精神分裂症MK-801动物模型的研究进展

精神分裂症是一种严重且常见的精神疾病,致病原因目前尚不明确。地卓西平马来酸盐(MK-801)模型是被广泛应用的精神分裂症动物模型,能覆盖精神分裂症的主要内表型。本文围绕MK-801动物模型的发病机制、造模方法、行为学特点等内容展开综述,以期为精神分裂症的相关研究提供思路。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型早期轴索损伤

目的 研究实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型发病早期的轴索损伤.方法 采用髓鞘蛋白脂蛋白(PLP139-151)多肽作为抗原诱发EAE小鼠模型.小鼠经免疫后每天进行神经功能评分及称体质量,于发病后剥离脑及脊髓组织进行病理学研究.结果 7只(23.3%)小鼠于免疫后15～22 d内发病,平均免疫后发病时间为(19.00±2.58)d,平均神经功能评分为(2.14±0.69)分.免疫前小鼠平均体质量[(21.85±0.94)g]与发病后体质量[(23.24±1.55)g]比较差异无统计学意义.HE染色可见发病小鼠软脊膜下脊髓组织炎性细胞浸润明显,以小血管周围为主的血管袖套形成.病变累及脊髓多见,且较大脑病变重.LFB染色可见炎细胞浸润处髓鞘有不同程度脱失,同时Bodian银染可见轴索肿胀、横断.免疫组织化学染色可见髓鞘碱性蛋白着色的相同区域淀粉样前体蛋白浓染,而星形胶质细胞GFAP染色增生不明显.结论 PLP多肽诱发SJL/J小鼠的EAE模型临床症状较轻,病变主要累及脊髓,而在大脑未发现与MS类似的典型病灶.在EAE发病早期,髓鞘还未明显脱失时即可见轴索损伤,且早期轴索损伤与临床症状并不平行.     

精神分裂症MK-801动物模型的研究进展

精神分裂症是一种严重且常见的精神疾病, 致病原因目前尚不明确。地卓西平马来酸盐(MK-801)模型是被广泛应用的精神分裂症动物模型, 能覆盖精神分裂症的主要内表型。本文围绕MK-801动物模型的发病机制、造模方法、行为学特点等内容展开综述, 以期为精神分裂症的相关研究提供思路。     

β-arrestin1参与MK-801治疗帕金森病异动症的研究

目的 探讨MK-801缓解帕金森病(PD)异动症的治疗机制。方法 建立PD运动并发症大鼠模型,25只大鼠随机分为3组：异动症(LID)组10只、MK-801处理组10只、PD组5只,另设假手术组5只为对照组。观察MK-801治疗左旋多巴诱导的异动症大鼠模型的行为学变化,并采用免疫组织化学方法和Western blot印迹法检测大鼠纹状体区β-arrestin1的表达情况。结果 MK-801处理后,LID大鼠模型异常不自主运动评分降低和剂峰旋转行为减弱。免疫组织化学结果显示LID组损伤侧β-arrestin1阳性细胞指数[(2.95±0.44) ×104]明显较未损伤侧[(3.78 ±0.37)×104]降低,差异有统计学意义(t =5.415,P＜0.05)。Western blot结果显示,PD模型组损毁侧与未损毁侧纹状体区β-arrestin1含量比值为81.02％ ±2.23％;LID组(64.88％±3.10％)蛋白表达量进一步减少,与PD组比较,差异有统计学意义(t=9.47,P＜0.01);而MK-801组蛋白表达量增高至89.26％±1.90％,与LID组相比,差异有统计学意义(t=14.82,P＜0.01)。结论 MK-801能缓解LID大鼠的行为学变化,其机制可能与β-arrestin1表达增多抑制了谷氨酸受体的过度活化有关。     

MK-801建立谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型的研究

目的用谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体非竞争性拮抗剂地卓西平马来酸盐(MK-801)建立谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型,评价MK-801不同剂量时对这种模型的行为学改变,探讨其适宜剂量。方法根据文献及预试验,确定MK-801的实验剂量,用DigBehv自发活动视频分析系统测定腹腔注射MK-801不同剂量组小鼠的自发活动,用评分量表评价小鼠的刻板行为,并与注射生理盐水组比较。结果MK-801(0．125～0．50 mg／kg)呈剂量依赖性增加小鼠的自发活动和刻板行为。MK-801剂量为0．25 mg／kg时能显著增加小鼠的自发活动和刻板行为,而且从行为学方面评定,没有明显的神经毒性作用。0．50 mg/kg剂量组出现了后肢肌力障碍和明显的共济失调等神经毒性表现。结论0．25 mg／kg的MK-801可作为谷氨酸功能低下小鼠模型的最适宜剂量,引起的行为学改变能够客观量化。     

