·kg~(-1)),NS组及SE组大鼠给予等体积生理盐水。各亚组分别于SE后12h、1d、3d、7d检测空腹尾静脉血糖水平后处死取脑,采用免疫组化和Western blot方法检测海马中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及神经元核抗原NeuN的表达水平。结果①NS组、SE组、SE+DA3组各亚组大鼠之间的空腹尾静脉血糖水平差异无统计学意义(P>0.05);②免疫组化与Western blot结果显示,NS组、SE组、SE+DA3组各亚组大鼠之间海马Bax、Bcl-2、NeuN表达水平差异均有统计学意义(P<0.001);与NS组相比,SE组大鼠海马Bax、Bcl-2表达水平升高,NeuN表达水平降低;与SE组相比,SE+DA3组大鼠海马Bax表达水平降低,Bcl-2、NeuN表达水平升高。结论新型GLP-1/GIP双受体激动剂DA3-CH可抑制大鼠癫痫持续状态导致的海马神经元凋亡,减少神经元丢失,具有神经保护作用。     

骨化三醇对脂多糖诱导帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用

目的探讨骨化三醇对多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法用骨化三醇腹腔注射治疗脂多糖(LPS)偏侧帕金森病(PD)模型大鼠。成年雄性SD大鼠60只随机分为4组1对照组:右侧黑质致密部立体定向注射2μL生理盐水;2 LPS模型组:右侧黑质致密部立体定向注射LPS 2μL(5μg·μL-1);3骨化三醇高剂量组:LPS造模前7 d和造模后14 d,分别腹腔注射骨化三醇0.1μg·kg-1;4骨化三醇低剂量组:LPS造模前7 d和造模后14 d,分别腹腔注射骨化三醇0.05μg·kg-1。每组大鼠均n=15。观察阿扑吗啡诱导的PD大鼠旋转行为变化,免疫荧光组化学法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达,ELISA法测定黑质区炎性因子(IL-1β和TNF-α)的变化。结果骨化三醇干预组大鼠旋转圈数相对于LPS模型组明显降低,其黑质TH阳性神经元存活比率显著高于LPS模型组,且能明显减少黑质中IL-1β和TNF-α的释放量。结论骨化三醇能够减轻LPS引起的大鼠多巴胺能神经元的损害,其机制与减少免疫炎症因子的释放有关。     

神经妥乐平治疗老年原发性三叉神经痛的疗效观察

目的 观察神经妥乐平治疗老年原发性三叉神经痛的疗效.方法 将58例老年患者随机分为神经妥乐平组和卡马西平组,应用视觉模糊评分法(VAS)评价2组治疗后疼痛的改善情况并观察药物不良反应.结果 治疗第1周、2周、3周、4周后神经妥乐平组VAS较治疗前明显下降(均P＜0.01),总有效率为83.3 %,明显优于卡马西平组(60.7%).结论 神经妥乐平治疗老年原发性三叉神经痛的疗效优于卡马西平.     

盐酸度洛西汀联合神经妥乐平治疗糖尿病痛性神经病变的效果分析

目的探讨度洛西汀联合神经妥乐平对糖尿病痛性神经病变(PDPN)的疗效和安全性。方法将2012年5月-2014年10月内蒙古医科大学附属医院收治的100例糖尿病并发痛性神经病变的患者随机分为度洛西汀联合神经妥乐平组(研究组)和单用神经妥乐平组(对照组)各50例,前者给予度洛西汀联合神经妥乐平治疗,后者单用神经妥乐平治疗,疗程8周。分别于治疗前和治疗2、4、8周后进行疼痛强度简易评述量表(VRS)、数字疼痛强度量表(NRS)评定,采用焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)评定焦虑和抑郁状态,于治疗2周、8周后测定正中神经及腓肠神经传导速度。结果治疗2、4、8周后,两组VRS、NRS评分比较差异有统计学意义(P0.05),组间SAS和SDS评分比较差异均有统计学意义(P0.05),两组治疗8周后与治疗前感觉神经传导速度比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论度洛西汀联合神经妥乐平治疗PDPN的效果和安全性可能优于单用神经妥乐平。     

