儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的探讨外周血淋巴细胞亚群对儿童噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)诊断、治疗和预后判断的意义。方法 30例HLH患儿,采用HLH-2004诊断治疗方案,20例患儿获得完全缓解,10例死亡。30例同龄健康儿童作为正常对照。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群。结果 20例缓解患儿和10例死亡患儿急性期与正常对照组比较,CD3+T和CD8+T细胞比例均增高,CD4+T和CD3-CDl6+CD56+NK细胞比例均下降,CD4+/CD8+比值减低,差异均有统计学意义(H=7.857~45.448,P均0.05);CD19+B细胞比例与对照组比较,差异无统计学意义(H=6.202,P0.05)。20例HLH缓解患儿缓解期与急性期淋巴细胞亚群比较,CD3-CD16+CD56+NK细胞比例的差异有统计学意义(Z=3.760,P0.05),CD3+T、CD8+T、CD4+T和CD4+/CD8+比值、CD19+B计数差异无统计学意义(Z=0.135~1.082,P均0.05)。结论 HLH患儿淋巴细胞亚群有明显变化,存在细胞免疫失衡;动态检测其变化可能有助于判断HLH的治疗效果及预后。     

T淋巴细胞在儿童支气管哮喘发生中的作用

目的 探讨T淋巴细胞在儿童支气管哮喘发生中的作用。方法 应用流式细胞术对24例发作期支气管哮喘患儿和21例正常对照组儿童外周血T淋巴细胞亚群、血浆IgE等进行检测。结果 1.发作期患儿外周血T细胞亚群CD3~+、CD4~+与正常对照组比较差异均无显著意义,发作期CD8~+低于正常对照组(P<0.01)、而CD~+/CD~+高于正常对照组(P均<0.01);2.发作期患儿CD_(23)~+、CD_(19)~+、IgE和嗜酸性粒细胞计数(EBC)明显高于正常对照组(P均<0.01);3.同IgE浓度CD_(23)~+(R=0.575 P<0.001)及CD_(19)~+(r=0.372 P<0.05)均呈正相关,CD_(23)~+与CD_(19)~+(r=0.663 P<0.001)呈正相关。结论 1.哮喘患儿外周血T淋巴细胞分布发生变化,哮喘发作期T淋巴细胞处于激活状态;2.CD_(23)~+、IgE在哮喘发生、发展中起重要作用。     

反复扁桃体炎患儿缓解期T细胞亚群及辅助性T淋巴细胞亚群的功能状态

目的探讨反复扁桃体炎(RT)患儿缓解期T淋巴细胞亚群及辅助性T淋巴细胞(Th)亚群功能状态。方法采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测27例RT缓解期和21例健康对照组儿童外周血T细胞亚群的表面分子表达情况;同时采用双抗夹心ELISA法检测两组外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IFN-γ和IL-4水平。结果RT患儿与对照组比较,CD4 和CD3 细胞的表达率均显著下降(P均<0.01),CD4 /CD8 比值失调(P<0.01);与Th1细胞功能相关的IFN-γ细胞因子表达水平显著降低(P<0.01),Th1/Th2比值失调(P<0.01);而CD8 细胞及与Th2细胞功能相关的IL-4细胞因子水平与对照组比较差异均无显著意义(P均>0.05)。结论RT患儿缓解期存在T细胞功能紊乱;Th1亚群功能低下以及Th1/Th2平衡的紊乱可能在RT的发病中起更重要的作用。     

肠套叠患儿外周血Th1/Th2的漂移

目的 探索肠套叠患儿细胞免疫状况的变化.方法 采用流式细胞仪检测肠套叠患儿急性期及对照组外周血T辅助淋巴细胞Th1和Th2的百分率、CD3、CIN+、CD8+、NK细胞、B细胞百分率及C1N/CD8比值.对10例肠套叠恢复期患儿复查淋巴细胞亚群.结果 肠套叠患儿急性期外周血Th1细胞百分率(15.98±9.83)%明显低于对照组(20.83±6.79)%(P＜0.05);肠套叠组Th2细胞百分率(5.48±1.86)%较对照组(4.31±2.02)%明显增高(P＜0.05).Th1/Th2比值,肠套叠组为3.51±2.49,对照组为5.89±3.14,二组比较有非常显著性差异(P＜0.01).急性期NK细胞百分率明显降低(P＜0.05),但肠套叠组B细胞、CD3、CIN+、CD8+及CD4/CD8与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05).10例肠套叠缓解期患儿淋巴细胞亚群结果表明,NK细胞百分率显著升高(P＜0.05),其他各项指标在急性期与缓解期无明显差异.结论 肠套叠患儿最重要的免疫异常是Th1/Th2细胞比例和功能失衡,主要表现为Th2细胞应答优势存在,Th1/Th2显著降低.肠套叠急性期肠道抗感染免疫力下降.     