PLP不同肽段诱导EAE模型的对比研究

目的建立不仅与多发性硬化(multiple sclerosis，MS)临床表现、病理特征接近而且病程相似的较为理想的复发一缓解型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)模型。方法应用髓鞘蛋白脂质蛋白(proteolipid potein，PLP)多肽的两种免疫优势表位肽段PLP139-151和PLP178-191免疫雌性SJL／J小鼠，制作复发缓解型EAE(relapse remitting experimental autoimmune encephalomyelitis，RR—EAE)模型，观察其体重及神经功能评分的变化，应用HE、Luxol fas tblue髓鞘染色等方法观察模型的组织形态学改变。结果两种PLP肽段免疫的小鼠发病均具有缓解一复发的特点，出现明显的神经系统体征；小鼠发病时脑和脊髓组织显示明显的血管鞘形成、卫星现象和炎性细胞浸润以及脱髓鞘改变。结论PLP两种肽段均可诱发RR-EAE模型，这与临床MS的缓解一复发病程更相似，更能表现MS的临床特点，是研究MS的较为理想的动物模型。     

小剂量MK-801对大鼠参照记忆、空间工作记忆和逆反学习能力的影响

目的 探讨腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸 (NMDA )受体拮抗剂地卓西平马来酸盐(MK-801)对大鼠认知功能的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为MK-801组和对照组,分别腹腔注射小剂量生理盐水或MK-801(0.1 mg/kg)20 min后在Morris水迷宫中评定MK-801对大鼠参照记忆、空间工作记忆和逆反学习能力的影响.结果 参照记忆任务中,与对照组相比MK-801组逃避潜伏期延长(P<0.05),且在目标象限的探索时间百分比[(22.7±2.9)%]与相邻象限[(24.0±0.9)%]和对立象限[(29.3±2.4)%]的差异无统计学意义 (P>0.05);空间工作记忆任务中,对照组匹配试次潜伏期显著短于样本试次[(37.6±6.0) vs (61.5±6.3),P<0.05],而MK-801组两试次潜伏期差异无统计学意义[(53.8±7.8) vs (62.2±7.1),P>0.05];逆反学习任务中,与对照组相比MK-801组潜伏期明显延长(P<0.05),且在空间探索中新旧目标象限探索时间百分比差值小于对照组[(-0.01±4.7) vs (23.5±6.2),P<0.01].结论 腹腔注射小剂量MK-801破坏了大鼠的参照记忆、空间工作记忆和逆反学习,提示其在多个认知维度上可模拟精神分裂症患者的认知缺陷.     

口服髓鞘素对EAE的防治作用

目的:研究口服髓鞘素对EAE的防治作用。方法:在建立Wistar大鼠EAE动物模型的基础上,观察灌服髓鞘素对其临床表现及病理改变的影响。结果:口服组发病延迟,症状及病理改变均明显轻于对照组。结论:口服髓鞘素可诱导免疫耐受,对EAE的发生、发展具有一定的缓解作用。     

蠕虫对多发性硬化动物模型的保护作用

一、多发性硬化(MS)和实验性自身免疫性脑脊髓炎多发性硬化是中枢神经系统(CNS)白质炎症脱髓鞘性自身免疫性疾病,临床主要表现为缓解复发和阶梯进展的视力、运动和平衡障碍。MS按疾病的病程分为以下几种类型:缓解复发型、原发进展和继发进展型。MS病情的进展是髓鞘抗原特异性T细胞,以髓鞘为靶,导致CNS的炎症浸润,最后导     

氯喹对EAE模型小鼠神经元损伤的影响

目的观察氯喹对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脊髓神经元存活的影响,并探讨相关机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,造模成功后给予氯喹干预。应用Knoz法进行临床评分,脊髓腰膨大节段石蜡包埋、冠状切片,行苏木精-伊红、LFB和Nissl染色,分别观察各组小鼠脊髓炎症反应、髓鞘脱失和神经元存活情况。脊髓腰膨大冷冻切片,行免疫荧光双标染色。同时提取脊髓腰膨大组织蛋白检测凋亡相关蛋白表达。结果氯喹缓解EAE小鼠临床症状,减轻脊髓炎性细胞浸润、髓鞘脱失、以及神经元死亡和损伤。与对照组相比,氯喹治疗组脊髓Bax水平降低,Bcl-2水平升高,Bax/Bcl-2比值降低。Neu N与Bcl-2荧光共定位明显增强。结论氯喹可能通过调节中枢神经系统前凋亡蛋白水平、上调神经元Bcl-2表达,从而减轻EAE小鼠神经元损伤以及神经功能缺失症状,发挥神经保护作用。     