葛根素通过Nrf2-ARE信号通路抵抗氧化应激对创伤性脑损伤的神经保护作用

目的 探讨葛根素对创伤性脑损伤(TBI)模型大鼠的神经保护作用及脑组织红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)一抗氧化反应原件(ARE)信号通路参与的机制。方法 选择健康成年雄性大鼠体重250～300 g构建TBI模型,将大鼠分为4组:创伤组(A组)、假手术组(B组)、葛根素治疗的创伤组(C组)和葛根素治疗的假手术组(D组); 通过采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)评价神经功能,脑组织干湿重称量法评价脑水肿,Nissl染色,TUNEL染色评价脑损伤体积和神经元的凋亡,使用酶活试剂盒检测损伤48 h后抗氧化酶SOD,GSH,和GSSG的活性以及氧化应激产物MDA和NO的水平,最后使用western blot和RT-PCR的方法检测Nrf2-ARE信号通路及其下游分子HO-1,NQO1的表达水平。结果 TBI手术后损伤组mNSS评分明显增高(P<0.05),葛根素治疗组能够明显降低mNSS评分(P<0.05)。TBI手术后损伤组脑水肿加重及神经元凋亡增加(P<0.05),葛根素治疗组能够明显挽救脑水肿及神经元凋亡(P<0.05)。TBI手术12 h后损伤组脑内抗氧化酶SOD,GSH,和GSSG的活性增加及氧化应激产物MDA和NO的水平升高(P<0.05),葛根素治疗组能够明显降低抗氧化酶SOD,GSH,和GSSG的活性以及氧化应激产物MDA和NO的水平(P<0.05)。western blot和RT-PCR显示葛根素不改变Nrf2的翻译和表达,但是RT-PCR显示葛根素能够明显促进Nrf2-ARE信号通路下游分子HO-1,NQO1的表达。结论 葛根素可能通过Nrf2-ARE信号通路抵抗氧化应激对创伤性脑损伤发挥神经保护作用。     

莪术提取物对单纯疱疹病毒性脑炎模型小鼠脑血流动力学及氧化应激的作用

目的 探讨莪术提取物对单纯疱疹病毒性脑炎(Herpes simplex encephalitis,HSE)模型小鼠脑血流动力学及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法 选取48只C57BL/6雄性小鼠脑部注射Ⅰ型单纯疱疹病毒建立HSE小鼠模型,造模成功小鼠随机分为模型组、莪术提取物低、高剂量(50、100 mg/kg)组、西药组(150 mg/kg阿昔洛韦)各12只,另设对照组12只; 实验期间记录小鼠一般情况和存活天数并计算生命延长率; 酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠血清丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平; 激光散斑成像系统检测小鼠脑血流变化; 苏木精-伊红染色法(Hematoxylin eosin staining,HE)染色观察小鼠脑组织病理学变化; 实时荧光定量聚合酶链反应法(Real time fluorescent quantitative polymerase chain rection,RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测小鼠脑组织中核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(Heme oxygenase 1,HO-1)mRNA和蛋白相对表达水平。结果 与模型组比较,莪术提取物低、高剂量组和西药组小鼠存活天数、GSH-Px,SOD水平、平均血流指数、Nrf2与HO-1 mRNA和蛋白相对表达水平升高,MDA水平降低(P<0.05); 与莪术提取物低剂量组比较,莪术提取物高剂量组和西药组小鼠存活天数、生命延长率、GSH-Px,SOD水平、平均血流指数、Nrf2与HO-1 mRNA和蛋白相对表达水平升高,MDA水平降低(P<0.05); 莪术提取物高剂量组以上指标水平与西药组比较无明显差异(P>0.05)。结论 莪术提取物能够降低HSE模型小鼠脑组织中氧化应激反应,提高脑血流指数,改善HSE模型小鼠脑组织损伤,其机制可能是通过调节Nrf2/HO-1信号通路而发挥作用。     

糖尿病小鼠加重脑缺血后认知障碍的相关机制研究

目的探讨氧化应激损伤对糖尿病小鼠局灶性脑缺血后认知功能的影响。方法制备糖尿病模型,参照Longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,采用Longa法进行神经功能缺失评分,苏木精-伊红染色测定梗死体积,Western blotting法检测Nrf2/HO-1及认知相关性蛋白p-Ca MKII/Ca MKII、p-Synapain/Synapain、p-Glu R1/Glu R1的蛋白表达。结果糖尿病小鼠局灶性脑缺血-再灌注后神经功能缺失评分、梗死体积较非糖尿病组明显严重(P0.05),同时伴有脑组织Nrf2/HO-1、p-Ca MKII/Ca MKII、p-Synapain/Synapain、p-Glu R1/Glu R1蛋白表达下调(P0.05)。结论糖尿病小鼠局灶性脑缺血—再灌注后Nrf2/HO-1表达降低,且与神经功能缺失及p-Ca MKII/Ca MKII、p-Synapain/Synapain、p-Glu R1/Glu R1表达下调一致,提示Nrf2/HO-1是糖尿病脑梗死后导致认知障碍的关键环节。     