急性传染性淋巴细胞增多症患儿外周血共刺激分子4-1BB和淋巴细胞亚群的表达及意义

目的探讨急性传染性淋巴细胞增多症(AIL)患儿外周血共刺激分子4-1BB和淋巴细胞亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术(FCM)检测和比较15例AIL患儿、20例急性上呼吸道感染(URI)患儿以及20例健康对照儿童的外周血4-1BB及淋巴细胞亚群的表达。结果 AIL患儿外周血4-1BB的表达及CD3+、CD4+、CD8+的表达均高于URI患儿及对照组,差异有统计学意义(P0.05);URI患儿与对照组间的差异则无统计学意义(P0.05)。三组外周血CD19+CD23+的表达的差异无统计学意义(P0.05)。AIL患儿外周血4-1BB的表达与CD3+的表达成显著正相关(r=0.73,P0.05)。结论4-1BB可能参与了AIL的发病。AIL患儿异常增多的T细胞可能不具备活化B细胞的功能。     

白细胞介素10受体1在食物过敏儿童外周血T淋巴细胞中的表达

目的研究白细胞介素10受体1(IL-10R1)在食物过敏儿童外周血T淋巴细胞的表达及其临床意义。方法选择2017-07-01至2017-12-31在北京大学第三医院儿科食物过敏门诊诊断为食物过敏的50例患儿作为食物过敏组,选择同期在北京大学第三医院儿童健康发展中心行健康体检的25名儿童作为对照组。采用流式细胞技术检测IL-10R1在两组儿童外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率及平均荧光强度值(MFI)。同时比较IL-10R1在过敏原特异性IgE阳性与阴性食物过敏患儿外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率及MFI。根据食物过敏患儿症状、体征严重程度进行赋值评分,分析食物过敏患儿IL-10R1在外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率与食物过敏症状、体征评分有无相关性。结果 IL-10R1在食物过敏组患儿外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率和MFI均低于对照组,IL-10R1在食物过敏组CD4~+T淋巴细胞表达阳性率和MFI中位数分别为40.23、12.18;在对照组CD4~+T2.506、-5.457;P值分别为0.012、0.000)。IL-10R1在食物过敏组CD8~+T淋巴细胞表达阳性率和MFI中位数分别中位数分别为39.46、17.28(Z值分别为-4.035、-5.226;P值分别为0.000、0.000)。IL-10R1在过敏原特异性IgE阳性与阴性患儿外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率及MFI没有差异。食物过敏患儿IL-10R1在外周血CD4~+T及CD8~+T淋巴细胞表达阳性率与食物过敏症状、体征评分无相关性。结论 IL-10R1在外周血CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞表面表达减少可能与食物过敏发病有关;IL-10R1在外周血CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞表面表达在IgE和非IgE介导的食物过敏发病过程中均起作用;IL-10R1在外周血CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞表面表达可能与食物过敏发病严重程度无关。     

传染性单核细胞增多症患儿外周血T细胞亚群与细胞因子动态变化

目的 观察传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿细胞免疫功能动态变化.方法 采用ELISA法和流式细胞仪分别检测30例IM患儿急性期和恢复期外周血T细胞亚群和血清IFN-γ、IL-2,并与32例同龄健康儿童组进行比较.结果 急性期IM患儿IFN-γ、IL-2、CD3、CD8水平显著高于对照组及恢复期(P＜0.01),CD4、CD4/CD8比值显著低于对照组及恢复期(P＜0.01),恢复期患儿外周血CD4升高,细胞因子IFN-γ 、IL-2及外周血CD3、CD8降低,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),恢复期CD4/CD8值仍低于对照组(P＜0.05),但高于急性期(P＜0.01).结论 IM患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子有明显变化,检测其变化规律对评估IM患儿的细胞免疫功能状况,辅助诊断和指导治疗具有重要临床意义.     