小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的病理变化

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽(MOG35-55)诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎(experi-m ental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型。方法应用MOG35-55抗原加完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠,利用光镜、电镜观察小鼠组织学改变。结果光镜下可见小血管周围炎细胞浸润,呈袖套状改变、血管周围明显脱髓鞘及神经元变性,B ieschowsky银染显示大量轴索肿胀和轴索卵形体的形成,电镜下可见髓鞘结构松散、断裂或融合,包括不同程度的髓鞘重建,脊髓病变广泛,程度重于脑部。结论EAE的病理改变为血管周围炎性细胞浸润、白质脱髓鞘及髓鞘重建。     

雌激素在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的保护作用

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)与其他多种自身免疫性疾病一样存在着性别差异,表现为:与男性相比,女性发病率较高,且初发时间也较早。女性患者在妊娠期伴随着体内雌激素水平的波动,MS患者复发次数和严重程度也出现明显变化[1]。在MS动物模型即实验性自身免疫性脑脊髓炎(exp     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的磁共振研究

目的研究动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小 鼠中枢神经系统的MR表现。方法使用PLP139-151免疫接种雌性SJL／J小鼠诱导EAE。分别取复发期和缓解期 的EAE小鼠行脑和脊髓常规MR及Gd—DTPA增强MR扫描,并做组织病理学检查。结果PLP139-151能较好的诱 导出慢性复发-缓解型EAE模型,Gd-DTPA增强MR检查能充分显示血脑屏障的破坏,反映脑和脊髓的病灶,而且 显示的病灶相对信号强度复发期明显高于缓解期,在病灶处均可见炎症细胞浸润,髓鞘脱失,病灶周围或远离病灶 处炎症反应轻微。结论Gd—DTPA增强MR检查能准确反映血脑屏障的破坏,病变累及部位及病变程度,为今后使 用药物干预EAE判断疗效、指导进行较准确的病变部位取材时提供了一种更为客观的手段。     

Regulation of experimental autoimmune encephalomyelitis: Inhibition of adoptive experimental autoimmune encephalomyelitis by ‘recovery-associated suppressor cells’

We have previously shown the presence of suppressor cells in Lewis rats at the time of spontaneous recovery from experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). These cells, called ‘recovery-associated suppressor cells’ (RASC), are capable of preventing active EAE and inhibiting in vitro the specific proliferative response of encephalitogenic anti-MBP T cell line cells. The present investigations were undertaken in order to lend support to the hypothesis that RASC play an active role in the recovery. We found that RASC can prevent adoptive EAE when admixed with already activated, but not resting, anti-MBP T cells or when injected into the recipients separately from the encephalitogenic cells. They can also arrest the course of an ongoing disease when injected after the beginning of the clinical signs. This study provides the first direct demonstration of the downregulation of an ongoing EAE by suppressor cells.     

Activation of mitogen-activated protein kinases in experimental autoimmune encephalomyelitis

The expression of mitogen-activated protein (MAP) kinases, including extracellular signal-regulated kinase (ERK), c-Jun NH(2)-terminal protein kinase (JNK), and p38, was analyzed in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in rats.

Western blot analysis showed that the three MAP kinases (phosphorylated ERK (p-ERK), p-JNK, and p-p38) were increased significantly in the spinal cords of rats with EAE at the peak stage as compared with the levels in controls (p<0.05), and both p-ERK and p-JNK declined slightly in the recovery stage of EAE. Immunohistochemistry showed that p-ERK was constitutively expressed in brain cells, including astroglial cells, and showed enhanced immunoreactivity in those cells in EAE, while some T cells and macrophages were weakly immunopositive for p-ERK in EAE lesions. Both p-JNK and p-p38 were intensely immunostained in T cells in EAE lesions, while a few glial cells and astrocytes were weakly positive for both.

Taking all these facts into consideration, we postulate that increased expression of the phosphorylated form of each MAP kinase plays an important role in the initiation of acute monophasic EAE. Differential expression of three MAP kinases was discerned in an animal model of human autoimmune central nervous system diseases, including multiple sclerosis.     