舒芬太尼对大鼠蛛网膜下腔出血后脑损伤的保护作用

目的 探讨舒芬太尼对大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后脑损伤的作用及其机制。方法 取60只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组和舒芬太尼组,每组20只。采用血管内穿孔法建立SAH模型,舒芬太尼组建模后6 h尾静脉注射舒芬太尼溶液（5 μg/kg,1次/d,连续3周）,假手术组和模型组尾静脉注射等量生理盐水。造模后1、2、21 d,采用改良改良神经严重性量表（mNSS）评分评估神经功能;末次神经功能评估结束后,采用湿干重比法测定脑含水量,TUNEL染色检测神经元凋亡率,EILSA法测定脑组织MDA、SOD、GSH-PX、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,免疫印迹法检测Nrf2、HO-1、NF-κB p65、BCL-2和cleaved-caspase-3蛋白的表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠mNSS显著增高（P<0.001）,脑含水量显著增加（P<0.05）,神经元细胞凋亡率显著增加（P<0.001）,脑组织MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-kB p65和cleaved-caspase-3水平显著升高（P<0.01）,而脑组织SOD、GSH-Px、BCL-2、Nrf2和HO-1水平显著降低（P<0.05）。与模型组相比,舒芬太尼组大鼠上述改变明显改善（P<0.05）。结论 舒芬太尼对SAH后脑损伤有保护作用,其机制可能其抗细胞凋亡、抗氧化应激和抗炎症反应等作用有关。     

Activation of the Nrf2-ARE signal pathway after blast induced traumatic brain injury in mice

Background: Treatment of blast-induced traumatic brain injury (bTBI) has been hindered. Previous studies have demonstrated that oxidative stress may contribute to the pathophysiological process. The nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)-antioxidant response element (ARE) signaling pathway exhibits a protective effect after traumatic brain injury (TBI). This study explored whether the Nrf2-ARE pathway was activated in a modified bTBI mouse model.

Method: Mice were randomly divided into six groups: the 6?h, 1 d, 3 d, 7 d and 14 d after bTBI groups and a sham group. The protein levels of nuclear Nrf2, heme oxygenase-1 (HO-1) and NAD(P)H: quinone oxidoreductase-1 (NQO1) were detected using western blot, and HO-1 and NQO1 mRNA levels were determined by real-time quantitative polymerase chain reaction. Moreover, HO-1 and Nrf2 were localized using histological staining.

Results: The protein level of the Nrf2-ARE pathway in the frontal lobe increased significantly in the 3 d after bTBI. The HO-1 and NQO1 mRNA levels also reached a peak in the frontal lobe 3 d after bTBI. The histological staining demonstrated higher expression of HO-1 in the frontal lobe and hippocampus 3 d after bTBI, when nuclear import of Nrf2 reached a peak in the frontal lobe.

Conclusions: bTBI activated the Nrf2-ARE signaling pathway in the brain. The peak activation time in the frontal lobe may be 3 d after injury, and activating the Nrf2 pathway could be a new direction for treatment.     

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后血红素氧合酶-1/一氧化碳系统(HO-1/CO)变化,探讨其在HIBD中的作用.方法 7日龄Wistar新生大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、缺氧缺血组(HIBD组)及HO抑制剂锌原卟啉组(Znpp组),每组6只.采用实时荧光定量PCR法、硫代巴比妥酸法(TBA法)、流式细胞术(FCM)和双波长定量测定法分别检测脑组织中HO-1 mRNA的表达、丙二醛(MDA)含量、脑组织细胞凋亡率及血中CO浓度.结果 与Sham组比较,HIBD组、Znpp组HO-1 mRNA表达均增强(分别为0.166±0.042、2.289±0.333、1.839±0.322),CO浓度升高[分别为(0.460±0.009)%、(1.026±0.145)%、(0.735±0.079)%],差异有统计学意义(P＜0.05);但与HIBD组比较,Znpp组HO-1 mRNA表达明显减少,CO浓度降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与Sham组比较,HIBD组、Znpp组MDA含量及细胞凋亡率均明显升高[MDA含量分别为(1.016±0.210)nmol/mg prot、(1.945±0.312)nmol/mg prot、(3.202±0.693)nmol/mg prot,凋亡率分别为(0.108±0.009)%、(1.412±0.307)%、(2.458±0.565)%],差异有统计学意义(P＜0.05);与HIBD组比较,Znpp组MDA含量及细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺氧缺血性脑损伤后HO-1/CO系统可能在脑损伤的恢复中起到一定的保护作用.     