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染外周血Th细胞亚群的研究

为探讨RSV下呼吸道感染辅助性T淋巴细胞CD4~+及其亚群CD4~+CD45RA~+、CD4~+CD45RO~+的表达及其意义,用单克隆抗体双色免疫荧光PE/FITC双标记,流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外用血单个核细胞(PBMCs)辅助性T淋巴细胞 CD4~+及其亚群CD4~+CD45RA~+、CD4~+CD45RO~+的表达;同时检测15例年龄、性别无差异的健康儿为对照。结果显示,RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4~+明显低于对照组(P<0.05);CD4~+CD45RA~+细胞明显下降(P<0.05);CD4~+CD45RO~+细胞虽稍有下降,但与对照组相比无统计学差异(P>0.05);CD4~+CD45RA~+/CD4~+CD45RO~+比值与对照组相比明显降低(P<0.05)。表明婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为辅助性T淋巴细胞CD4~+及其亚群CD4~+CD45RA~+/CD4~+CD45RO~+的失衡。     

脂肪间充质干细胞及非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸对食物过敏幼鼠外周血中CD4~+CD25~+Treg的影响

目的观察脂肪间充质干细胞(ADSC)、非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤核苷酸(CpG-ODN)对食物过敏幼鼠外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)的表达水平及免疫干预作用。方法将40只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、过敏组、ADSC治疗组(ADSC组)和非甲基化CpG-ODN治疗组(CpG-ODN组),每组10只;通过卵清蛋白(OVA)腹腔注射基础致敏和灌胃激发致敏建立小鼠食物过敏模型;对照组给予等量生理盐水替代;ADSC组在激发致敏前后两个时间点分别给予腹腔注射ADSC(1×10~6个/只);CpG-ODN组在每次灌胃激发前1 h给予腹腔注射非甲基化CpG-ODN(40μg/只)溶液。模型成功建立后对各组小鼠进行过敏症状评分;酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中OVA-IgE水平;流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4~+CD25~+Treg水平;取各组小鼠空肠行苏木精-伊红染色,进行病理分析。结果过敏组过敏症状评分及血清中OVA-IgE水平均高于对照组(P0.05),ADSC组、CpG-ODN组过敏症状评分及血清中OVAIg E水平比较差异均无统计学意义(P0.05),但均低于过敏组,高于对照组(P0.01)。过敏组外周血中CD4~+CD25~+Treg水平低于对照组(P0.05),ADSC组、CpG-ODN组外周血中CD4~+CD25~+Treg水平均高于过敏组(P0.05),且与对照组比较及两组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。病理结果显示过敏组空肠黏膜层绒毛结构破坏、水肿,大量的嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润;ADSC组和CpG-ODN组空肠黏膜层绒毛结构部分破坏、无明显水肿,有少量嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润。结论 ADSC和非甲基化CpG-ODN干预对食物过敏均有一定的治疗效果;均可提高食物过敏幼鼠体内CD4~+CD25~+Treg水平,同时降低OVA-IgE的表达水平,与诱导免疫耐受有一定的关联作用,且两种干预效果相当,但具体作用机制仍需要进一步探究。     

1~3岁哮喘患儿呼出气一氧化氮水平与外周血嗜酸性粒细胞计数及肺功能的相关性

目的 探讨1~3 岁哮喘(AS)患儿呼出气一氧化氮(FeNO)水平,分析其与肺功能、外周血嗜酸粒细胞(EOS)计数的相关性。方法 111 例1~3 岁AS 患儿纳入该研究,根据症状分为两组:AS 急性期组(n=62)及AS 缓解期组(n=49),对所有患儿进行FeNO、肺功能及外周血EOS 计数检查。另选60 例同龄健康儿童作为对照组。结果 AS 急性期组患儿FeNO 水平(中位数24.4 ppb)高于AS 缓解期组(18.0 ppb)及对照组(13.7 ppb),AS 缓解期组高于对照组(P<0.05)。FeNO 值与肺功能参数(PEF、TEF75、TEF50、TEF25)及外周血EOS 计数均无显著相关性(P>0.05)。结论 测定FeNO 水平可以辅助评价1~3 岁AS 患儿AS 的控制水平,但FeNO水平与肺功能及外周血EOS 计数无关。