辛伐他汀抑制大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

目的 探讨辛伐他汀(STATINS)对实验性自身免疫性脑脊髓炎IEAE)的作用及机理.方法 Wistar大鼠55只采用随机数字表法分为EAE组(15只)、STATINS组(15只)、雷公藤(TP)组(15只)、正常对照组(10只).使用STATINS干预EAE大鼠,以TP为阳性对照,观察大鼠P53蛋白、IL-6、TNF-α、TGF-β的表达变化.结果 与EAE组相比,STATINS组发病率降低、临床症状减轻、体质量下降减少、病灶数减少、潜伏期延长,而TP组临床症状减轻、病灶数减少,差异均有统计学意义(P＜0.05),TP组体质量变化、潜伏期、发病率无显变化,差异无统计学意义(P＞0.05);STATINS组IL-6和TNF-α的表达降低,P53蛋白和TGF-β的表达增高;TP组仅TNF-α的表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与TP组相比较,STATINS组P53蛋白与TGF-β的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05),而TNF-α及Ⅱ-6的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 STATINS可以有效抑制EAE.其可能的机制是抑制IL-6和TNF-α等促炎症因子的表达,促进P53蛋白与TGF-β的表达,效果可能优于TP.     

Th17细胞与多发性硬化/实验性自身免疫性脑脊髓炎

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)及其理想动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)是主要累及中枢神经系统的自身免疫性疾病.     

Autonomic regulation of experimental autoimmune encephalomyelitis in IL-4 knockout mice

The effect of chemical sympathectomy induced with 6-hydroxydopamine (OHDA) on experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) was studied in wild type and IL-4^−/− C57BL/6 (B6) mice. When actively sensitized with myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)_35–55 peptide, control B6 mice developed a mild form of EAE with full recovery. The sympathectomized mice developed paralysis with higher maximum disease score and did not recover completely, indicating that the sympathetic nervous system (SNS) down-modulates the process of EAE. Unexpectedly, however, sympathectomy resulted in suppression of EAE in IL-4^−/− mice, implying that control of actively induced EAE by the SNS depends on the genetic background of mice. We also induced EAE by passive transfer of MOG_35–55-reactive lymph node cells, and this disease was augmented by sympathectomy in both wild type and knockout animals. Further experiments showed that changes in T cell populations and the activity of antigen presenting cells might be responsible for the altered immune response and clinical course after sympathetic ablation. Our studies indicate that the absence of a single cytokine can severely alter nervous–immune system interactions.     

基质金属蛋白酶9在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠发病过程中的动态表达

目的通过检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在EAE大鼠发病过程中不同阶段外周血和中枢神经系统中的表达水平及动态变化,以探讨其在多发性硬化发病过程中的作用及机制。方法 Wistar雌性大鼠80只,分为模型组(EAE组)、完全福氏佐剂组(CFA组),分别于免疫后6天、8天、10天、12天、14天、16天、18天及20天取视交叉处脑组织和脊髓腰膨大段行HE染色观察炎性细胞的浸润状况;免疫组化法检测脑和脊髓组织中MMP-9的表达,酶联免疫吸附实验测定血清中MMP-9的含量。结果 EAE组大鼠脊髓和脑组织中MMP-9阳性细胞数及血清中MMP-9水平均显著高于同期CFA组(P<0.05);EAE 10天组与EAE 6天、14天、18天及20天组比较,大鼠脊髓腰膨大处MMP-9阳性细胞数较多(P<0.05);EAE 12天组与EAE 6天组、8天组、14天组、16天组、18天组及20天组比较,大鼠脑组织视交叉处MMP-9阳性细胞数较多(P<0.05);EAE 12天组与EAE 6天组、8天组、10天组、14天组、16天组、18天组及20天组相比较,大鼠血清中MMP-9含量较高(P<0.05)。结论在EAE大鼠发病前期即有中枢组织内MMP-9的高表达,且EAE大鼠脊髓中MMP-9的高表达要早于脑组织和外周血,但MMP-9表达的高峰在第12天与病理变化和疾病进展是同步的。     

The selective M-CSF receptor tyrosine kinase inhibitor Ki20227 suppresses experimental autoimmune encephalomyelitis

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), an animal model of multiple sclerosis (MS), can be induced by the immunization of mice with myelin antigens in the form of myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG). Macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) is required for the development of individual mononuclear phagocyte populations and is involved in the immune response. We previously reported that Ki20227 (N-{4-[(6,7-dimethoxy-4-quinolyl)oxy]-2-methoxyphenyl}-N'-[1-(1,3-thiazole-2-yl)ethyl]urea) is a highly selective M-CSF receptor (c-fms) tyrosine kinase inhibitor. In our current study, we investigated whether Ki20227 has suppressive effects upon EAE and indeed found that this drug significantly reduced the severity of this disease both preventively and therapeutically. Notably also, Ki20227 treatments inhibited the turn-over/expansion of myeloid cells provoked by the immunization and subsequent MOG-specific T cell responses in our EAE animal model. These findings suggest that M-CSF plays a pivotal role in the development of EAE and that Ki20227 and its derivatives may be candidate drugs for the treatment of human MS.