经鼻导入rhG-CSF对脑梗死大鼠皮层FasL和HO-1表达的影响

目的 探讨经鼻靶向中枢导入重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑梗死大鼠皮层Fas配体(FasL)和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响. 方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、脑梗死组、脑梗死+皮下注射rhG-CSF组、脑梗死+经鼻导入生理盐水组、脑梗死+经鼻导入rhG-CSF组.线栓法制作大鼠可逆性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,2 h后再灌注.于MCAO模型制作成功后1 d、3 d制备脑组织冠状冰冻切片,用免疫荧光染色检测FasL和HO-1在缺血半暗带皮层的表达,激光共聚焦显微镜采集图像并计数阳性细胞数. 结果正常组和假手术组大鼠脑组织中见极少量FasL和HO-1阳性细胞,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).脑梗死组大鼠FasL和HO-1阳性细胞数明显增加(1 d时较3 d时高),表达区域主要为缺血半暗带皮层,与脑梗死+经鼻导入生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05).经鼻给予rhG-CSF治疗后脑梗死大鼠脑组织内FasL阳性细胞表达下降,HO-1阳性细胞表达进一步上调,与脑梗死+皮下注射rhG-CSF组大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论经鼻靶向中枢导入rhG-CSF可以通过降低FasL、上调HO-1表达抑制脑梗死大鼠缺血半暗带皮层神经元凋亡,参与脑保护机制.     

经鼻导入rhG-CSF对脑梗死大鼠皮层FasL和HO-1表达的影响

目的 探讨经鼻靶向中枢导入重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑梗死大鼠皮层Fas配体(FasL)和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响. 方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、脑梗死组、脑梗死+皮下注射rhG-CSF组、脑梗死+经鼻导入生理盐水组、脑梗死+经鼻导入rhG-CSF组.线栓法制作大鼠可逆性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,2 h后再灌注.于MCAO模型制作成功后1 d、3 d制备脑组织冠状冰冻切片,用免疫荧光染色检测FasL和HO-1在缺血半暗带皮层的表达,激光共聚焦显微镜采集图像并计数阳性细胞数. 结果正常组和假手术组大鼠脑组织中见极少量FasL和HO-1阳性细胞,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).脑梗死组大鼠FasL和HO-1阳性细胞数明显增加(1 d时较3 d时高),表达区域主要为缺血半暗带皮层,与脑梗死+经鼻导入生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05).经鼻给予rhG-CSF治疗后脑梗死大鼠脑组织内FasL阳性细胞表达下降,HO-1阳性细胞表达进一步上调,与脑梗死+皮下注射rhG-CSF组大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论经鼻靶向中枢导入rhG-CSF可以通过降低FasL、上调HO-1表达抑制脑梗死大鼠缺血半暗带皮层神经元凋亡,参与脑保护机制.     

Role of the Nrf2-ARE pathway in early brain injury after experimental subarachnoid hemorrhage

The nuclear factor erythroid 2-related factor 2 and antioxidant-response element (Nrf2-ARE) pathway is a key regulator for modulating inflammation and oxidative damage, which are involved in the pathogenesis of early brain injury (EBI) after subarachnoid hemorrhage (SAH). Previous studies have demonstrated that Nrf2-ARE pathway play neural protective roles in traumatic brain injury, cerebral ischemia, and intracerebral hemorrhage models; however, it has not been investigated whether, and to what degree, the Nrf2-ARE pathway is induced by SAH, and the role of the Nrf2-ARE pathway in development of EBI following SAH remains unknown. Experiment 1 sought to investigate the time course of Nrf2-ARE activation in the cortex in the early stage of SAH. In experiment 2, we assessed the effect of sulforaphane (SUL; a specific Nrf2 activator) on regulation of the Nrf2-ARE pathway in the SAH model and evaluated the impact of SUL on EBI after SAH. The rat SAH model was used injection of 0.3 ml fresh arterial, nonheparinized blood into the prechiasmatic cistern over 20 sec. As a result, Nrf2 and its target gene product, heme oxygenase-1 (HO-1), were up-regulated in the cortex after SAH and peaked at 24 hr post-SAH. After intraperitoneal SUL administration, the elevated expression of Nrf2-ARE-related factors such as Nrf2, HO-1, NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 (NQO1), and glutathione S-transferase-α1 (GST-α1) was detected in the cortex at 48 hr following blood injection. In the SUL-treated group, early brain damage such as brain edema, blood-brain barrier (BBB) impairment, cortical apoptosis, and motor deficits was significantly ameliorated compared with vehicle-treated SAH rats. Our results suggest that the Nrf2-ARE pathway is activated in the brain after SAH, playing a beneficial role in EBI development, possibly through inhibiting cerebral oxidative stress by inducing antioxidant and detoxifying enzymes.